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疫霉菌激发子parasiticein诱导烟草细胞凋亡及发生机制研究

摘要第1-12页
英文摘要第12-15页
第一部分 文献综述第15-31页
 第一章 植物细胞凋亡的研究进展第15-31页
  1.细胞凋亡概述第15-16页
  2.细胞凋亡的一般概念第16页
  3.细胞凋亡与细胞程序性死亡(PCD ) 的区别第16页
  4.细胞凋亡与坏死的区别第16-17页
  5.植物细胞凋亡特征第17-19页
  6.细胞凋亡的发生第19-23页
  7.植物——病原物互作与细胞凋亡第23-24页
  8 植物细胞凋亡分子机理的研究第24-29页
  9 植物细胞凋亡的研究展望第29-31页
第二部分 研究内容第31-73页
 第一章 烟草悬浮细胞系的建立和培养条件优化第31-45页
  1 引言第31-32页
  2 材料和方法第32-34页
   ·供试材料第32页
   ·实验方法第32页
   ·细胞生物量测定方法的确定第32-33页
   ·愈伤组织的诱导第33页
   ·悬浮细胞系的建立第33-34页
   ·悬浮细胞的继代第34页
   ·悬浮细胞系的愈伤化保存第34页
   ·平板保存的愈伤组织的悬浮化培养第34页
  3 结果与分析第34-42页
   ·幼茎不同部位产生的愈伤组织第34-35页
   ·激素对愈伤组织生长的影响第35-37页
   ·不同培养基对烟草悬浮细胞生长的影响第37-38页
   ·不同转接比例对悬浮细胞生长的影响第38页
   ·不同转速对悬浮细胞生长的影响第38-39页
   ·不同温度对悬浮细胞生长的影响第39-40页
   ·蔗糖浓度对悬浮细胞生长的影响第40-41页
   ·悬浮细胞的愈伤组织化保存第41页
   ·平板保存的愈伤组织的悬浮化培养第41-42页
  4. 结论与讨论第42-45页
   ·茎髓组织与愈伤形成第42-43页
   ·转接浓度、转速、温度、激素与细胞生长第43页
   ·平板保存细胞的优点第43页
   ·转速对细胞长势、结团和贴壁现象影响第43-45页
 第二章 疫霉菌激发子parasiticein诱导烟草悬浮细胞的凋亡的特征第45-57页
  1 引言第45-46页
  2 材料与方法第46-49页
   ·Parasiticein 的制备和烟草悬浮细胞培养第46页
   ·激发子诱导处理悬浮细胞第46-47页
   ·细胞死亡的形态观察第47页
   ·DAPI 染色观察第47页
   ·电镜观察第47-48页
   ·Parasiticein 诱导烟草细胞DNA 断裂检侧第48-49页
  3 结果与分析第49-55页
   ·Parasiticein 诱导的烟草细胞死亡动态第49-50页
   ·Parasiticein 诱导的死亡细胞的形态特征第50-52页
   ·细胞核形态观察第52-53页
   ·死亡细胞的液泡膜和细胞核的裂解第53-54页
   ·死亡细胞的DNA检测第54-55页
  4 讨论与结论第55-57页
 第三章 Parasiticein 诱导烟草细胞凋亡的机制研究第57-73页
  1 引言第57-58页
  2 材料与方法第58-62页
   ·Parasiticein 的制备和烟草悬浮细胞培养第58页
   ·悬浮细胞的诱导处理样品制备第58页
   ·荧光检测活性氧第58-59页
   ·Parasiticein诱导烟草细胞的过氧化氢变化第59页
   ·过氧化氢酶(CAT)活性测定第59页
   ·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第59-60页
   ·样品过氧化物酶(POD)活性测定第60页
   ·抗坏血酸盐对parasiticein诱导的细胞死亡的抑制作用第60页
   ·K252-a 对parasiticein诱导的细胞死亡的影响第60页
   ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定第60-61页
   ·Parasiticein诱导烟草悬浮细胞胞外碱性化检测第61页
   ·可溶性蛋白质的含量测定第61-62页
  3 结果与分析第62-70页
   ·Parasiticein诱导烟草细胞凋亡过程中活性氧的变化第62-63页
   ·H_2O_2的积累变化第63页
   ·Parasiticein 对烟草细胞 CAT 活性的影响第63-64页
   ·Parasiticein 对 SOD 活性的影响第64-65页
   ·Parasiticein 对POD 活性的影响第65页
   ·抗坏血酸盐对parasiticein诱导的细胞凋亡的影响第65-66页
   ·抗坏血酸盐对活性氧代谢相关酶的影响第66-68页
   ·K252-a 对细胞死亡的影响第68页
   ·Parasiticein 对PAL 活性的影响第68-69页
   ·Parasiticein 诱导烟草胞外pH 值变化第69-70页
   ·蛋白质含量的测定第70页
  4 讨论第70-73页
   ·活性氧代谢与parasiticein 诱导的细胞死亡第71页
   ·蛋白激酶与细胞凋亡第71-72页
   ·Parasiticein 对烟草细胞内外离子交换的影响第72-73页
总结与展望第73-75页
 一、全文总结第73-74页
 二、研究展望第74-75页
参考文献第75-85页
致谢第85-86页
攻读学位期间发表论文情况第86页

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