| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| ·猪圆环病毒概述 | 第11-15页 |
| ·猪圆环病毒的分子生物学研究进展 | 第11-13页 |
| ·PCV2疫苗的研究进展 | 第13-15页 |
| ·杆状病毒概述 | 第15-17页 |
| ·杆状病毒简介 | 第15页 |
| ·杆状病毒为哺乳动物细胞表达载体 | 第15-16页 |
| ·杆状病毒在疫苗中的应用 | 第16-17页 |
| 第二章 研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 第三章 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·材料 | 第18-22页 |
| ·细胞和病毒 | 第18页 |
| ·菌株、质粒与载体 | 第18页 |
| ·酶及主要试剂 | 第18-19页 |
| ·培养基与抗生素 | 第19页 |
| ·缓冲液及其配制 | 第19-22页 |
| ·方法 | 第22-29页 |
| ·酶切反应 | 第22页 |
| ·去磷酸化 | 第22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第22-23页 |
| ·DNA片段与载体连接 | 第23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·质粒与连接产物的转化 | 第23-24页 |
| ·提取重组Bacmid DNA | 第24-25页 |
| ·重组杆状病毒的获得 | 第25页 |
| ·重组杆状病毒感染Sf9细胞 | 第25-26页 |
| ·重组杆状病毒转导Hela细胞 | 第26页 |
| ·间接免疫荧光(IFA) | 第26页 |
| ·Westernblotting | 第26-27页 |
| ·微量中和试验 | 第27-28页 |
| ·ELISA的操作步骤 | 第28页 |
| ·小鼠的免疫 | 第28-29页 |
| 第四章 结论与分析 | 第29-41页 |
| ·杆状病毒表达系统介导的猪圆环病毒2型重组毒疫苗的构建 | 第29-36页 |
| ·PCV2 ORF2基因的扩增 | 第29页 |
| ·转移载体pc-SV40-ie1的构建 | 第29-30页 |
| ·转移载体pFastBac-VSVG-SV40-ie1的构建 | 第30-31页 |
| ·转移载体pFastBac-VSVG-SV40-ie1-EGFP和pFastBac-VSVG-SV40-ie1-ORF2的构建 | 第31-32页 |
| ·重组穿梭载体Bacmid-ie1-EGFP和Bacmid-ie1-ORF2的构建 | 第32-33页 |
| ·重组杆状病毒Ac-ie1-EGFP和Ac-ie1-ORF2的获得 | 第33页 |
| ·重组杆状病毒Ac-ie1-EGFP、Ac-ie1-ORF2的纯度与滴度测定 | 第33页 |
| ·重组杆状病毒Ac-ie1-EGFP感染Sf9细胞 | 第33页 |
| ·重组杆状病毒Ac-ie1-EGFP转导哺乳动物细胞 | 第33-35页 |
| ·重组杆状病毒Ac-ie1-ORF2感染昆虫动物细胞 | 第35页 |
| ·重组杆状病毒Ac-ie1-ORF2在小鼠体内诱发的免疫 | 第35-36页 |
| ·杆状病毒表达系统介导的猪圆环Ⅱ型亚单位疫苗的构建 | 第36-41页 |
| ·转移载体pFastBacDual-Pph-ORF2的构建 | 第36-37页 |
| ·转移载体pFastBacDual-2ORF2的构建 | 第37页 |
| ·穿梭质粒Bacmid-2ORF2的构建 | 第37-38页 |
| ·重组杆状病毒Ac-2ORF2的制备 | 第38页 |
| ·重组杆状病毒Ac-2ORF2感染昆虫细胞的表达分析 | 第38-39页 |
| ·重组杆状病毒Ac-2ORF2在小鼠体内诱发的免疫 | 第39-41页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·重组杆状病毒Ac-ie1-ORF2的构建 | 第41页 |
| ·重组杆状病毒Ac-2ORF2的构建 | 第41-42页 |
| ·两种杆状病毒表达系统制备的疫苗在小鼠体内诱导的保护性免疫 | 第42页 |
| ·结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
