| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-27页 |
| 1.1 毕赤酵母高效表达外源蛋白质研究策略 | 第12-20页 |
| 1.1.1 毕赤酵母基因表达元件 | 第13-17页 |
| 1.1.2 毕赤酵母表达宿主选择与改造 | 第17-19页 |
| 1.1.3 外源基因的改造 | 第19页 |
| 1.1.4 发酵条件优化 | 第19-20页 |
| 1.2 微重力及模拟微重力的生物学研究 | 第20-25页 |
| 1.2.1 微重力及模拟微重力 | 第20-21页 |
| 1.2.2 微重力环境对微生物的影响 | 第21-25页 |
| 1.3 组学数据的挖掘与应用 | 第25页 |
| 1.4 研究意义与研究内容 | 第25-27页 |
| 第2章 SMG环境下组成型毕赤酵母外源蛋白质表达研究 | 第27-49页 |
| 引言 | 第27页 |
| 2.1 材料 | 第27-32页 |
| 2.2 方法 | 第32-40页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第40-48页 |
| 2.3.1 产木聚糖酶和 β-葡萄糖醛酸苷酶的毕赤酵母菌株构建 | 第40-41页 |
| 2.3.2 SMG环境下反应器转速对毕赤酵母生长的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.3 SMG环境下碳源对毕赤酵母生长的影响 | 第42-43页 |
| 2.3.4 SMG环境下毕赤酵母葡萄糖利用率 | 第43-44页 |
| 2.3.5 SMG环境下不同类型毕赤酵母外源蛋白质产量比较 | 第44-45页 |
| 2.3.6 SMG环境连续继代培养的毕赤酵母外源蛋白质产量 | 第45-46页 |
| 2.3.7 SMG环境下毕赤酵母相关基因转录水平 | 第46-47页 |
| 2.3.8 SMG环境下毕赤酵母发酵液pH | 第47页 |
| 2.3.9 SMG环境下毕赤酵母胞内活性氧 | 第47-48页 |
| 2.4 小结 | 第48-49页 |
| 第3章 SMG环境下诱导型毕赤酵母差异蛋白质组学研究 | 第49-66页 |
| 引言 | 第49页 |
| 3.1 材料 | 第49-51页 |
| 3.2 方法 | 第51-55页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第55-60页 |
| 3.3.1 诱导型毕赤酵母在SMG环境下外源蛋白质表达特点 | 第55-56页 |
| 3.3.2 差异蛋白质组学分析 | 第56-60页 |
| 3.3.3 RTFQ-PCR验证差异蛋白质 | 第60页 |
| 3.4 小结 | 第60-66页 |
| 第4章 提高毕赤酵母外源蛋白质产量的辅助功能基因挖掘 | 第66-84页 |
| 引言 | 第66页 |
| 4.1 材料 | 第66-68页 |
| 4.2 方法 | 第68-71页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第71-83页 |
| 4.3.1 共表达辅助功能基因的载体构建 | 第71-74页 |
| 4.3.2 辅助基因对重组PGUS-P的影响 | 第74-78页 |
| 4.3.3 辅助基因对重组AtXYN的影响 | 第78-79页 |
| 4.3.4 辅助基因对重组PGUS-P糖基化修饰的影响 | 第79-80页 |
| 4.3.5 辅助基因对毕赤酵母生长的影响 | 第80页 |
| 4.3.6 相关基因转录水平变化 | 第80-82页 |
| 4.3.7 辅助基因作用机理讨论 | 第82-83页 |
| 4.4 小结 | 第83-84页 |
| 第5章 辅助基因共表达方式对毕赤酵母外源蛋白质产量的影响 | 第84-96页 |
| 引言 | 第84页 |
| 5.1 材料 | 第84-85页 |
| 5.2 方法 | 第85-89页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第89-95页 |
| 5.3.1 共表达两个辅助基因对毕赤酵母产PGUS-P影响 | 第89-90页 |
| 5.3.2 共表达不同拷贝数辅助基因对毕赤酵母产PGUS-P影响 | 第90-91页 |
| 5.3.3 共表达辅助基因所用启动子类型对毕赤酵母产PGUS-P影响 | 第91-93页 |
| 5.3.4 不同碳源对毕赤酵母表达PGUS-P影响 | 第93-94页 |
| 5.3.5 高表达PGUS-P菌株在 2.5 L发酵罐产酶情况 | 第94-95页 |
| 5.4 小结 | 第95-96页 |
| 第6章 结论与展望 | 第96-98页 |
| 6.1 结论 | 第96-97页 |
| 6.2 创新点 | 第97页 |
| 6.3 对今后工作建议与展望 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-109页 |
| 附录 | 第109-124页 |
| 攻读学位期间发表的论文与研究成果清单 | 第124-126页 |
| 致谢 | 第126-127页 |
| 作者简介 | 第127页 |
