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环糊精糖基转移酶和γ-环糊精生物合成的研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-15页
第一章 绪论第15-32页
   ·环糊精的概述第15-22页
     ·环糊精的物理化学性质与结构第15-18页
     ·环糊精的生产第18-19页
       ·CGTase 制备第18页
       ·淀粉的转化和环糊精的分离第18-19页
     ·环糊精的用途第19-21页
     ·环糊精的安全性评价第21-22页
   ·环糊精糖基转移酶的概述第22-25页
     ·环糊精糖基转移酶的性质第23页
     ·国内外研究概况第23-24页
     ·环糊精糖基转移酶的应用第24-25页
       ·制备葡萄糖基-L-抗坏血酸第24-25页
       ·一些黄酮类化合物的改性第25页
       ·甜味剂的改良第25页
       ·α-葡萄糖基橙皮甙的制备第25页
   ·立题依据和意义第25-26页
   ·本课题的研究内容第26-27页
 参考文献第27-32页
第二章 产环糊精酶嗜碱芽孢杆菌株的筛选第32-45页
   ·前言第32页
   ·材料和方法第32-34页
     ·材料第32页
     ·主要实验仪器第32-33页
     ·方法第33-34页
   ·结果与讨论第34-43页
     ·菌种的诱变选育第34-37页
       ·CGTase 高产菌平板快速检出法第34页
       ·紫外线诱变结果第34-35页
       ·γ射线诱变结果第35-36页
       ·突变株7-12 菌株产酶稳定性第36-37页
     ·菌种发酵条件的研究第37-43页
       ·不同碳源对菌株产CGTase 的影响第37页
       ·不同氮源对菌株产CGTase 的影响第37-38页
       ·不同碳酸盐对菌株产CGTase 的影响第38页
       ·发酵工艺条件对产酶的影响第38-41页
         ·培养基初始pH 对菌株产CGTase 的影响第38-39页
         ·培养温度对产酶的影响第39页
         ·接种量对菌株产酶的影响第39-40页
         ·装液量和转速对菌株产酶的影响第40-41页
       ·正交试验优化培养基第41-42页
       ·嗜碱芽孢杆菌Bacillus alkalophilu512-7 发酵参数的测定第42-43页
   ·本章小结第43-44页
 参考文献第44-45页
第三章 环糊精糖基转移酶的分离和纯化第45-54页
   ·前言第45-46页
   ·材料与方法第46-48页
     ·材料第46页
     ·主要仪器设备第46页
     ·实验方法第46-48页
   ·结果与讨论第48-52页
     ·硫酸铵分级沉淀第48-49页
     ·透析脱盐第49页
     ·DEAE-cellulose 52 层析第49-50页
     ·Sepharose CL-6B 层析第50-52页
   ·本章结论第52-53页
 参考文献第53-54页
第四章 环糊精糖基转移酶的性质研究第54-65页
   ·前言第54页
   ·材料与方法第54-56页
     ·材料第54页
     ·主要实验仪器第54-55页
     ·方法第55-56页
   ·结果与讨论第56-62页
     ·聚丙烯酰胺电泳测定分子量第56-57页
     ·氨基酸的组成第57-58页
     ·环糊精糖基转移酶的反应动力学常数(Km 和Vm)的测定第58-60页
     ·环糊精糖基转移酶的最适pH 和pH 稳定性第60-61页
     ·环糊精糖基转移酶的最适温度及温度稳定性第61-62页
     ·金属离子对酶活的影响第62页
   ·本章小结第62-64页
 参考文献第64-65页
第五章 环糊精糖基转移酶的化学修饰第65-76页
   ·前言第65页
   ·材料与方法第65-67页
     ·材料第65页
     ·主要仪器第65-66页
     ·方法第66-67页
   ·结果与讨论第67-74页
     ·精氨酸残基、羟基和蛋氨酸残基对酶活力的影响第68页
     ·色氨酸残基的化学修饰第68-72页
       ·不同pH 值条件下对酶与NBS 反应的影响第69-70页
       ·底物对酶的保护作用第70页
       ·CGTase 被NBS 修饰后的荧光光谱第70-72页
     ·组氨酸残基的化学修饰第72-73页
     ·-COOH 基团(Glu/Asp)的修饰第73-74页
     ·二硫苏糖醇对环糊精糖基转移酶的影响第74页
   ·本章小结第74-75页
 参考文献第75-76页
第六章 影响合成γ-环糊精的因素第76-98页
   ·前言第76页
   ·材料与方法第76-80页
     ·材料第76-77页
     ·主要仪器设备第77页
     ·主要方法第77-80页
   ·结果与讨论第80-95页
     ·以淀粉为底物合成γ-CD 的影响因素第80-89页
       ·反应体系的pH 对产量的影响第80页
       ·反应体系的温度对γ-CD 产量的影响第80-81页
       ·反应体系酶量对γ-CD 产量的影响第81页
       ·淀粉种类对γ-CD 产量的影响第81-82页
       ·甘草酸对γ-CD 产量的影响第82-83页
       ·a-淀粉酶的影响(DE 值的影响)第83-84页
       ·脱支酶对γ-CD 产量的影响第84页
       ·酶反应时间在不同淀粉浓度对CD 的影响第84-86页
       ·响应面实验第86-89页
     ·利用β-CD 合成γ-CD 的反应第89-95页
       ·pH 对γ-CD 产量的影响第89页
       ·温度对γ-CD 产量的影响第89-90页
       ·酶量对γ-CD 产量的影响第90页
       ·酶反应时间对CD 的影响第90-91页
       ·底物浓度对γ-CD 产量的影响第91-92页
       ·甘草酸对γ-CD 产量的影响第92页
       ·葡萄糖和麦芽糖对γ-CD 产量的影响第92-94页
       ·CGTase 对β-CD 的耦合作用第94-95页
   ·本章小结第95-97页
 参考文献第97-98页
第七章 γ-环糊精的鉴定分析第98-113页
   ·前言第98页
   ·仪器设备第98页
   ·主要方法第98-100页
   ·结果与讨论第100-110页
     ·环糊精纸层析分析第100-101页
     ·环糊精HPLC 分析第101-104页
     ·γ-环糊精红外光谱图第104-105页
     ·γ-环糊精的核磁共振(NMR)图第105-107页
     ·γ-环糊精的扫描电镜图第107-108页
     ·热分析第108-110页
   ·本章小结第110-112页
 参考文献第112-113页
第八章 γ-环糊精包合维生素D2的研究第113-121页
   ·前言第113-114页
   ·材料与方法第114-115页
     ·材料第114页
     ·主要仪器设备第114页
     ·主要方法第114-115页
   ·结果与讨论第115-119页
     ·吸收光谱第115-116页
     ·红外光谱分析第116-117页
     ·差热扫描分析第117页
     ·相溶解度的测定第117-118页
     ·γ-CD与β-CD对维生素D的增溶效果比较第118-119页
   ·本章小结第119-120页
 参考文献第120-121页
主要结论第121-124页
论文创新点第124-125页
致谢第125-126页
攻读博士学位期间发表的论文第126-127页
附录:符号及其意义第127页

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