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S-5对人肝癌细胞Huh-7增殖和凋亡的影响

中文摘要第4-6页
abstract第6-8页
缩略词表第12-14页
引言第14-16页
一 材料与仪器第16-19页
    1 细胞株第16页
    2 供试药物第16-17页
    3 试剂及耗材第17-18页
    4 主要实验仪器第18-19页
二 所需溶液的配置第19-22页
    1 药物溶液的配置第19页
    2 细胞培养所用溶液的配置第19-20页
        2.1 含 10%胎牛血清的DMEM培养基第19页
        2.2 PBS缓冲溶液第19页
        2.3 0.25%的胰酶消化液第19-20页
        2.4 MTT溶液第20页
        2.5 台盼蓝染液第20页
        2.6 细胞冻存液第20页
    3 Western blot实验所需溶液的配置第20-22页
        3.1 电泳缓冲液第20页
        3.2 电转缓冲液第20页
        3.3 SDS loading buffer上样缓冲液(5×)第20-21页
        3.4 TBST缓冲液第21页
        3.5 封闭液第21页
        3.6 10% 过硫酸铵第21-22页
三 实验方法第22-32页
    1 细胞培养第22-23页
        1.1 细胞的复苏第22页
        1.2 细胞的传代第22页
        1.3 细胞的冻存第22-23页
        1.4 单细胞悬液制备和细胞计数第23页
    2 检测方法第23-32页
        2.1 MTT法检测S-5 对Huh-7 细胞增殖的影响第23-24页
        2.2 流式细胞术(Annexin V-FITC/PI)检测S-5 对Huh-7 细胞凋亡率的影响第24-25页
        2.3 吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双荧光染色法检测细胞凋亡形态第25-26页
        2.4 透射电镜观察Huh-7 细胞形态第26页
        2.5 利用荧光探针JC-1 检测线粒体膜电位的改变第26-27页
        2.6 Western blot检测S-5 对Huh-7 细胞凋亡通路中相关蛋白表达的影响第27-32页
            2.6.1 Huh-7 细胞总蛋白的提取第27-28页
            2.6.2 蛋白浓度的定量测定第28页
            2.6.3 聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳第28-29页
            2.6.4 转膜第29-30页
            2.6.5 染色第30页
            2.6.6 封闭第30页
            2.6.7 孵一抗第30页
            2.6.8 孵二抗第30页
            2.6.9 ECL化学发光显色第30页
            2.6.10 条带分析第30-31页
            2.6.11 统计分析第31-32页
四 结果第32-39页
    1 S-5 对Huh-7 细胞增殖的影响第32-34页
    2 S-5 对Huh-7 细胞凋亡的影响第34-36页
    3 S-5 对线粒体膜电位的影响第36-37页
    4 S-5 对 Huh-7 细胞凋亡通路中相关蛋白表达的影响第37-39页
五 讨论第39-43页
六 结论第43-44页
参考文献第44-46页
综述第46-65页
    参考文献第59-65页
个人简介第65-66页
致谢第66页

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