| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1. 文献综述 | 第13-21页 |
| ·猪流行性腹泻(PED) | 第13-15页 |
| ·PEDV病原学特征 | 第13-14页 |
| ·PEDV抗原性 | 第14页 |
| ·PEDV基因组结构 | 第14-15页 |
| ·PEDV抗原表位 | 第15页 |
| ·PED免疫学特征 | 第15-18页 |
| ·感染抗体与免疫保护机制 | 第15-16页 |
| ·PED疫苗 | 第16-18页 |
| ·消化道黏膜免疫的研究进展 | 第18页 |
| ·减毒沙门氏菌作为口服疫苗载体的研究进展 | 第18-20页 |
| ·沙门氏菌疫苗研究进展 | 第19页 |
| ·弱毒沙门氏菌作为疫苗载体的研究进展 | 第19-20页 |
| ·减毒沙门氏菌载体在基因免疫中的应用 | 第20-21页 |
| 2. 研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 3. 材料与方法 | 第22-46页 |
| ·材料 | 第22-27页 |
| ·质粒、菌株和抗体 | 第22-23页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·主要试剂、药品与试剂盒 | 第23-24页 |
| ·所需主要实验器材 | 第24页 |
| ·主要培养基及缓冲液的配制 | 第24-26页 |
| ·引物的设计与合成 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-46页 |
| ·PEDV COE基因和SD基因的扩增 | 第27-29页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第29-30页 |
| ·目的基因的克隆及测序 | 第30页 |
| ·PEDV COE和SD基因表达载体的构建和在大肠杆菌的表达 | 第30-37页 |
| ·重组表达质粒pYA-COE和pYA-SD的构建与鉴定 | 第37页 |
| ·沙门氏菌电转化感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·重组菌pYA-COE和pYA-SD质粒的大景提取 | 第37-38页 |
| ·重组减毒沙门氏菌C501-COE和C501-SD的构建与鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组菌株C501-COE和C501-SD的生物学特性研究 | 第39-41页 |
| ·重组菌株C501-COE和C501-SD小鼠免疫试验 | 第41-45页 |
| ·重组菌株的初步临床保护效果观察 | 第45-46页 |
| 4 结果与分析 | 第46-60页 |
| ·PEDV COE基因和SD基因的扩增及原核表达质粒的构建与鉴定 | 第46-47页 |
| ·重组减毒沙门氏菌C501-COE和C501-SD的构建与鉴定 | 第47-50页 |
| ·重组质粒pYA-COE和pYA-SD的构建与鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组菌株C501-COE和C501-SD的构建与鉴定 | 第48-50页 |
| ·重组菌株C501-COE和C501-SD的生物学特性鉴定 | 第50-52页 |
| ·COE基因和SD基因在重组菌中的表达 | 第50页 |
| ·重组菌株生长特性研究 | 第50-51页 |
| ·重组菌株的表型鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组菌株的遗传稳定性 | 第52页 |
| ·重组菌株的免疫原性检测 | 第52-58页 |
| ·COE蛋白和SD蛋白的抗体检测 | 第52-55页 |
| ·沙门氏菌抗体检测 | 第55-57页 |
| ·细胞免疫检测 | 第57-58页 |
| ·重组疫苗菌株的初步临床效果观察 | 第58-60页 |
| ·重组疫苗的安全性试验 | 第58-59页 |
| ·重组疫苗预防效果观察 | 第59-60页 |
| 5 讨论 | 第60-64页 |
| ·构建重组减毒沙门氏菌表达系统目的基因片段的选择 | 第60-61页 |
| ·减毒沙门氏菌asd载体-宿主平衡致死系统 | 第61页 |
| ·COE基因和SD基因在Aasd C500缺失株平衡致死系统中的表达 | 第61-62页 |
| ·重组沙门氏菌C501-COE和C501-SD在小鼠体内诱导的保护性免疫 | 第62页 |
| ·重组疫苗的临床初步应用 | 第62-64页 |
| 6 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
