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黑曲霉固态发酵制备β-甘露聚糖酶及其分离纯化

致谢第1-4页
摘要第4-5页
Abstract第5-10页
1 前言第10-11页
2 文献综述第11-19页
   ·木质纤维素第11页
   ·甘露聚糖第11-12页
   ·β-甘露聚糖酶的研究进展第12-17页
     ·β-甘露聚糖酶的来源与分类第12-13页
     ·β-甘露聚糖酶的作用方式与水解产物第13-14页
     ·β-甘露聚糖酶的诱导表达与生物合成第14-15页
     ·β-甘露聚糖酶的应用第15-17页
       ·在食品行业中的应用第16页
       ·在饲料行业中的应用第16页
       ·在生物脱胶中的应用第16页
       ·在造纸工业中的应用第16页
       ·在其他工业中的应用第16-17页
   ·β-甘露聚糖酶的分离纯化第17-18页
   ·研究内容、目的与意义第18-19页
3 黑曲霉摇瓶固态发酵培养基优化第19-35页
   ·材料和方法第19-23页
     ·菌种第19页
     ·材料第19页
     ·试剂配制第19-20页
       ·柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液(pH5.0)第19页
       ·DNS 试剂第19页
       ·洋槐豆胶溶液(5.0 g/L)第19页
       ·pNPM 溶液(1 mmol/L)第19-20页
       ·Na_2CO_3溶液(1 mol/L)第20页
     ·实验方法第20页
       ·培养基第20页
       ·β-甘露聚糖酶的制备第20页
     ·分析方法第20-23页
       ·水分含量的测定第20页
       ·纤维素、木聚糖和木质素含量测定第20-21页
       ·β-甘露聚糖酶活力测定第21页
       ·β-甘露糖苷酶活力测定第21-22页
       ·可溶性蛋白的测定第22页
       ·水解液中糖浓度测定第22-23页
   ·结果与讨论第23-34页
     ·木质纤维原料成分分析第23页
     ·黑曲霉产酶培养基优化第23-34页
       ·碳源对黑曲霉合成β-甘露聚糖酶的影响第23-24页
       ·木质纤维素替代麸皮对β-甘露聚糖酶合成的影响第24-25页
       ·添加物对β-甘露聚糖酶合成的影响第25页
       ·低聚木糖废渣与麸皮质量比对β-甘露聚糖酶合成的影响第25-26页
       ·初始含水率对产酶的影响第26-27页
       ·氮源对产酶的影响第27-28页
       ·响应面优化发酵培养基第28-33页
       ·黑曲霉固态发酵合成β-甘露聚糖酶的历程第33-34页
   ·本章小结第34-35页
4 曲盘发酵及粗酶表观酶学性质研究第35-46页
   ·材料和方法第35-37页
     ·菌种第35页
     ·材料第35页
     ·试剂配制第35页
       ·柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液(pH5.0)第35页
       ·DNS 试剂第35页
       ·洋槐豆胶溶液(5.0 g/L)第35页
       ·pNPM 溶液(1 mmol/L)第35页
       ·Na_2CO_3溶液(1 mol/L)第35页
     ·分析方法第35-36页
       ·水分含量的测定第35页
       ·β-甘露聚糖酶活力测定第35页
       ·β-甘露糖苷酶活力测定第35-36页
     ·曲盘发酵方法第36页
       ·培养基第36页
       ·孢子悬液的制备第36页
       ·曲盘发酵第36页
       ·粗酶液的制备第36页
     ·表观酶学性质的测定第36-37页
       ·β-甘露聚糖酶和β-甘露糖苷酶的最适反应温度第36页
       ·β-甘露聚糖酶和β-甘露糖苷酶的热稳定性第36页
       ·β-甘露聚糖酶和β-甘露糖苷酶的最适反应 pH 值第36-37页
       ·β-甘露聚糖酶和β-甘露糖苷酶的酸碱稳定性第37页
   ·结果与讨论第37-44页
     ·培养基初始含水率对产酶的影响第37-38页
     ·装料量对曲盘固态发酵产酶的影响第38页
     ·接种量对曲盘固态发酵产酶的影响第38-39页
     ·β-甘露聚糖酶和β-甘露糖苷酶的表观酶学性质第39-42页
       ·β-甘露聚糖酶的适宜温度和热稳定性第39-40页
       ·β-甘露聚糖酶的适宜 pH 值及酸碱稳定性第40-42页
     ·β-甘露糖苷酶的表观酶学性质第42-44页
       ·β-甘露糖苷酶的最适温度和热稳定性第42-43页
       ·β-甘露糖苷酶的最适 pH 值和酸碱稳定性第43-44页
   ·本章小结第44-46页
5 β-甘露聚糖酶的分离纯化及酶学性质研究第46-60页
   ·材料和方法第46-49页
     ·材料第46页
     ·分析方法第46页
       ·β-甘露聚糖酶活力测定第46页
       ·β-甘露糖苷酶活力测定第46页
       ·可溶性蛋白的测定第46页
     ·分离纯化方法第46-48页
       ·硫酸铵沉淀第46页
       ·脱盐和浓缩第46页
       ·蛋白纯化系统及层析柱第46-47页
       ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第47-48页
     ·β-甘露聚糖酶酶学性质研究第48-49页
       ·β-甘露聚糖酶的最适反应温度第48页
       ·β-甘露聚糖酶的热稳定性第48页
       ·β-甘露聚糖酶的最适反应 pH 值第48页
       ·β-甘露聚糖酶的酸碱稳定性第48页
       ·β-甘露聚糖酶的动力学性质研究第48-49页
   ·结果与讨论第49-59页
     ·β-甘露聚糖酶的分离纯化第49-56页
       ·β-甘露聚糖酶粗酶液的硫酸铵沉淀第49-51页
       ·脱盐第51页
       ·Source 15Q 阴离子交换层析第51-53页
       ·Superdex 75 Prep Grade 凝胶过滤层析第53-54页
       ·DEAE Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析第54-55页
       ·分离纯化各步骤及相关参数变化第55-56页
     ·β-甘露聚糖酶的酶学性质第56-59页
       ·β-甘露聚糖酶的最适温度及热稳定性第56-57页
       ·β-甘露聚糖酶的最适 pH 值及酸碱稳定性第57-58页
       ·β-甘露聚糖酶动力学性质第58-59页
   ·本章小结第59-60页
6 结论第60-62页
参考文献第62-67页

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