| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 细胞凋亡概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 细胞凋亡概念 | 第13页 |
| 1.1.2 细胞凋亡通路 | 第13-14页 |
| 1.1.3 细胞凋亡与卵母细胞和胚胎发育的联系 | 第14页 |
| 1.2 caspase 3 | 第14-15页 |
| 1.2.1 caspase家族 | 第14-15页 |
| 1.2.2 caspase 3 在细胞凋亡中的作用 | 第15页 |
| 1.3 组织蛋白酶 | 第15-18页 |
| 1.3.1 组织蛋白酶概述 | 第15-16页 |
| 1.3.2 组织蛋白酶在细胞凋亡中的作用 | 第16-17页 |
| 1.3.3 组织蛋白酶与卵母细胞发育能力的联系 | 第17页 |
| 1.3.4 组织蛋白酶B | 第17页 |
| 1.3.5 组织蛋白酶S | 第17-18页 |
| 1.4 E-64 的性质与应用 | 第18-19页 |
| 1.4.1 E-64 理化性质 | 第18页 |
| 1.4.2 E-64 作用机理 | 第18页 |
| 1.4.3 E-64 的应用 | 第18-19页 |
| 1.5 羔羊超数排卵 | 第19-21页 |
| 1.5.1 羔羊超数排卵原理与方案 | 第19-20页 |
| 1.5.2 羔羊日龄对超数排卵的影响 | 第20页 |
| 1.5.3 超排羔羊卵母细胞的发育能力 | 第20-21页 |
| 1.5.4 存在问题与研究趋势 | 第21页 |
| 1.6 拟解决关键问题及意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要溶液配制 | 第23页 |
| 2.1.4 主要分析工具软件 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法与步骤 | 第24-29页 |
| 2.2.1 绵羊卵母细胞采集 | 第24页 |
| 2.2.2 RNA提取 | 第24-25页 |
| 2.2.3 合成cDNA第一条链 | 第25-26页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR引物 | 第26页 |
| 2.2.5 标准品制备 | 第26-28页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR | 第28页 |
| 2.2.7 双夹心ELISA | 第28-29页 |
| 2.3 试验设计 | 第29-30页 |
| 2.3.1 CTSB、CTSS和caspase 3 基因表达量、蛋白表达量及活性与卵母细胞质量相关性研究 | 第29页 |
| 2.3.2 成年绵羊和羔羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 基因表达量、蛋白表达量及活性差异研究 | 第29页 |
| 2.3.3 体外成熟过程中绵羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 基因表达量变化 | 第29页 |
| 2.3.4 体外成熟过程中绵羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 蛋白表达量及活性变化 | 第29页 |
| 2.3.5 统计分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-49页 |
| 3.0 Real-time PCR检测CTSB、CTSS和caspase 3 在绵羊卵母细胞内基因表达 | 第30-32页 |
| 3.0.1 扩增动力学曲线分析 | 第30-31页 |
| 3.0.2 融温曲线分析 | 第31页 |
| 3.0.3 标准曲线建立及分析 | 第31-32页 |
| 3.1 质量正常与质量差的绵羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 基因表达量、蛋白表达量及酶活性差异 | 第32-33页 |
| 3.2 成年绵羊和羔羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 基因表达量、蛋白表达量及酶活性差异 | 第33-37页 |
| 3.2.1 成年绵羊和羔羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 的基因表达量差异 | 第33-34页 |
| 3.2.2 成年绵羊和羔羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 的蛋白表达量差异 | 第34-36页 |
| 3.2.3 成年绵羊和羔羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 的酶活性差异 | 第36-37页 |
| 3.3 E-64 对成年绵羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 的基因表达量、蛋白表达量及酶活性的影响 | 第37-43页 |
| 3.3.1 E-64 对成年绵羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 的基因表达量的影响 | 第37-39页 |
| 3.3.2 E-64 对成年绵羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 的蛋白表达量的影响 | 第39-41页 |
| 3.3.3 E-64 对成年绵羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 酶活性的影响 | 第41-43页 |
| 3.4 E-64 对羔羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 的基因表达量、蛋白表达量及酶活性的影响 | 第43-49页 |
| 3.4.1 E-64 对羔羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 的基因表达量的影响 | 第43-45页 |
| 3.4.2 E-64 对羔羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 的蛋白表达量的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.3 E-64 对羔羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 酶活性的影响 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 4.1 不同质量卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 活性及蛋白表达量的差异 | 第49页 |
| 4.2 羔羊卵母细胞与成年绵羊卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 活性和表达量差异 | 第49-50页 |
| 4.3 E-64 对卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 基因表达量的影响 | 第50页 |
| 4.4 E-64 对卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 蛋白表达量的影响 | 第50-51页 |
| 4.5 E-64 对卵母细胞内CTSB、CTSS和caspase 3 活性的影响 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 在读期间发表论文 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
