致谢 | 第4-6页 |
资助资金 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 绪论 | 第15-33页 |
1.1 生脉散研究 | 第15-17页 |
1.1.1 生脉散简介 | 第15页 |
1.1.2 生脉散药理研究进展 | 第15-16页 |
1.1.3 生脉散临床应用简介 | 第16-17页 |
1.2 参麦方研究概述 | 第17-20页 |
1.2.1 参麦方简介 | 第17-18页 |
1.2.2 参麦方临床应用简介 | 第18-19页 |
1.2.3 参麦方作用机制研究进展 | 第19-20页 |
1.3 蛋白质组学 | 第20-25页 |
1.3.1 蛋白质组学技术体系 | 第21-23页 |
1.3.2 蛋白质组学在中医药研究领域中的应用 | 第23-25页 |
1.4 细胞线粒体研究概述 | 第25-32页 |
1.4.1 线粒体基本功能与疾病 | 第26-27页 |
1.4.2 线粒体与缺氧损伤 | 第27-28页 |
1.4.3 线粒体与PGC-1α | 第28-31页 |
1.4.4 线粒体与心血管疾病 | 第31-32页 |
1.5 本论文研究内容 | 第32-33页 |
2 基于iTRAQ技术的参麦方蛋白质组学研究 | 第33-52页 |
2.1 材料与仪器 | 第33-35页 |
2.1.1 动物来源 | 第33页 |
2.1.2 实验药物与试剂 | 第33-34页 |
2.1.3 实验仪器 | 第34-35页 |
2.2 实验方法 | 第35-38页 |
2.2.1 大鼠心肌缺血模型的建立及分组给药 | 第35页 |
2.2.2 缺血心脏蛋白样品的提取 | 第35-36页 |
2.2.3 基于iTRAQ技术的蛋白质组学检测 | 第36-37页 |
2.2.4 差异蛋白分析 | 第37页 |
2.2.5 差异蛋白分析的Western blot验证 | 第37页 |
2.2.6 统计学分析 | 第37-38页 |
2.3 实验结果 | 第38-48页 |
2.3.1 蛋白质鉴定结果 | 第38-46页 |
2.3.2 差异蛋白功能分类结果 | 第46-47页 |
2.3.3 差异蛋白Western blot验证结果 | 第47-48页 |
2.4 讨论与小结 | 第48-52页 |
3 参麦方改善缺氧心肌线粒体功能作用机制研究 | 第52-66页 |
3.1 材料与仪器 | 第52-54页 |
3.1.1 细胞株来源 | 第52页 |
3.1.2 实验药物与试剂 | 第52-53页 |
3.1.3 实验仪器 | 第53-54页 |
3.2 实验方法 | 第54-58页 |
3.2.1 乳鼠原代培养心肌细胞的分离培养 | 第54页 |
3.2.2 乳鼠原代培养心肌细胞缺氧模型制备与实验分组 | 第54-55页 |
3.2.3 激光扫描共聚焦倒置显微镜观察原代培养心肌细胞线粒体膜电位变化 | 第55页 |
3.2.4 化学发光法检测原代心肌细胞内ATP含量 | 第55-56页 |
3.2.5 检测原代培养心肌细胞呼吸速率最适细胞数的确定 | 第56页 |
3.2.6 海马XF24细胞外通量分析仪对原代培养心肌细胞OCR的检测 | 第56-58页 |
3.2.7 统计学分析 | 第58页 |
3.3 实验结果 | 第58-63页 |
3.3.1 参麦方对缺氧损伤原代培养心肌细胞线粒体膜电位的影响 | 第58-59页 |
3.3.2 参麦方对缺氧损伤原代培养心肌细胞内ATP含量的影响 | 第59-60页 |
3.3.3 NRVM细胞测定呼吸速率最适细胞数的确定 | 第60-61页 |
3.3.4 参麦方对缺氧损伤原代培养心肌细胞有氧呼吸速率的影响 | 第61-63页 |
3.4 讨论与小节 | 第63-66页 |
4 参麦方改善缺氧心肌细胞能量代谢机制研究 | 第66-82页 |
4.1 材料与仪器 | 第66-69页 |
4.1.1 细胞株来源 | 第66-67页 |
4.1.2 实验药物与试剂 | 第67-68页 |
4.1.3 实验仪器 | 第68-69页 |
4.2 实验方法 | 第69-72页 |
4.2.1 乳鼠原代培养心肌细胞的分离培养及鉴定 | 第69页 |
4.2.2 乳鼠原代培养心肌细胞缺氧模型制备与实验分组 | 第69页 |
4.2.3 CellTiter-Glo(?)发光法细胞活力检测法检测原代培养心肌细胞活力 | 第69-70页 |
4.2.4 Western blot法检测原代培养心肌细胞能量代谢相关蛋白的表达 | 第70页 |
4.2.5 RT-PCR法检测原代培养心肌细胞能量代谢相关基因的表达 | 第70-72页 |
4.2.6 统计学分析 | 第72页 |
4.3 实验结果 | 第72-77页 |
4.3.1 参麦方对缺氧损伤NRVM细胞活力的影响 | 第72-73页 |
4.3.2 参麦方对缺氧损伤NRVM细胞内能量代谢相关蛋白表达的影响 | 第73-76页 |
4.3.3 参麦方对缺氧损伤NRVM细胞内能量代谢相关基因转录水平的影响 | 第76-77页 |
4.4 讨论与小结 | 第77-82页 |
5 总结和展望 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
作者简历 | 第94页 |