| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1 前言 | 第11-30页 |
| ·植物基因启动子的研究进展 | 第11-20页 |
| ·植物基因核心启动子结构特征 | 第11-12页 |
| ·植物基因启动子类型 | 第12-16页 |
| ·特异性启动子 | 第16-20页 |
| ·果实特异性启动子 | 第20-23页 |
| ·番茄E4/E8启动子 | 第21页 |
| ·香蕉BanLac启动子 | 第21-22页 |
| ·香蕉ACC合成酶和氧化酶启动子 | 第22页 |
| ·甜瓜cucumisin启动子 | 第22-23页 |
| ·西瓜AGPL1启动子 | 第23页 |
| ·果实特异启动子的应用 | 第23-24页 |
| ·改善果实品质 | 第23-24页 |
| ·生产目的蛋白 | 第24页 |
| ·启动子克隆的方法 | 第24-28页 |
| ·利用启动子探针载体筛选启动子 | 第24-25页 |
| ·普通PCR克隆启动子 | 第25页 |
| ·以PCR技术为基础的技术克隆启动子 | 第25-28页 |
| ·环状PCR | 第25-26页 |
| ·利用载体或接头的染色体步行技术 | 第26页 |
| ·TAIL-PCR | 第26-28页 |
| ·本实验的研究目的 | 第28-29页 |
| ·研究路线 | 第29-30页 |
| 2 材料、试剂、仪器 | 第30-31页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌种与载体克隆载体 | 第30页 |
| ·生化制剂 | 第30页 |
| ·分子生物学试剂盒 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| 3 颗粒结合淀粉合成酶基因启动子和香蕉凝集素基因启动子的克隆方法 | 第31-39页 |
| ·香蕉基因组DNA提取 | 第31页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子克隆 | 第31-36页 |
| ·TAIL-PCR | 第31-33页 |
| ·回收PCR产物 | 第33-34页 |
| ·回收PCR产物连接 | 第34页 |
| ·连接产物转化E.coli DH5α | 第34页 |
| ·质粒DNA的大量提取 | 第34-35页 |
| ·重组质粒酶切鉴定及测序 | 第35-36页 |
| ·香蕉凝集素基因启动子克隆 | 第36-39页 |
| ·香蕉基因组DNA提取 | 第36页 |
| ·香蕉基因组DNA酶切消化 | 第36页 |
| ·酶切产物纯化 | 第36页 |
| ·纯化后基因组DNA与GenomeWalker Adaptors连接 | 第36-37页 |
| ·以GenomeWalker Libraries为模板的PCR | 第37-38页 |
| ·PCR产物回收 | 第38页 |
| ·回收PCR产物连接和转化 | 第38页 |
| ·重组质粒酶切鉴定及测序 | 第38-39页 |
| 4 颗粒结合淀粉合成酶基因启动子和香蕉凝集素基因启动子植物表达载体构建 | 第39-45页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子植物表达载体构建 | 第39-42页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因基因启动子序列PCR扩增 | 第40页 |
| ·pCAMBIA1304质粒大量提取 | 第40页 |
| ·回收PCR片段及载体片段 | 第40-41页 |
| ·pCAMBIA1304载体连接 | 第41页 |
| ·pCAMBIA1304载体转化大肠杆菌DH5α | 第41页 |
| ·质粒DNA提取及重组子的酶切鉴定、测序 | 第41-42页 |
| ·香蕉凝集素基因启动子植物表达载体构建 | 第42-45页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子序列PCR扩增 | 第43页 |
| ·pCAMBIA1304质粒大量提取 | 第43-44页 |
| ·回收PCR片段及载体片段 | 第44页 |
| ·pCAMBIA1304载体连接 | 第44页 |
| ·PCAMBIA1304载体转化大肠杆菌DH5A | 第44页 |
| ·质粒DNA提取及重组子的酶切鉴定、测序 | 第44-45页 |
| 5 质粒DNA提取及基因枪介导的瞬时转化 | 第45-50页 |
| ·香蕉转化材料的准备 | 第45页 |
| ·基因枪转化 | 第45-46页 |
| ·质粒pCAMBIA1304、p1304BR47、p1304BanLec的大量提取 | 第45页 |
| ·微弹制备 | 第45页 |
| ·基因枪轰击香蕉材料 | 第45-46页 |
| ·GFP活性检测 | 第46页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第46-50页 |
| ·GUS提取液的制备 | 第46页 |
| ·GUS提取液蛋白含量测定 | 第46-48页 |
| ·GUS酶活反应 | 第48页 |
| ·荧光测定 | 第48-50页 |
| 6 结果与分析 | 第50-71页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子与香蕉凝集素基因启动子克隆与序列测定 | 第50-52页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子 | 第50-51页 |
| ·香蕉凝集素基因启动子 | 第51-52页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因与香蕉凝集素基因启动子序列的生物信息学分析 | 第52-65页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子序列生物信息学分析 | 第52-57页 |
| ·香蕉凝集素启动子生物信息学分析 | 第57-65页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子与香蕉凝集素启动子瞬时表达载体构建 | 第65-67页 |
| ·启动子片段获取 | 第65页 |
| ·构建载体 | 第65-67页 |
| ·粒结合淀粉合成酶启动子与香蕉凝集素启动子表达载体GFP荧光检活性分析 | 第67-69页 |
| ·粒结合淀粉合成酶启动子与香蕉凝集素启动子GFP活性检测 | 第67-68页 |
| ·粒结合颗粒结合淀粉合成酶基因启动子与香蕉凝集素启动子表达载体GUS组织化学检测 | 第68-69页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子与香蕉凝集素启动子表达载体GUS酶活检测 | 第69-71页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子GUS酶活检测 | 第69页 |
| ·香蕉凝集素启动子GUS酶活检测 | 第69-71页 |
| 7 讨论 | 第71-74页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子和香蕉凝集素启动子的克隆和分析 | 第71页 |
| ·颗粒结合淀粉合成酶基因启动子克隆和分析 | 第71页 |
| ·香蕉凝集素基因启动子的克隆和分析 | 第71页 |
| ·关于GUS组织化学染色分析和GFP活性检测分析 | 第71-72页 |
| ·GENOME WALKER与TAIL-PCR方法在启动子克隆上的应用 | 第72页 |
| ·关于瞬时表达分析方法的应用 | 第72-73页 |
| ·香蕉果实特异性启动子的研究 | 第73-74页 |
| 8 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 缩写词(ABBREVIATION) | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
