| ABSTRACT | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| TABLE OF CONTENT | 第8-11页 |
| 1 INTRODUCTION AND LITURATUTE REVIEWS | 第11-33页 |
| ·Phthalate ester | 第11-13页 |
| ·Dibutyl phthalate/Di-n-butyl phthalate (DBP) | 第13-21页 |
| ·Physicochemical Properties | 第13-14页 |
| ·Toxicology and levels monitored in the environmental | 第14-21页 |
| ·Surface Plasmon resonance (SPR) | 第21-22页 |
| ·The polymerase chain reaction (PCR) | 第22-29页 |
| ·Variations on the basic PCR technique | 第24-28页 |
| ·Real-Time PCR | 第28-29页 |
| ·SYBR GreenⅠ | 第29页 |
| ·High-performance liquid chromatography (HPLC) | 第29-31页 |
| ·Detection method | 第31页 |
| ·Statement of research problem | 第31-32页 |
| ·Research objectives | 第32页 |
| ·Main Research | 第32-33页 |
| 2 PREPARATION OF LIGAND-RECEPTOR-DNA COMPLEXES | 第33-48页 |
| ·Chemicals | 第33-35页 |
| ·Instrumentation | 第35页 |
| ·Method | 第35-44页 |
| ·Preparation Chemical | 第35-36页 |
| ·Animals | 第36-37页 |
| ·Preparation for Receptor cells | 第37页 |
| ·Protein determination by Bradford Protein Assay | 第37-38页 |
| ·Primer Design, Synthesis and binding-DNA | 第38-39页 |
| ·Real-time PCR amplification | 第39-40页 |
| ·Agarose gel electrophoresis | 第40-41页 |
| ·Ligand-receptor complex | 第41页 |
| ·Identify of combination of Estrogen receptor and DBP | 第41-44页 |
| ·DNA copies number | 第44页 |
| ·Results | 第44-47页 |
| ·Protein concentration | 第44-45页 |
| ·Recovery of binding DNA | 第45页 |
| ·DNA copies number | 第45-46页 |
| ·Combination of Estrogen receptor and DBP | 第46-47页 |
| ·Conclusion | 第47-48页 |
| 3 REAL TIME FLUORESCENCE QUANTITATIVE PCR | 第48-58页 |
| ·Chemical | 第48-49页 |
| ·Instrumention | 第49页 |
| ·Method | 第49-52页 |
| ·Primer Design | 第49页 |
| ·Analyzed DNA-ligand-receptor complex | 第49页 |
| ·Fluorescence quantitative PCR | 第49-52页 |
| ·Result | 第52-57页 |
| ·Quantitative standard curve | 第52-55页 |
| ·SYBR Fluorescence Quantitative PCR | 第55-57页 |
| ·Conclusion | 第57-58页 |
| 4 APPLY FQ-PCR DETECTION DBP IN SOIL AND WATER SAMPLE | 第58-62页 |
| ·Chemicals | 第58页 |
| ·Instrumentation | 第58-59页 |
| ·Method | 第59-60页 |
| ·Sample Preparation | 第59页 |
| ·Preparation for complexes of ligand-receptors | 第59-60页 |
| ·Result | 第60-61页 |
| ·Soil sample | 第60-61页 |
| ·Water samples | 第61页 |
| ·Conclusion | 第61-62页 |
| 5 HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY | 第62-71页 |
| ·Chemicals | 第62页 |
| ·Instrumentation | 第62页 |
| ·Method | 第62-64页 |
| ·Soil Samples | 第62-63页 |
| ·Water Samples | 第63页 |
| ·High Performance liquid chromatography | 第63-64页 |
| ·Results | 第64-70页 |
| ·Characteristic absorbance of DBP | 第64-67页 |
| ·DBP Standard curves | 第67-68页 |
| ·Soil samples | 第68-69页 |
| ·Water sample concentration | 第69-70页 |
| ·Conclusion | 第70-71页 |
| 6 RESULT AND DISCUSSION | 第71-75页 |
| ·Result and Discussion | 第71-73页 |
| ·Prospect for future work | 第73-74页 |
| ·Conclusion | 第74-75页 |
| REFFERENCES | 第75-82页 |
| APPENDIX 1:Abbreviations | 第82-83页 |
| APPENDIX 2:pUC19 Sequence and map | 第83-84页 |
| PUBLICATATION | 第84-85页 |
| ACKNOWLEDGEMENTS | 第85页 |
