中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
1 大肠杆菌病概述 | 第10-26页 |
1.1 大肠杆菌病 | 第10页 |
1.2 病原特性 | 第10-15页 |
1.2.1 形态特征 | 第10-11页 |
1.2.2 血清型 | 第11-12页 |
1.2.3 致病性 | 第12-13页 |
1.2.4 流行病学 | 第13-14页 |
1.2.5 临床症状与病理变化 | 第14-15页 |
1.3 大肠杆菌检测方法的研究 | 第15-18页 |
1.3.1 细菌的分离鉴定 | 第16页 |
1.3.2 荧光免疫测定技术 | 第16页 |
1.3.3 酶免疫分析技术 | 第16-17页 |
1.3.4 DNA探针技术 | 第17页 |
1.3.5 免疫胶体金标记技术 | 第17页 |
1.3.6 聚合酶链反应技术 | 第17-18页 |
1.4 抗菌药物的作用机制 | 第18-20页 |
1.4.1 抑制细菌细胞壁的合成 | 第18-19页 |
1.4.2 抑制细菌合成蛋白质 | 第19页 |
1.4.3 抑制核酸生物合成 | 第19页 |
1.4.4 抑制叶酸生物合成 | 第19-20页 |
1.5 大肠杆菌耐药性研究进展 | 第20-23页 |
1.5.1 耐药机理 | 第20-22页 |
1.5.1.1 主动外排系统 | 第20页 |
1.5.1.2 靶位改变 | 第20页 |
1.5.1.3 多重耐药基因的存在 | 第20页 |
1.5.1.4 细菌耐药基因的获得 | 第20-21页 |
1.5.1.5 药物灭活酶的合成 | 第21页 |
1.5.1.6 细菌外膜通透性的改变 | 第21页 |
1.5.1.7 细菌代谢途径或状态改变 | 第21页 |
1.5.1.8 编码DNA和拓扑异构酶Ⅳ的基因发生点突变 | 第21-22页 |
1.5.2 鸭大肠杆菌耐药现状 | 第22-23页 |
1.6 雏鸭大肠杆菌病防治措施 | 第23-25页 |
1.6.1 场址的选择 | 第23页 |
1.6.2 搞好环境卫生,定时进行消毒工作 | 第23-24页 |
1.6.3 加强种鸭的饲养管理 | 第24页 |
1.6.4 注意孵化环境卫生 | 第24页 |
1.6.5 免疫接种 | 第24页 |
1.6.6 防止其他传染病的发生 | 第24页 |
1.6.7 药物防治 | 第24-25页 |
1.7 本研究的目的意义 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-34页 |
2.1 材料 | 第26-27页 |
2.1.1 病料来源 | 第26页 |
2.1.2 供试药物及培养基 | 第26页 |
2.1.3 分子生物学试剂 | 第26页 |
2.1.4 实验仪器设备 | 第26-27页 |
2.1.5 引物的设计及合成 | 第27页 |
2.2 方法 | 第27-34页 |
2.2.1 细菌的分离培养 | 第27页 |
2.2.2 革兰氏染色及镜检 | 第27页 |
2.2.3 生化试验鉴定 | 第27-28页 |
2.2.4 模版DNA的制备 | 第28页 |
2.2.5 PCR扩增目的片段 | 第28页 |
2.2.6 PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
2.2.7 PCR产物的回收 | 第29-30页 |
2.2.8 目的片段与克隆载体的连接 | 第30页 |
2.2.9 用CaCl2法制备大肠杆菌感受态 | 第30-31页 |
2.2.10 重组质粒的转化 | 第31页 |
2.2.11 质粒的提取 | 第31-32页 |
2.2.12 重组质粒的酶切鉴定 | 第32页 |
2.2.13 阳性克隆序列测定 | 第32页 |
2.2.14 通药敏纸片试验 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-38页 |
3.1 大肠杆菌形态 | 第34页 |
3.2 生化实验鉴定结果 | 第34-35页 |
3.3 大肠杆菌 16S r DNA 序列分析鉴定结果 | 第35-36页 |
3.4 普通药敏纸片试验结果 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
6 参考文献 | 第41-46页 |
附录 | 第46-47页 |
致谢 | 第47页 |