摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-32页 |
·兔出血症病毒及其疫苗的研究进展 | 第10-17页 |
·兔出血症病毒概述 | 第10-14页 |
·兔出血症病毒疫苗的研究进展 | 第14-16页 |
·兔出血症病毒疫苗的应用前景 | 第16-17页 |
·植物基因工程疫苗研究进展 | 第17-27页 |
·植物基因工程疫苗及可食用疫苗概述 | 第17-18页 |
·植物基因工程疫苗的原理及研究进展 | 第18-23页 |
·植物基因工程疫苗的优缺点和应对策略及发展前景 | 第23-27页 |
·根癌农杆菌介导的植物遗传转化 | 第27-30页 |
·根癌农杆菌介导的遗传转化机制 | 第27-29页 |
·根癌农杆菌介导的遗传转化方法 | 第29-30页 |
·串叶松香草研究概况 | 第30-31页 |
·本研究的目的和意义 | 第31-32页 |
第二章 YL 株衣壳蛋白(VP60)基因的克隆和生物信息分析 | 第32-47页 |
·材料 | 第32-33页 |
·病毒材料 | 第32页 |
·质粒与菌株 | 第32页 |
·试剂和仪器 | 第32-33页 |
·培养基与溶液 | 第33页 |
·PCR 引物 | 第33页 |
·方法 | 第33-39页 |
·引物设计 | 第33页 |
·病毒RNA 的提取 | 第33-34页 |
·病毒VP60 基因的反转录(RT)和PCR | 第34-35页 |
·RT-PCR 产物的克隆及测序 | 第35-37页 |
·VP60 基因的生物信息学分析 | 第37-39页 |
·结果与分析 | 第39-45页 |
·YL 株RHDV 基因组RNA 的提取 | 第39页 |
·YL 株VP60 基因的扩增 | 第39页 |
·重组质粒的鉴定 | 第39-40页 |
·YL 株VP60 基因的序列测定和编码蛋白分子特征 | 第40页 |
·RHDV VP60 基因的生物信息分析 | 第40-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第三章 兔出血症病毒YL 株衣壳蛋白VP60 基因在原核系统中的高效表达 | 第47-56页 |
·材料 | 第47-48页 |
·质粒与菌株 | 第47页 |
·主要试剂和仪器 | 第47页 |
·培养基与主要溶液 | 第47-48页 |
·PCR 引物 | 第48页 |
·方法 | 第48-51页 |
·VP60 基因表达质粒的构建与转化 | 第48-49页 |
·VP60 的诱导表达 | 第49页 |
·重组表达VP60 的SDS-PAGE 检测 | 第49-50页 |
·Western blot 检测 | 第50-51页 |
·结果与分析 | 第51-55页 |
·原核表达载体VP60-pET32a 的构建 | 第51-52页 |
·VP60-pET32a 的鉴定 | 第52页 |
·VP60 的表达和SDS-PAGE 检测 | 第52-53页 |
·重组表达VP60 的Western blot 免疫反应 | 第53-55页 |
·讨论 | 第55页 |
·小结 | 第55-56页 |
第四章 串叶松香草高效再生体系的建立与外壳蛋白基因VP60 的遗传转化 | 第56-67页 |
·材料 | 第56-57页 |
·植物材料及质粒与菌株 | 第56页 |
·主要试剂和仪器 | 第56页 |
·培养基与主要溶液 | 第56-57页 |
·PCR 引物 | 第57页 |
·方法 | 第57-60页 |
·再生体系的建立 | 第57-59页 |
·植物表达载体VP60-pBI121 的构建及对农杆菌的转化 | 第59-60页 |
·遗传转化体系的建立 | 第60页 |
·结果与分析 | 第60-64页 |
·串叶松香草高频再生培养基的筛选 | 第60-61页 |
·植物表达载体VP60-pBI121 的构建 | 第61-63页 |
·串叶松香草遗传转化体系的建立 | 第63-64页 |
·讨论 | 第64-66页 |
·小结 | 第66-67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
附录 | 第76-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
作者简介 | 第80页 |