| 目录 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-30页 |
| ·鹿茸历史简介 | 第17页 |
| ·有关鹿茸的国内外研究现状 | 第17-27页 |
| ·化学成分研究进展 | 第17-18页 |
| ·多肽功能的研究进展 | 第18-21页 |
| ·多肽生长因子研究进展 | 第21-23页 |
| ·鹿茸天然多肽分离与分析方法研究进展 | 第23-26页 |
| ·鹿茸多肽制剂的研究概况 | 第26-27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27-28页 |
| ·研究内容 | 第28页 |
| ·创新点 | 第28页 |
| ·技术路线图 | 第28-30页 |
| 第2章 天然梅花鹿茸多肽的提取分离及理化性质研究 | 第30-60页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·主要材料与试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-40页 |
| ·鹿茸蛋白多肽粗品的制备 | 第31页 |
| ·总蛋白多肽的测定(Bicinchoninic acid(BCA)试剂盒法) | 第31-32页 |
| ·鹿茸多肽粗提液的SDS-PAGE分析 | 第32-34页 |
| ·阴阳离子交换柱的选择(纸电泳法) | 第34-37页 |
| ·Sephadex G-50凝胶层析柱纯化鹿茸多肽 | 第37页 |
| ·E-玫瑰花环实验 | 第37-39页 |
| ·反相液相色谱纯化梅花鹿茸多肽 | 第39页 |
| ·各组分多肽含量的测定 | 第39页 |
| ·样品生物活性的检测 | 第39页 |
| ·样品单体多肽纯度测定及结构分析 | 第39页 |
| ·等电点的估算 | 第39-40页 |
| ·实验结果 | 第40-57页 |
| ·总多肽的回收得率 | 第40页 |
| ·鹿茸多肽粗提液的SDS-PAGE分析 | 第40页 |
| ·离子交换柱的选择 | 第40页 |
| ·离子交换柱对鹿茸多肽的分离效果 | 第40-43页 |
| ·Sephadex G-50柱对鹿茸多肽的分离效果 | 第43-45页 |
| ·反相液相色谱纯化梅花鹿茸多肽的条件优化 | 第45-48页 |
| ·有机相对分离效果的影响 | 第48-52页 |
| ·温度对分离效果的影响 | 第52-55页 |
| ·样品生物活性的比较 | 第55页 |
| ·样品单体多肽纯度测定及结构分析 | 第55-56页 |
| ·不同阶段分离获得样品的纯度及活性比较 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·离子交换柱层析对鹿茸多肽纯化作用 | 第57页 |
| ·凝胶柱层析对鹿茸多肽纯化的作用 | 第57-58页 |
| ·RP-HPLC柱的选择 | 第58页 |
| ·RP-HPLC分离效果影响因素 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第3章 梅花鹿茸多肽基因的构建、克隆、表达与纯化 | 第60-73页 |
| ·实验材料 | 第60-62页 |
| ·载体与细胞株 | 第60页 |
| ·主要分子生物学试剂 | 第60页 |
| ·主要仪器 | 第60-61页 |
| ·主要溶液的配制 | 第61-62页 |
| ·实验方法 | 第62-66页 |
| ·单体多肽目的基因的获取 | 第62-65页 |
| ·梅花鹿茸多肽重组转化子PET-22b-VAP32的诱导表达与纯化 | 第65-66页 |
| ·梅花鹿茸多肽理化性质 | 第66页 |
| ·实验结果 | 第66-69页 |
| ·目的基因的克隆及PCR鉴定 | 第66-67页 |
| ·重组转化子的测序鉴定结果 | 第67页 |
| ·重组菌生长曲线 | 第67-68页 |
| ·梅花鹿茸多肽的诱导表达 | 第68-69页 |
| ·重组梅花鹿茸多肽的纯化 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69-72页 |
| ·表达载体的选择 | 第69-70页 |
| ·表达效果分析 | 第70-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 第4章 重组梅花鹿茸多肽体内生物活性研究 | 第73-82页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·实验动物与细胞株 | 第73页 |
| ·主要试剂 | 第73页 |
| ·主要仪器 | 第73-74页 |
| ·实验方法 | 第74-76页 |
| ·体外纤维细胞(NIH3T3)增殖试验 | 第74页 |
| ·体内组织修复活力研究 | 第74-76页 |
| ·实验结果 | 第76-79页 |
| ·NIH3T3细胞增殖的MTT检测试验结果 | 第76-77页 |
| ·皮肤创伤修复试验结果 | 第77-78页 |
| ·皮肤张力检测结果 | 第78页 |
| ·羟脯氨酸含量检测结果 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| ·小结 | 第80-82页 |
| 第5章 重组梅花鹿茸多肽对小鼠体外免疫调节作用研究 | 第82-93页 |
| ·实验材料 | 第82-83页 |
| ·实验动物 | 第82页 |
| ·主要试剂 | 第82页 |
| ·主要仪器 | 第82-83页 |
| ·实验方法 | 第83-85页 |
| ·刺激小鼠脾细胞与腹腔巨噬细胞的增殖作用检测 | 第83页 |
| ·刺激NK细胞活性测定 | 第83-84页 |
| ·细胞因子检测 | 第84-85页 |
| ·实验结果 | 第85-88页 |
| ·rVAP32对小鼠脾细胞增殖的影响 | 第85页 |
| ·rVAP32对小鼠NK细胞吞噬活性的影响 | 第85-86页 |
| ·rVAP32对各细胞因子的分泌水平的影响 | 第86-88页 |
| ·讨论 | 第88-92页 |
| ·小结 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-102页 |
| 附录 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 作者简介 | 第105页 |
