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参麦方改善缺血心肌线粒体功能和能量代谢作用机制研究

致谢第4-6页
资助资金第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
1 绪论第15-33页
    1.1 生脉散研究第15-17页
        1.1.1 生脉散简介第15页
        1.1.2 生脉散药理研究进展第15-16页
        1.1.3 生脉散临床应用简介第16-17页
    1.2 参麦方研究概述第17-20页
        1.2.1 参麦方简介第17-18页
        1.2.2 参麦方临床应用简介第18-19页
        1.2.3 参麦方作用机制研究进展第19-20页
    1.3 蛋白质组学第20-25页
        1.3.1 蛋白质组学技术体系第21-23页
        1.3.2 蛋白质组学在中医药研究领域中的应用第23-25页
    1.4 细胞线粒体研究概述第25-32页
        1.4.1 线粒体基本功能与疾病第26-27页
        1.4.2 线粒体与缺氧损伤第27-28页
        1.4.3 线粒体与PGC-1α第28-31页
        1.4.4 线粒体与心血管疾病第31-32页
    1.5 本论文研究内容第32-33页
2 基于iTRAQ技术的参麦方蛋白质组学研究第33-52页
    2.1 材料与仪器第33-35页
        2.1.1 动物来源第33页
        2.1.2 实验药物与试剂第33-34页
        2.1.3 实验仪器第34-35页
    2.2 实验方法第35-38页
        2.2.1 大鼠心肌缺血模型的建立及分组给药第35页
        2.2.2 缺血心脏蛋白样品的提取第35-36页
        2.2.3 基于iTRAQ技术的蛋白质组学检测第36-37页
        2.2.4 差异蛋白分析第37页
        2.2.5 差异蛋白分析的Western blot验证第37页
        2.2.6 统计学分析第37-38页
    2.3 实验结果第38-48页
        2.3.1 蛋白质鉴定结果第38-46页
        2.3.2 差异蛋白功能分类结果第46-47页
        2.3.3 差异蛋白Western blot验证结果第47-48页
    2.4 讨论与小结第48-52页
3 参麦方改善缺氧心肌线粒体功能作用机制研究第52-66页
    3.1 材料与仪器第52-54页
        3.1.1 细胞株来源第52页
        3.1.2 实验药物与试剂第52-53页
        3.1.3 实验仪器第53-54页
    3.2 实验方法第54-58页
        3.2.1 乳鼠原代培养心肌细胞的分离培养第54页
        3.2.2 乳鼠原代培养心肌细胞缺氧模型制备与实验分组第54-55页
        3.2.3 激光扫描共聚焦倒置显微镜观察原代培养心肌细胞线粒体膜电位变化第55页
        3.2.4 化学发光法检测原代心肌细胞内ATP含量第55-56页
        3.2.5 检测原代培养心肌细胞呼吸速率最适细胞数的确定第56页
        3.2.6 海马XF24细胞外通量分析仪对原代培养心肌细胞OCR的检测第56-58页
        3.2.7 统计学分析第58页
    3.3 实验结果第58-63页
        3.3.1 参麦方对缺氧损伤原代培养心肌细胞线粒体膜电位的影响第58-59页
        3.3.2 参麦方对缺氧损伤原代培养心肌细胞内ATP含量的影响第59-60页
        3.3.3 NRVM细胞测定呼吸速率最适细胞数的确定第60-61页
        3.3.4 参麦方对缺氧损伤原代培养心肌细胞有氧呼吸速率的影响第61-63页
    3.4 讨论与小节第63-66页
4 参麦方改善缺氧心肌细胞能量代谢机制研究第66-82页
    4.1 材料与仪器第66-69页
        4.1.1 细胞株来源第66-67页
        4.1.2 实验药物与试剂第67-68页
        4.1.3 实验仪器第68-69页
    4.2 实验方法第69-72页
        4.2.1 乳鼠原代培养心肌细胞的分离培养及鉴定第69页
        4.2.2 乳鼠原代培养心肌细胞缺氧模型制备与实验分组第69页
        4.2.3 CellTiter-Glo(?)发光法细胞活力检测法检测原代培养心肌细胞活力第69-70页
        4.2.4 Western blot法检测原代培养心肌细胞能量代谢相关蛋白的表达第70页
        4.2.5 RT-PCR法检测原代培养心肌细胞能量代谢相关基因的表达第70-72页
        4.2.6 统计学分析第72页
    4.3 实验结果第72-77页
        4.3.1 参麦方对缺氧损伤NRVM细胞活力的影响第72-73页
        4.3.2 参麦方对缺氧损伤NRVM细胞内能量代谢相关蛋白表达的影响第73-76页
        4.3.3 参麦方对缺氧损伤NRVM细胞内能量代谢相关基因转录水平的影响第76-77页
    4.4 讨论与小结第77-82页
5 总结和展望第82-84页
参考文献第84-94页
作者简历第94页

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