| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一部分 鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子RhoGDI2在人乳腺癌发生发展过程中的表达及功能研究 | 第9-61页 |
| 文献综述 鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子RhoGDI2的研究进展 | 第9-22页 |
| 摘要 | 第9页 |
| 1 引言 | 第9-11页 |
| 2 RhoGDI2的结构及其功能 | 第11-14页 |
| ·N端结构域及其功能 | 第12-13页 |
| ·C端结构域及其功能 | 第13-14页 |
| ·可变形环 | 第14页 |
| 3 RhoGDI2基因敲除细胞和小鼠的表型 | 第14-15页 |
| 4 RhoGDI2与细胞凋亡 | 第15-16页 |
| 5 RhoGDI2与肿瘤 | 第16-18页 |
| 6 RhoGDI2的研究展望 | 第18页 |
| 参考文献 | 第18-22页 |
| 实验部分 | 第22-55页 |
| 第一章 人乳腺癌组织中RhoGDI2的表达模式研究 | 第22-34页 |
| 引言 | 第22-23页 |
| 1 材料和方法 | 第23-27页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·仪器设备 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-34页 |
| ·RhoGDI2的表达与纯化 | 第27-28页 |
| ·Anti-D4-GDI单抗的特异性检测 | 第28-29页 |
| ·RhoGDI2在乳腺组织中的表达模式 | 第29-31页 |
| ·免疫组织化学检测结果与临床病理资料间的相关性分析 | 第31-34页 |
| 第二章 人乳腺癌细胞株中RhoGDI2的表达水平分析 | 第34-45页 |
| 引言 | 第34页 |
| 1 材料和方法 | 第34-42页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·仪器设备 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-45页 |
| ·Anti-RhoGDI2多克隆抗体的制备 | 第42页 |
| ·RhoGDI2在人乳腺癌细胞株中的表达模式 | 第42-43页 |
| ·人乳腺癌细胞株体外浸润及运动能力检测 | 第43-45页 |
| 第三章 RhoGDI2过表达对乳腺癌细胞株MDA-MB-231体内外转移能力的影响 | 第45-55页 |
| 引言 | 第45页 |
| 1 材料和方法 | 第45-49页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·仪器设备 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-55页 |
| ·稳定转染的MDA-MB-231中RhoGDI2的表达状况 | 第49-50页 |
| ·RhoGDI2的过表达显著降低了MDA-MB-231细胞的体外浸润能力 | 第50-51页 |
| ·MDA-MB-231细胞的体外二维运动能力因RhoGDI2的过表达而减弱 | 第51页 |
| ·MDA-MB-231体外生长能力未受RhoGDI2过表达的影响 | 第51-52页 |
| ·RhoGDI2的过表达显著降低了MDA-MB-231细胞的软琼脂集落形成能力 | 第52页 |
| ·RhoGDI2对MDA-MB-231细胞周期的影响 | 第52-53页 |
| ·裸鼠肺转移实验 | 第53-54页 |
| ·7种Rho家族成员的转录水平未随RhoGDI2转录水平的上调而变化 | 第54-55页 |
| 总结与讨论 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 第二部分 EVL(Ena/VASP like protein)在人乳腺癌发生发展过程中的表达及功能研究 | 第61-94页 |
| 文献综述 哺乳动物Ena/VASP家族蛋白研究进展 | 第61-72页 |
| 摘要 | 第61页 |
| 1 引言 | 第61-63页 |
| 2 Ena/VASP家族蛋白的结构域及其功能 | 第63-64页 |
| ·EVH1结构域 | 第63页 |
| ·富含脯氨酸的核心结构域 | 第63页 |
| ·EVH2结构域 | 第63-64页 |
| 3 Ena/VASP蛋白的体内外功能 | 第64-67页 |
| ·对纤维原细胞迁移能力的调节 | 第64-65页 |
| ·在神经元迁移和轴突导向中的功能 | 第65-66页 |
| ·在肿瘤生成和转移过程中的功能 | 第66页 |
| ·在基于宿主肌动蛋白的李斯特菌运动中的功能 | 第66-67页 |
| 4 Ena/VASP蛋白的磷酸化 | 第67页 |
| 5 Ena/VASP蛋白的研究展望 | 第67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 实验部分 | 第72-90页 |
| 第一章 应用癌症基因组解剖计划数据库筛选乳腺正常与癌变组织间差异表达的基因 | 第72-78页 |
| 引言 | 第72页 |
| 1 材料和方法 | 第72-76页 |
| ·材料 | 第72-75页 |
| ·方法 | 第75-76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-78页 |
| ·借助CGAP获取的乳腺癌和相应正常组织的差异表达基因 | 第76页 |
| ·候选基因在乳腺癌细胞株中的表达状况 | 第76-77页 |
| ·候选基因在乳腺癌及相应正常乳腺组织中的表达状况 | 第77-78页 |
| 第二章 EVL在乳腺癌中的表达状况及相应机理的初步研究 | 第78-90页 |
| 引言 | 第78-79页 |
| 1 材料和方法 | 第79-83页 |
| ·材料 | 第79-80页 |
| ·仪器设备 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-83页 |
| ·Real-time RT-PCR | 第80-81页 |
| ·数据处理及统计学分析 | 第81页 |
| ·EVL和H-Ras基因的克隆及相关真核表达载体的构建 | 第81-82页 |
| ·平板集落形成实验 | 第82页 |
| ·MTT法检测细胞生长曲线 | 第82页 |
| ·EVL的亚细胞定位分析 | 第82-83页 |
| ·细胞迁移实验 | 第83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-90页 |
| ·Real-time RT-PCR检测35例乳腺癌成对病例中EVL的表达水平 | 第83-85页 |
| ·EVL在乳腺癌组织中表达量的升高与病例的临床分期相关 | 第85-86页 |
| ·EVL的过表达不能导致NIH3T3细胞的恶性转化 | 第86-88页 |
| ·EVL在MCF-7细胞中的定位 | 第88-89页 |
| ·EVL的瞬间表达促进了MCF-7细胞的体外迁移能力 | 第89-90页 |
| 总结与讨论 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-94页 |
| 研究展望 | 第94-95页 |
| 附表 | 第95-98页 |
| 发表论文 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
