摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-17页 |
·PEDV 研究进展 | 第10-13页 |
·PED 的历史背景 | 第10页 |
·PED 的危害及流行病学 | 第10页 |
·PEDV 的分子生物学研究进展 | 第10-13页 |
·噬菌体展示技术的研究进展 | 第13-16页 |
·噬菌体展示技术的原理 | 第13-14页 |
·噬菌体展示技术的筛选方法 | 第14-15页 |
·噬菌体展示技术的应用 | 第15-16页 |
·研究的目的和意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-32页 |
·试验材料 | 第17-18页 |
·质粒、工程菌、细胞株、毒株 | 第17页 |
·试验动物 | 第17页 |
·主要工具酶、试剂盒和抗体 | 第17页 |
·主要生化试剂 | 第17页 |
·实验试剂配制 | 第17-18页 |
·仪器设备 | 第18页 |
·试验方法 | 第18-32页 |
·PEDV S_(Δ16)蛋白真核表达载体构建及其稳定表达细胞系的建立 | 第18-21页 |
·重组质粒的鉴定 | 第21-22页 |
·稳定表达细胞株的建立 | 第22-24页 |
·M13 噬菌体多克隆抗体制备 | 第24-25页 |
·噬菌体随机十二肽库对靶分子亲和配体的生物淘选 | 第25-27页 |
·结合克隆的特征鉴定 | 第27-29页 |
·所选短肽配体共有氨基酸序列的推导及合成 | 第29-30页 |
·多肽的生物活性鉴定 | 第30-32页 |
3 试验结果 | 第32-42页 |
·S_(Δ16)蛋白真核表达载体构建及其稳定表达细胞系的建立 | 第32-35页 |
·S_(Δ16)基因的亚克隆 | 第32页 |
·重组质粒 pcDNA3.1-S_(Δ16)的鉴定 | 第32-33页 |
·BHK-21 细胞的 G418 最适工作浓度 | 第33页 |
·稳定表达 S_(Δ16)基因的 BHK-21 单克隆细胞系的筛选及鉴定 | 第33-35页 |
·M13 噬菌体多克隆抗体制备 | 第35-37页 |
·扩增噬菌体滴度及浓度的测定 | 第35页 |
·M13 多克隆抗血清的活性鉴定 | 第35-37页 |
·噬菌体十二肽库对稳定表达细胞系的生物淘选 | 第37-42页 |
·噬菌体十二肽库对靶细胞的淘选结果 | 第37-40页 |
·合成肽的生物活性检测 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-46页 |
·PEDV S_(Δ16)基因真核载体表达质粒的设计与构建 | 第42页 |
·稳定表达 S_(Δ16)蛋白的 BHK-21 细胞系的建立与鉴定 | 第42-43页 |
·M13 多克隆抗体的制备 | 第43页 |
·PEDV S_(Δ16)亲和肽的筛选与鉴定 | 第43-46页 |
·噬菌体肽库对靶细胞 BHK-S_(Δ16)亲和肽的筛选 | 第43-44页 |
·PEDV S_(Δ16)亲和肽的鉴定与功能分析 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第52页 |