| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-18页 |
| 符号及缩略语 | 第18-20页 |
| 第一篇 文献综述 | 第20-71页 |
| 第一章 伏马菌素研究进展 | 第21-37页 |
| 1 伏马菌素的理化特性 | 第21-22页 |
| 2 伏马菌素的毒性及作用机理 | 第22-26页 |
| ·神经毒性 | 第23页 |
| ·肺毒性 | 第23页 |
| ·免疫系统的毒性 | 第23-24页 |
| ·细胞毒性 | 第24页 |
| ·肝肾毒性 | 第24-25页 |
| ·致癌性 | 第25页 |
| ·生殖毒性、胚胎毒性 | 第25-26页 |
| ·伏马菌素与其他真菌毒素之间的互作毒性效应 | 第26页 |
| 3 伏马菌素的污染情况 | 第26-27页 |
| 4 伏马菌素的限量标准 | 第27页 |
| 5 伏马菌素的检测技术 | 第27-31页 |
| ·薄层色谱法 | 第27-28页 |
| ·气相色谱法 | 第28页 |
| ·高效液相色谱法 | 第28-29页 |
| ·液相色谱-质谱联用 | 第29页 |
| ·酶联免疫法 | 第29-30页 |
| ·其他方法 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-37页 |
| 第二章 赭曲霉毒素研究进展 | 第37-55页 |
| 1 赭曲霉毒素的理化特性 | 第37-38页 |
| 2 赭曲霉毒素的毒性及作用机理 | 第38-42页 |
| ·OTA急性毒性 | 第38-39页 |
| ·肾毒性 | 第39页 |
| ·肝毒性 | 第39-40页 |
| ·免疫毒性 | 第40页 |
| ·致癌性 | 第40-41页 |
| ·致畸性 | 第41页 |
| ·毒性作用机理 | 第41-42页 |
| 3 赭曲霉毒素的污染情况 | 第42-44页 |
| 4 赭曲霉毒素的限量 | 第44页 |
| 5 赭曲霉毒素的检测技术 | 第44-49页 |
| ·薄层色谱法 | 第44-46页 |
| ·高效液相色谱-荧光检测器联用法 | 第46页 |
| ·液相-质谱联用法 | 第46-47页 |
| ·免疫学检测法 | 第47页 |
| ·其他检测方法 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 第三章 单链抗体及噬菌体展示技术 | 第55-71页 |
| 1 单链抗体的构建 | 第55-57页 |
| 2 噬菌体展示系统 | 第57-59页 |
| ·丝状噬菌体系统 | 第58页 |
| ·T4噬菌体系统 | 第58-59页 |
| ·λ噬菌体系统 | 第59页 |
| ·T7噬菌体展示系统 | 第59页 |
| 3 单链抗体的表达 | 第59-60页 |
| 4 单链抗体的发展 | 第60-62页 |
| ·靶向载体 | 第61页 |
| ·细胞内免疫 | 第61页 |
| ·构建其它工程抗体 | 第61-62页 |
| ·其他方面研究 | 第62页 |
| 5 单链抗体及噬菌体展示技术的应用 | 第62-66页 |
| ·新型疫苗的研发 | 第62-63页 |
| ·获得稀有的单克隆抗体 | 第63页 |
| ·诊断与免疫治疗 | 第63-64页 |
| ·在蛋白质组学研究中的应用 | 第64页 |
| ·噬菌体展示技术在真菌毒素方面应用 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 第二篇 试验研究 | 第71-169页 |
| 第四章 伏马菌素B_1和赭曲霉毒素A完全抗原的合成与鉴定 | 第73-93页 |
| 1 材料与方法 | 第73-79页 |
| ·试剂与耗材 | 第73-74页 |
| ·实验动物 | 第74页 |
| ·仪器设备 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-87页 |
| ·紫外扫描法鉴定OTA及FB_1完全抗原 | 第79-82页 |
| ·凝胶电泳法鉴定完全抗原 | 第82页 |
| ·红外光谱法鉴定完全抗原 | 第82-84页 |
| ·MALDI-TOF-MS鉴定完全抗原及测定偶联比 | 第84-87页 |
| ·ELISA鉴定完全抗原免疫原性 | 第87页 |
