| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 概述 | 第11页 |
| 1.2 Ghrelin的发现 | 第11-12页 |
| 1.3 Ghrelin及其受体GHS-R的结构 | 第12-13页 |
| 1.4 Ghrelin的组织分布 | 第13-14页 |
| 1.5 Ghrelin的生物学作用 | 第14-17页 |
| 1.5.1 Ghrelin对GH分泌的调控作用 | 第14-15页 |
| 1.5.2 Ghrelin在增加食欲,调节能量平衡方面的作用 | 第15页 |
| 1.5.3 Ghrelin与生殖激素的相互作用 | 第15页 |
| 1.5.4 Ghrelin在卵巢组织中的作用 | 第15-16页 |
| 1.5.5 Ghrelin对心血管系统功能的影响 | 第16页 |
| 1.5.6 Ghrelin的其他作用 | 第16-17页 |
| 1.6 Ghrelin的应用前景 | 第17页 |
| 1.7 试验目的和意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-26页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 试验动物及其组织 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器与试剂 | 第19-20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 引物设计及合成 | 第20页 |
| 2.2.2 梅花鹿Ghrelin全长cDNA克隆及其序列分析 | 第20-22页 |
| 2.2.2.1 梅花鹿皱胃黏膜上皮组织总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2.2 3' RACE | 第21页 |
| 2.2.2.3 5' RACE | 第21-22页 |
| 2.2.2.4 3' RACE和5' RACE产物的克隆、筛选、鉴定 | 第22页 |
| 2.2.2.5 DNA序列测定 | 第22页 |
| 2.2.3 梅花鹿体内各组织总RNA的提取及检测 | 第22页 |
| 2.2.4 反转录反应 | 第22-23页 |
| 2.2.5 PCR反应 | 第23-24页 |
| 2.2.6 RT-qPCR反应 | 第24-25页 |
| 2.2.7 数据统计分析 | 第25页 |
| 2.2.8 免疫组织化学法操作程序 | 第25-26页 |
| 2.2.8.1 制备组织连续切片 | 第25页 |
| 2.2.8.2 免疫组织化学染色 | 第25-26页 |
| 3 试验结果 | 第26-39页 |
| 3.1 梅花鹿Ghrelin全长cDNA克隆及其序列分析 | 第26-29页 |
| 3.1.1 3' RACE与5' RACE扩增结果 | 第26页 |
| 3.1.2 梅花鹿Ghrelin cDNA的全序列 | 第26-27页 |
| 3.1.3 梅花鹿Ghrelin cDNA的全序列的同源性比较 | 第27-28页 |
| 3.1.4 梅花鹿Ghrelin编码的氨基酸及其同源性比较 | 第28-29页 |
| 3.2 梅花鹿Ghrelin在各器官内的表达 | 第29-32页 |
| 3.2.1 梅花鹿总RNA的检测 | 第29-30页 |
| 3.2.2 梅花鹿Ghrelin在各组织器官内的定性检测 | 第30-31页 |
| 3.2.2.1 目的引物扩增产物检测 | 第30-31页 |
| 3.2.2.2 内参引物扩增产物检测 | 第31页 |
| 3.2.3 梅花鹿Ghrelin在各组织器官内相对定量检测 | 第31-32页 |
| 3.3 梅花鹿Ghrelin在各器官内的定位检测 | 第32-39页 |
| 3.3.1 梅花鹿Ghrelin在消化管内的定位 | 第32-35页 |
| 3.3.2 梅花鹿Ghrelin在消化腺内的分布 | 第35-36页 |
| 3.3.3 梅花鹿Ghrelin在其他实质性器官内的分布 | 第36-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 4.1 梅花鹿Ghrelin全长cDNA序列分析 | 第39页 |
| 4.2 梅花鹿Ghrelin在各器官内的表达检测 | 第39-40页 |
| 4.3 梅花鹿Ghrelin在各器官内的定位检测 | 第40-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
