| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 名词缩写 | 第10-11页 |
| 一、文献综述 | 第11-25页 |
| 1 灵芝概述 | 第11-13页 |
| ·灵芝属的分类地位及形态学特征 | 第11页 |
| ·灵芝的生活史 | 第11页 |
| ·中国灵芝的种类和自然分布状况 | 第11-12页 |
| ·灵芝的化学成分 | 第12页 |
| ·灵芝的药理活性 | 第12-13页 |
| 2 中国灵芝生产的现状 | 第13页 |
| 3 灵芝属分类鉴定的现状及存在的问题 | 第13-15页 |
| 4 灵芝属的鉴定 | 第15-21页 |
| ·形态学鉴定 | 第15-17页 |
| ·拮抗反应 | 第17页 |
| ·化学成分分析 | 第17页 |
| ·同工酶技术 | 第17-18页 |
| ·分子标记技术 | 第18-21页 |
| ·rDNA | 第18-19页 |
| ·RAPD | 第19-20页 |
| ·AFLP | 第20-21页 |
| ·SRAP | 第21页 |
| 5 多重PCR | 第21-22页 |
| 6 DNA池(DNA pool)扩增法及其应用状况 | 第22-23页 |
| 7 存在的问题与研究目标 | 第23-25页 |
| ·已有的工作基础 | 第23页 |
| ·存在的问题 | 第23页 |
| ·研究的目标 | 第23-25页 |
| 二、材料与方法 | 第25-39页 |
| 1 试验材料 | 第25-32页 |
| ·供试菌株 | 第25-30页 |
| ·供试培养基 | 第30页 |
| ·PDY液体培养基 | 第30页 |
| ·PDY固体培养基 | 第30页 |
| ·LB液体培养基 | 第30页 |
| ·LB固体培养基 | 第30页 |
| ·LB+AP培养基 | 第30页 |
| ·LB+Ap+IPTG+X-gal平板 | 第30页 |
| ·供试试剂及配制方法 | 第30-32页 |
| ·基因组DNA提取试剂 | 第30-31页 |
| ·电泳缓冲液 | 第31页 |
| ·ITS扩增反应试剂 | 第31页 |
| ·SRAP扩增反应试剂 | 第31页 |
| ·ISSR扩增反应试剂 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增产物的回收纯化 | 第32页 |
| ·PCR产物的分子克隆所用试剂 | 第32页 |
| ·菌株特异性PCR反应试剂 | 第32页 |
| ·主要使用仪器 | 第32页 |
| 2 实验方法 | 第32-39页 |
| ·菌丝培养及基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·DNA池的构建 | 第33页 |
| ·ITS区的PCR扩增 | 第33页 |
| ·SRAP反应 | 第33-34页 |
| ·ISSR反应 | 第34页 |
| ·PCR扩增产物的纯化及序列测定 | 第34-36页 |
| ·PCR扩增产物的纯化 | 第34-35页 |
| ·序列测定和引物设计 | 第35-36页 |
| ·SCAR-PCR反应 | 第36页 |
| ·SCAR分子标记的验证 | 第36-39页 |
| ·特异性验证 | 第36-37页 |
| ·灵敏度测试 | 第37页 |
| ·多重PCR的建立 | 第37-39页 |
| 三、结果与分析 | 第39-49页 |
| 1 DNA模板质量的检验 | 第39-40页 |
| 2 DNA池的构建 | 第40页 |
| 3 菌株特异性分子标记的获得 | 第40-41页 |
| 4 SCAR标记的建立 | 第41-43页 |
| ·SCAR引物的设计 | 第41-42页 |
| ·SCAR扩增结果 | 第42-43页 |
| 5 SCAR分子标记的验证 | 第43-49页 |
| ·特异性验证 | 第43-47页 |
| ·灵敏度测试 | 第47页 |
| ·多重PCR的建立 | 第47-49页 |
| 四、讨论 | 第49-53页 |
| 1 DNA池(DNA pool) | 第49页 |
| 2 SCAR标记 | 第49-51页 |
| 3 形态学鉴定方法与SCAR鉴定方法的比较 | 第51-53页 |
| 五、结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-69页 |
| 附录一 特异性条带的序列 | 第61-64页 |
| 附录二 SRAP引物扩增的结果 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 文章发表情况 | 第71页 |