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牦牛褪黑激素合成酶AA-NAT、HIOMT基因cDNA克隆及序列分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
前言第10-11页
第一章 文献综述第11-38页
 1 牦牛的分布与繁殖性能第11-12页
   ·牦牛分布区的生态特点第11页
   ·牦牛的繁殖性能第11-12页
 2 褪黑激素第12-15页
   ·褪黑激素与繁殖的关系第13-14页
   ·MLT的作用部位和作用机制第14-15页
     ·垂体第14页
     ·下丘脑第14页
     ·性腺第14-15页
 3 AA-NAT基因第15-24页
   ·AA-NAT基因产物的结构第15-16页
   ·人的AA-NAT基因的结构,染色体定位第16页
   ·牛的AA-NAT基因的结构,染色体定位第16-17页
     ·绵羊AA-NAT基因第17页
     ·AA-NAT基因的表达第17-18页
   ·AA-NAT基因表达的节律性第18-19页
   ·AA-NAT基因的调控第19-24页
 4 HIOMT基因第24-33页
   ·HIOMT基因的其结构第24-27页
   ·HIOMT基因的表达第27-30页
   ·HIOMT基因的调控第30-33页
 5 可变位点剪接第33-38页
   ·AS基因及其剪接形式的识别第34-35页
   ·AS的功能与调控研究第35-38页
第二章 材料与方法第38-52页
 1 材料第38-41页
   ·样品的采集第38页
   ·实验主要仪器第38-39页
   ·网络资源及应用软件第39页
   ·主要试剂第39页
   ·常用试剂的配制第39-41页
 2 方法第41-52页
   ·总RNA的提取第41-42页
   ·RNA的检测第42页
   ·引物设计第42页
   ·反转录反应cDNA第一条链合成第42-43页
     ·按下列组分配制RT反应液第42-43页
     ·反转录反应条件第43页
   ·PCR扩增第43-44页
     ·反应体系第43-44页
     ·反应条件第44页
   ·组织DNA提取第44-45页
   ·DNA浓度检测第45页
   ·基因组DNA引物设计第45页
   ·反应体系第45页
   ·反应条件第45-46页
   ·PCR扩增产物的胶回收第46页
   ·RT-PCR产物克隆第46-48页
     ·RT-PCR产物与PMD18-T载体连接第46-47页
     ·连接产物的转化第47-48页
   ·扩增子鉴定第48页
   ·质粒提取第48-49页
   ·测序第49页
   ·序列生物信息学分析第49-52页
     ·序列分析及基因进化分析第49-50页
     ·氨基酸组成、分子量、等电点分析第50页
     ·信号肽分析第50页
     ·跨膜区分析第50页
     ·疏水性分析第50页
     ·蛋白质二级结构预测第50-51页
     ·蛋白质三级结构预测第51-52页
第三章 结果与分析第52-92页
 1 AA-NAT基因克隆和序列分析第52-66页
   ·松果体组织中总RNA的提取第52页
   ·AA-NAT基因RT-PCR扩增第52-53页
   ·AA-NAT基因胶回收第53-54页
   ·AA-NAT基因重组菌液PCR的鉴定第54页
   ·AA-NAT基因序列分析第54-66页
     ·AA-NAT基因的序列测定及同源性分析第54-55页
     ·AA-NAT基因的序列与普通牛的分析第55-57页
     ·AA-NAT基因的氨基酸序列与黄牛的氨基酸比对第57-58页
     ·AA-NAT基因调控位点分析第58-59页
     ·AA-NAT基因的分子进化分析第59-61页
     ·AA-NAT基因编码蛋白质的组成、分子量、等电点的分析第61-62页
     ·AA-NAT编码蛋白疏水性分析第62页
     ·AA-NAT编码蛋白信号肽分析第62-63页
     ·AA-NAT编码蛋白跨膜结构分析第63页
     ·AA-NAT编码蛋白糖基化位点预测第63-64页
     ·AA-NAT编码蛋白质二级结构预测第64页
     ·AA-NAT编码蛋白质三级结构预测第64-66页
 2 HIOMT基因克隆第66-68页
   ·松果体组织中总RNA的提取第66页
   ·HIOMT基因RT-PCR扩增第66-67页
   ·HIOM基因胶回收第67-68页
   ·HIOMT基因重组菌液PCR的鉴定第68页
 3 牦牛、藏黄牛基因组HIOMT片段克隆第68-92页
   ·牦牛、藏黄牛基因组DNA的提取第68-69页
   ·牦牛、藏黄牛基因组PCR扩增第69页
   ·牦牛、藏黄牛基因组PCR产物胶回收第69-70页
   ·牦牛、藏黄牛重组菌液PCR鉴定第70页
   ·HIOMT基因序列分析第70-92页
     ·HIOMT基因的序列测定及同源性分析第70-72页
     ·牦牛HIOMT基因与牛、藏黄牛、犏牛的核酸序列分析第72-79页
     ·牦牛基因组HIOMT基因与牛、藏黄牛、犏牛的核苷酸序列分析第79-83页
     ·牦牛HIOMT基因的氨基酸序列与黄牛的氨基酸比对第83-84页
     ·HIOMT基因的分子进化分析第84-85页
     ·牦牛HIOMT基因编码蛋白质的组成、分子量、等电点的分析第85页
     ·牦牛HIOMT基因编码蛋白疏水性分析第85-86页
     ·牦牛HIOMT基因编码蛋白信号肽分析第86-87页
     ·HIOMT基因编码蛋白跨膜结构分析第87-88页
     ·牦牛HIOMT基因编码蛋白糖基化位点预测第88页
     ·HIOMT基因编码蛋白二级结构预测第88页
     ·HIOMT基因编码蛋白三级结构预测第88-92页
第四章 讨论第92-99页
 1 AA-NAT基因的调控第92-93页
 2 HIOMT基因的可变位点剪接第93-95页
 3 HIOMT基因的调控第95-99页
第五章 结论第99-100页
参考文献第100-114页
致谢第114-115页
攻读硕士期间发表的论文第115页

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