| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| ·天然橡胶的生产现状 | 第10页 |
| ·天然橡胶生物合成的分子机制 | 第10-12页 |
| ·橡胶生物合成关键酶及相关基因 | 第12-13页 |
| ·WRKY转录因子家族 | 第13-23页 |
| ·WRKY转录因子的结构域及其进化 | 第14-15页 |
| ·顺式作用元件W-box | 第15-16页 |
| ·WRKY基因家族的生物学功能 | 第16-23页 |
| ·WRKY转录因子在生物胁迫中的作用 | 第16-19页 |
| ·WRKY转录因子在非生物胁迫中的作用 | 第19-21页 |
| ·WRKY转录因子在植物生长发育、代谢及衰老中的作用 | 第21-23页 |
| ·目的和意义 | 第23-25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-58页 |
| ·材料与试剂 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·载体及菌株 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·方法与步骤 | 第27-58页 |
| ·小橡胶粒子蛋白基因HbSRPP启动子的克隆 | 第27-31页 |
| ·橡胶树基因组DNA的提取 | 第27页 |
| ·Genome Walker文库的构建及Genome Walker DNA Walking | 第27-31页 |
| ·诱饵载体筛选胶乳cDNA文库及阳性克隆的分离 | 第31-40页 |
| ·诱饵载体pHis2-pSRPP的构建 | 第31-33页 |
| ·诱饵载体pHis2-pSRPP 3-AT浓度的筛选 | 第33-34页 |
| ·胶乳cDNA文库的构建 | 第34-37页 |
| ·诱饵载体筛选cDNA文库 | 第37-38页 |
| ·阳性克隆的分离验证 | 第38-39页 |
| ·阳性克隆的互作分析 | 第39-40页 |
| ·HbWRKY1基因的组织特异性表达分析 | 第40-41页 |
| ·转录因子HbWRKY1的功能分析 | 第41-58页 |
| ·HbWRKY1的亚细胞定位 | 第41-43页 |
| ·HbWRKY1/GST融合蛋白的表达分析及Western杂交 | 第43-47页 |
| ·HbWRKY1的功能鉴定 | 第47-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-80页 |
| ·橡胶树小橡胶粒子蛋白基因HbSRPP启动子的克隆 | 第58-60页 |
| ·诱饵载体筛选胶乳cDNA文库及阳性克隆的分离 | 第60-65页 |
| ·诱饵载体的构建 | 第60-61页 |
| ·诱饵载体pHis2-pSRPP的3-AT浓度筛选 | 第61-62页 |
| ·胶乳cDNA文库的构建 | 第62-63页 |
| ·诱饵载体与cDNA文库共转化酵母细胞 | 第63-64页 |
| ·阳性克隆的分离验证 | 第64页 |
| ·阳性克隆的互作分析 | 第64-65页 |
| ·HbWRKY1的生物信息学分析 | 第65-69页 |
| ·HbWRKY1蛋白质特性分析 | 第65-68页 |
| ·HbWRKY1分子进化分析 | 第68-69页 |
| ·HbWRKY1的组织特异性表达分析 | 第69页 |
| ·HbWRKY1转录因子的功能分析 | 第69-80页 |
| ·HbWRKY1的亚细胞定位分析 | 第69-71页 |
| ·HbWRKY1与GFP融合表达载体的构建 | 第70页 |
| ·HbWRKY1的亚细胞定位 | 第70-71页 |
| ·HbWRKY1/GST融合蛋白表达分析及Western blot | 第71-74页 |
| ·pGEX-WRKY1表达载体的构建 | 第71-72页 |
| ·SDS-PAGE检测HbWRKY1/GST融合蛋白的表达情况 | 第72-73页 |
| ·HbWRKY1蛋白的Western blot及纯化 | 第73-74页 |
| ·HbWRKY1的功能鉴定 | 第74-80页 |
| ·HbSRPP启动子转基因烟草的获得 | 第74-76页 |
| ·HbWRKY1转基因烟草的获得 | 第76-78页 |
| ·GUS活性定量分析 | 第78-80页 |
| 4 讨论 | 第80-84页 |
| ·小橡胶粒子蛋白基因HbSRPP启动子的功能分析 | 第80页 |
| ·酵母单杂交的技术及其优缺点 | 第80-82页 |
| ·HbWRKY1转录因子特性分析 | 第82页 |
| ·HbWRKY1与HbSRPP基因之间的调控关系 | 第82-84页 |
| 5 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-94页 |
| 作者在读期间科研成果简介 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
