| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第14-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-25页 |
| 1.1 宫内发育迟缓(IUGR)猪现状 | 第15-17页 |
| 1.2 脐带和脐带血的利用 | 第17-19页 |
| 1.2.1 脐带的形成 | 第17页 |
| 1.2.2 脐带血的功能以及动静脉血差异 | 第17-18页 |
| 1.2.3 脐带血的利用与研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 EXOSOME的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.3.1 Exosome的发现 | 第19-21页 |
| 1.3.2 Exosome的分离与研究 | 第21页 |
| 1.3.3 Exosome的功能 | 第21-22页 |
| 1.4 细胞外MIRNA | 第22-23页 |
| 1.4.1 miRNA概况 | 第22页 |
| 1.4.2 细胞外miRNA的发现 | 第22页 |
| 1.4.3 血液细胞外miRNA的生物学功能 | 第22-23页 |
| 1.5 本研究的目的与主要内容 | 第23-25页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第23-24页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-33页 |
| 2.1 实验猪只和脐带血收集 | 第25-26页 |
| 2.1.1 实验样本的选择 | 第25页 |
| 2.1.2 脐带血的收集 | 第25-26页 |
| 2.2 脐带血EXOSOME的AFM检测 | 第26-27页 |
| 2.2.1 脐带血exosome的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.2 脐带血exosome的AFM检测 | 第27页 |
| 2.3 脐带血EXOSOME中RNA的抽提和分析 | 第27-28页 |
| 2.3.1 脐带血exosome中RNA的抽提 | 第27页 |
| 2.3.2 脐带血exosome中RNA的质量分析 | 第27-28页 |
| 2.4 SMALL RNA测序及其功能与表达谱分析 | 第28-33页 |
| 2.4.1 脐带血样品的分组和small RNA文库的构建 | 第28-29页 |
| 2.4.2 Small RNA测序 | 第29页 |
| 2.4.3 测序数据处理 | 第29-31页 |
| 2.4.4 靶基因的预测和功能分析 | 第31页 |
| 2.4.5 miRNA表达水平的q-PCR定量检测 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-65页 |
| 3.1 脐带血EXOSOME的形态和尺寸检测 | 第33-34页 |
| 3.2 MIRNA-SEQ测序质量评估 | 第34-35页 |
| 3.3 猪脐带血EXOSOME中MIRNAs的鉴定和分析 | 第35-38页 |
| 3.3.1 猪脐带血exosome中small RNA测序高通量数据结果 | 第35-37页 |
| 3.3.2 猪脐带血exosome中miRNA的鉴定和预测 | 第37-38页 |
| 3.4 猪脐带血EXOSOME中高表达MIRNAS的主要功能 | 第38-43页 |
| 3.4.1 猪脐带血exosome中高表达miRNAs的鉴定和分析 | 第38-41页 |
| 3.4.2 脐带动静脉血中高表达miRNAs的靶基因预测及其功能 | 第41-43页 |
| 3.5 脐静脉血和脐动脉血的功能差异分析 | 第43-46页 |
| 3.5.1 脐静脉血和脐动脉血exosome中miRNAs的表达差异 | 第43-44页 |
| 3.5.2 脐带动静脉血中差异表达miRNAs的功能富集分析 | 第44-46页 |
| 3.6 IUGR猪与正常猪脐静脉血与动脉血EXOSOME中MIRNAs的差异表达 | 第46-47页 |
| 3.7 脐带血EXOSOME中MIRNAs对IUGR猪形成的表观遗传调控 | 第47-57页 |
| 3.7.1 脐带血exosome中miRNAs对IUGR猪形成的作用 | 第47-48页 |
| 3.7.2 IUGR猪和正常猪脐动静脉血exosome中差异表达miRNAs功能富集分析 | 第48-51页 |
| 3.7.3 IUGR猪脐静脉血中与氧气运输和调控相关miRNAs异常表达 | 第51-52页 |
| 3.7.4 IUGR猪胚胎发育过程中血管生成受阻 | 第52-54页 |
| 3.7.5 IUGR猪胚胎免疫系统发育不全 | 第54-55页 |
| 3.7.6 IUGR猪胚胎能量代谢异常 | 第55-57页 |
| 3.8 MIRNA簇 | 第57-62页 |
| 3.9 MIRNA种子序列分析 | 第62-64页 |
| 3.10 测序结果的可靠性验证 | 第64-65页 |
| 4 分析与讨论 | 第65-77页 |
| 4.1 猪具有作为人类动物模型的优势 | 第65页 |
| 4.2 减少IUGR猪的形成有利于养殖经济效益的提高 | 第65-66页 |
| 4.3 关于猪脐带血EXOSOME | 第66页 |
| 4.4 关于MIRNA和猪脐带血EXOSOME MIRNAS | 第66-67页 |
| 4.5 脐带血EXOSOME中高表达MIRNAs对胚胎发育具有重要作用 | 第67-68页 |
| 4.6 脐动脉血和脐静脉血功能差异 | 第68-69页 |
| 4.7 脐带血EXOSOME中MIRNAs对IUGR猪的形成具有调控作用 | 第69-70页 |
| 4.8 脐带血EXOSOME中MIRNAs对IUGR猪形成的表观遗传调控 | 第70-75页 |
| 4.8.1 正常猪和IUGR猪脐带动静脉血exosome中差异miRNA的功能分析 | 第70-71页 |
| 4.8.2 与氧气运输和调控相关的miRNAs | 第71-73页 |
| 4.8.3 与血管生成相关的miRNAs | 第73-74页 |
| 4.8.4 与免疫系统发育相关的差异表达miRNAs | 第74-75页 |
| 4.8.5 与能量代谢相关的差异表达miRNAs | 第75页 |
| 4.9 将脐带血EXOSOME中特异MIRNAs作为早期核酸诊断和治疗 | 第75-77页 |
| 5 结论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第98页 |
