| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-25页 |
| ·什么是自噬 | 第11页 |
| ·自噬的分类 | 第11-12页 |
| ·自噬的发生过程 | 第12-20页 |
| ·自噬的诱导 | 第12-15页 |
| ·自噬小体的形成 | 第15-17页 |
| ·自噬小体的延伸 | 第17-19页 |
| ·自噬小体的成熟和融合 | 第19-20页 |
| ·细胞自噬的检测方法 | 第20-23页 |
| ·电子显微镜 | 第20-21页 |
| ·Western blotting检测LC3的转换 | 第21页 |
| ·免疫荧光观察GFP-LC3的变化 | 第21-22页 |
| ·mRFP-GFP-LC3的方法 | 第22页 |
| ·长寿命蛋白的降解分析 | 第22-23页 |
| ·经典和非经典的自噬 | 第23页 |
| ·ROS与自噬 | 第23-24页 |
| ·自噬的生理意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要实验仪器 | 第26-27页 |
| ·培养基的配制 | 第27页 |
| ·细胞培养主要方法 | 第27-28页 |
| ·常用试剂的配制 | 第28-31页 |
| ·SDS-PAGE和免疫印记(Western blotting)法 | 第31页 |
| ·细胞免疫荧光染色 | 第31-32页 |
| ·免疫共沉淀 | 第32页 |
| ·蛋白交联实验 | 第32-33页 |
| ·流式细胞仪检测细胞膜电势 | 第33页 |
| ·共聚焦显微镜检测细胞膜电势 | 第33页 |
| ·细胞内活性氧自由基(ROS)的流式细胞仪测定 | 第33-34页 |
| ·细胞线粒体超氧自由基(Mito-SOX)的流式测定 | 第34页 |
| ·MTT筛选试验 | 第34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·碱裂解法大量提取质粒的方法 | 第35-36页 |
| ·真核细胞的转染及稳定细胞株的筛选 | 第36页 |
| ·四环素诱导表达的HeLa-6TR细胞株的筛选 | 第36-37页 |
| ·细胞自噬筛选体系的构建 | 第37页 |
| ·重组RNAi载体的构建 | 第37-38页 |
| ·数据统计与分析 | 第38-39页 |
| 3 研究结果 | 第39-55页 |
| ·能引起细胞自噬的小分子化合物的筛选 | 第39-40页 |
| ·天然小分子化合物X15-2能够诱导HeLa细胞发生自噬 | 第40-45页 |
| ·X15-2能够诱导线粒体损伤和线粒体ROS水平升高,且ROS是X15-2诱导细胞自噬必需的 | 第45-48页 |
| ·X15-2诱导的细胞自噬是Atg5依赖的,也是Beclin 1和Beclin 2共同依赖的 | 第48-50页 |
| ·X15-2能够诱导α-synuclein细胞自噬性降解 | 第50-55页 |
| 4 分析与讨论 | 第55-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 硕士期间发表论文 | 第71页 |
