致谢 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-16页 |
·研究背景与意义 | 第9页 |
·海藻糖的性质和特性 | 第9-10页 |
·海藻糖的性质 | 第9页 |
·海藻糖的生物学特性及保护机理 | 第9-10页 |
·海藻糖的应用 | 第10页 |
·海藻糖的检测方法 | 第10-11页 |
·纸层析法 | 第11页 |
·葸酮比色法 | 第11页 |
·气相色谱 | 第11页 |
·高效液相色谱 | 第11页 |
·海藻糖的制备方法 | 第11-12页 |
·微生物抽提法 | 第11-12页 |
·发酵法 | 第12页 |
·酶法 | 第12页 |
·酶法合成海藻糖的研究 | 第12-13页 |
·以葡萄糖为底物生成海藻糖 | 第13页 |
·以淀粉为底物生成海藻糖 | 第13页 |
·以麦芽糖为为底物生成海藻糖 | 第13页 |
·海藻糖合酶制备海藻糖的研究进展 | 第13-16页 |
第二章 施氏假单胞菌海藻糖合酶的基因克隆与表达 | 第16-34页 |
·实验材料 | 第16-19页 |
·菌株与质粒 | 第16页 |
·酶与试剂 | 第16页 |
·培养基与储液 | 第16-18页 |
·主要仪器设备 | 第18页 |
·相关引物 | 第18-19页 |
·实验方法 | 第19-26页 |
·重组质粒的构建 | 第19-24页 |
·重组大肠杆菌质粒的转化 | 第24页 |
·重组大肠杆菌的诱导表达 | 第24-25页 |
·海藻糖的定量检测 | 第25页 |
·海藻糖合酶酶活测定 | 第25-26页 |
·Bradford法测定蛋白浓度 | 第26页 |
·结果与讨论 | 第26-33页 |
·treS基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 | 第26-30页 |
·重组大肠杆菌的诱导表达 | 第30页 |
·海藻糖合酶酶学性质分析 | 第30-33页 |
·本章小结 | 第33-34页 |
第三章 海藻糖合酶的固定化及其在海藻糖生产中的应用 | 第34-44页 |
·实验材料 | 第34-35页 |
·菌种 | 第34页 |
·主要实验仪器 | 第34页 |
·实验试剂的制备 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-36页 |
·固定化酶的制备 | 第35页 |
·酶活测定 | 第35-36页 |
·反应转化液中糖的检测 | 第36页 |
·Bradford法测定蛋白浓度 | 第36页 |
·计算方法 | 第36页 |
·固定化酶的表征方法 | 第36页 |
·结果与讨论 | 第36-42页 |
·固定化条件对固定化效果的影响 | 第36-37页 |
·固定化酶酶学性质研究 | 第37-39页 |
·固定化酶生产海藻糖 | 第39-41页 |
·固定化前后载体表面结构的变化 | 第41-42页 |
·本章小结 | 第42-44页 |
第四章 利用透性化处理的重组菌株全细胞催化生产海藻糖 | 第44-52页 |
·实验材料 | 第44-45页 |
·菌种 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·培养基 | 第44页 |
·主要仪器设备 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-46页 |
·菌种培养方法 | 第45页 |
·透性化细胞的制备 | 第45页 |
·全细胞催化反应 | 第45页 |
·分析方法 | 第45-46页 |
·结果与讨论 | 第46-51页 |
·OD值与菌体浓度曲线 | 第46页 |
·透性化过程的优化 | 第46-48页 |
·透性化细胞催化工艺的优化 | 第48-50页 |
·最适条件下的全细胞催化反应 | 第50-51页 |
·结论 | 第51-52页 |
第五章 结论与展望 | 第52-53页 |
·结论 | 第52页 |
·展望 | 第52-53页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
附录 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |