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拟南芥天冬氨酰-tRNA合成酶新功能分析

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-33页
   ·叶片黄化第12-16页
     ·叶绿素合成途径第12-13页
     ·叶绿素降解途径第13-14页
     ·影响叶片黄化的因素第14-15页
     ·叶片黄化衰老与糖含量的关系第15-16页
   ·ABA 的代谢过程第16-19页
     ·ABA 的化学结构第16页
     ·ABA 的生物合成第16-17页
     ·ABA 的分解代谢第17-18页
     ·ABA 与非生物胁迫的关系第18-19页
   ·盐胁迫第19-26页
     ·盐胁迫对植物的主要影响第19-22页
     ·植物对盐胁迫的适应机制第22-24页
     ·盐胁迫信号途径第24-26页
   ·氨酰-tRNA 合成酶第26-31页
     ·氨酰-tRNA 合成酶的结构、分类和氨酰化原理第26-29页
     ·氨酰-tRNA 合成酶的亚细胞定位和附加功能第29-31页
   ·天冬氨酰-tRNA 合成酶的研究进展第31-32页
   ·实验目的第32-33页
2 材料与方法第33-46页
   ·实验材料第33-35页
     ·植物材料第33页
     ·菌株与质粒第33页
     ·酶与各种生化试剂第33页
     ·引物第33-35页
   ·实验方法第35-46页
     ·植物基因组的提取第35页
     ·载体构建第35-37页
       ·PCR 扩增第35-36页
       ·凝胶电泳中 DNA 片段的回收第36页
       ·连接反应第36-37页
       ·超表达 AtAspRS 表达载体的构建第37页
       ·AtAspR 启动子驱动 GUS 报告基因表达载体的构建第37页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第37-38页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第37页
       ·大肠杆菌细胞的转化第37-38页
     ·大肠杆菌中质粒的提取第38页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第38-39页
       ·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备第38-39页
       ·冻融法转化农杆菌细胞第39页
     ·拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定第39-40页
       ·拟南芥的转化第39页
       ·转基因拟南芥的鉴定第39-40页
     ·RNA 的提取纯化与反转录第40-41页
       ·TRIZOL 法提取 RNA第40页
       ·RNA 的纯化第40-41页
       ·RNA 中基因组 DNA 的去除第41页
       ·RNA 的反转录第41页
     ·实时定量 PCR第41-42页
     ·GUS 活性测定第42-43页
     ·转基因植物 GUS 组织化学染色分析第43页
     ·叶绿素含量的测定第43-44页
     ·透射电镜样品制备与观察第44-45页
     ·植株总糖提取与测定第45-46页
3 结果与分析第46-61页
   ·AtAspRS 的表达模式分析第46-47页
   ·超表达 AtAspRS 植株的获得第47-48页
   ·AtAspRS 在拟南芥中的功能鉴定第48-57页
     ·超表达 AtAspRS 植株的表型分析第48-50页
     ·超表达 AtAspRS 植株中叶绿素含量测定第50-51页
     ·透射电子显微镜观察超表达 AtAspRS 植株中叶片细胞形态第51-53页
     ·超表达 AtAspRS 植株总糖测定第53页
     ·超表达 AtAspRS 植株的表达谱分析第53-57页
   ·AtAspRS 在种子萌发中的功能鉴定第57-61页
     ·超表达 AtAspRS 植株增强对 ABA 和高盐的抗性第57-58页
     ·在 ABA 和高盐处理条件下野生型中 AtAspRS 表达量的变化第58-60页
     ·超表达 AtAspRS 植株增强对 H2O2的抗性第60-61页
4 讨论第61-63页
5 结论第63-64页
参考文献第64-74页
致谢第74页

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