| 3 讨论 | 第87-90页 |
| ·完全抗原的合成 | 第87-88页 |
| ·凝胶电泳法鉴定偶联效果 | 第88-89页 |
| ·完全抗原偶联结合比的确定 | 第89-90页 |
| 4 小结 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-93页 |
| 第五章 伏马菌素B_1单链抗体可变区基因克隆与噬菌体抗体蛋白的原核表达 | 第93-131页 |
| 1 材料与方法 | 第93-114页 |
| ·试剂及耗材 | 第93-94页 |
| ·细胞株、菌株与质粒 | 第94-95页 |
| ·仪器设备 | 第95页 |
| ·引物 | 第95-97页 |
| ·方法 | 第97-114页 |
| 2 结果与分析 | 第114-126页 |
| ·重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL)基因扩增 | 第114页 |
| ·单链抗体可变区基因片段(ScFv)的组装与扩增 | 第114-115页 |
| ·ScFv基因片段T-A亚克隆产物酶切鉴定结果 | 第115-116页 |
| ·pCANTAB5E-ScFv重组质粒构建与鉴定 | 第116-118页 |
| ·FB_1噬菌体抗体库滴度 | 第118页 |
| ·免疫亲和筛选条件确定 | 第118-122页 |
| ·噬菌体单链抗体库的富集结果 | 第122-123页 |
| ·阳性噬菌体单链抗体筛选结果 | 第123-124页 |
| ·噬菌体重组单链抗体的可溶性表达 | 第124-126页 |
| 3 讨论 | 第126-129页 |
| ·噬菌体展示技术及免疫亲和筛选技术 | 第126-127页 |
| ·ELISA筛选技术 | 第127页 |
| ·单链抗体蛋白的原核表达与宿主菌的选择 | 第127-129页 |
| 4 小结 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-131页 |
| 第六章 赭曲霉毒素A单链抗体可变区基因克隆与噬菌体抗体蛋白的原核表达 | 第131-155页 |
| 1 材料与方法 | 第131-142页 |
| ·材料 | 第131页 |
| ·引物 | 第131-136页 |
| ·方法 | 第136-142页 |
| 2 结果与分析 | 第142-150页 |
| ·重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL)基因扩增 | 第142-143页 |
| ·单链抗体可变区基因片段(ScFv)的组装与扩增 | 第143页 |
| ·pCANTAB5E-ScFv重组质粒构建与鉴定 | 第143-146页 |
| ·OTA噬菌体抗体库滴度 | 第146页 |
| ·噬菌体单链抗体库的富集结果 | 第146-147页 |
| ·阳性噬菌体单链抗体筛选结果 | 第147-148页 |
| ·噬菌体重组单链抗体的可溶性表达 | 第148-150页 |
| 3 讨论 | 第150-153页 |
| ·单链抗体可变区基因片段的扩增的引物设计 | 第150-152页 |
| ·单链抗体可变区基因的来源选择 | 第152-153页 |
| 4 小结 | 第153-154页 |
| 参考文献 | 第154-155页 |
| 第七章 伏马菌素B_1和赭曲霉毒素A单链抗体特性鉴定 | 第155-169页 |
| 1 材料及方法 | 第155-158页 |
| ·材料 | 第155页 |
| ·方法 | 第155-158页 |
| 2 结果与分析 | 第158-163页 |
| ·Western Blotting结果 | 第158-159页 |
| ·ELISA分析单链抗体免疫活性结果 | 第159-160页 |
| ·FB_1及OTA单链抗体效价 | 第160-161页 |
| ·单链抗体活性的鉴定结果 | 第161-163页 |
| 3 讨论 | 第163-165页 |
| 4 小结 | 第165-166页 |
| 参考文献 | 第166-169页 |
| 附录 | 第169-183页 |
| 全文总结 | 第183-185页 |
| 全文创新点 | 第185-187页 |
| 致谢 | 第187-189页 |
| 攻读博士期间发表的论文及其他 | 第189页 |
