| 摘要 | 第1-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一章 玻璃化冷冻保存研究进展及意义 | 第14-32页 |
| 1 鱼类胚胎冷冻保存成果 | 第16-17页 |
| 2 关于玻璃化冷冻方法的研究 | 第17-21页 |
| 3 玻璃化液的筛选研究 | 第21-25页 |
| 4 玻璃化液添加方式和洗脱方法的研究 | 第25-27页 |
| 5 冷冻损伤机理的研究 | 第27-28页 |
| 6 反玻璃化(Devitrification)现象研究 | 第28-29页 |
| 7 鱼类胚胎玻璃化冷冻保存技术研究的目的和意义 | 第29-32页 |
| ·探索鱼类种质资源长期保存的途径 | 第29页 |
| ·进行低温下鱼类胚胎生物学基础的研究 | 第29-30页 |
| ·鱼类胚胎玻璃化冷冻技术方法的探索 | 第30页 |
| ·为冷冻损伤机理的阐述提供依据 | 第30-31页 |
| ·玻璃化冷冻保存可促进其它生物技术的发展 | 第31-32页 |
| 第二章 抗冻剂毒性研究 | 第32-39页 |
| 1 前言 | 第32页 |
| 2 材料和方法 | 第32-34页 |
| ·渗透性抗冻剂和非渗透性抗冻剂 | 第32-33页 |
| ·渗透性抗冻剂对牙鲆胚胎毒性实验 | 第33页 |
| ·渗透性抗冻对大菱鲆胚胎毒性实验 | 第33页 |
| ·非渗透性抗冻剂毒性实验 | 第33页 |
| ·数据处理 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-36页 |
| ·渗透性抗冻剂对牙鲆胚胎毒性比较结果 | 第34页 |
| ·渗透性抗冻剂对大菱鲆胚胎毒性效果 | 第34-35页 |
| ·非渗透性抗冻剂毒性比较 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-39页 |
| 第三章 玻璃化冷冻和解冻过程中温度与时间关系 | 第39-44页 |
| 1 前言 | 第39页 |
| 2 材料和方法 | 第39-40页 |
| ·实验设备和试剂 | 第39页 |
| ·玻璃化麦管在冷冻解冻过程中温度测定 | 第39-40页 |
| ·玻璃化麦管在不同温度解冻所需时间测定 | 第40页 |
| ·数据处理 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-42页 |
| ·玻璃化麦管在冷冻和解冻过程中温度变化 | 第40-41页 |
| ·玻璃化麦管在不同温度解冻时间变化 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 玻璃化液冰点 | 第44-49页 |
| 1 前言 | 第44页 |
| 2 材料和方法 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 第五章 胚胎平衡步骤的选择 | 第49-54页 |
| 1 前言 | 第49页 |
| 2 材料和方法 | 第49-50页 |
| ·玻璃化液和胚胎 | 第49页 |
| ·牙鲆胚胎不同平衡步骤的选择 | 第49-50页 |
| ·大菱鲆胚胎在玻璃化液中平衡步骤的选择 | 第50页 |
| ·五步法平衡梯度液渗透压和pH值的测定 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-52页 |
| ·不同平衡步骤对牙鲆胚胎成活率的影响 | 第50-51页 |
| ·不同平衡步骤对大菱鲆胚胎成活率的影响 | 第51-52页 |
| ·PM2平衡梯度液渗透压和pH值 | 第52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第六章 洗脱液成分和浓度的筛选 | 第54-58页 |
| 1 前言 | 第54页 |
| 2 材料和方法 | 第54-55页 |
| ·不同种类洗脱液筛选 | 第54页 |
| ·不同浓度洗脱液的筛选 | 第54页 |
| ·洗脱液渗透压和pH值的测定 | 第54页 |
| ·数据处理 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-57页 |
| ·不同种类洗脱液洗脱结果 | 第55页 |
| ·不同浓度洗脱液洗脱结果 | 第55-56页 |
| ·洗脱液及海水的渗透压和pH值 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 第七章 洗脱时间和步骤的选择 | 第58-63页 |
| 1 前言 | 第58页 |
| 2 材料和方法 | 第58-59页 |
| ·花鲈胚胎、玻璃化液及洗脱液的准备 | 第58-59页 |
| ·不同洗脱时间的选择 | 第59页 |
| ·一步法、二步法和海水洗脱法比较 | 第59页 |
| ·一步洗脱和点滴洗脱法比较 | 第59页 |
| ·数据处理 | 第59页 |
| 3 结果 | 第59-62页 |
| ·不同洗脱时间对胚胎成活率的影响 | 第59-60页 |
| ·一步法、二步法和海水洗脱法比较结果 | 第60-61页 |
| ·一步洗脱和点滴洗脱法比较 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-63页 |
| 第八章 花鲈胚胎玻璃化冷冻保存 | 第63-79页 |
| 1 前言 | 第63-64页 |
| 2 实验材料 | 第64页 |
| ·鱼类及胚胎 | 第64页 |
| ·抗冻剂及溶液的配制 | 第64页 |
| 3 方法 | 第64-66页 |
| ·玻璃化溶液及玻璃化液解冻温度的选择 | 第64-65页 |
| ·花鲈胚胎在VSD2中的平衡时间及适宜玻璃化处理的胚胎时期筛选 | 第65页 |
| ·花鲈胚胎玻璃化冷冻保存 | 第65-66页 |
| ·NaCl浓度与花鲈胚胎成活率 | 第66页 |
| ·平衡时间与玻璃化程度 | 第66页 |
| ·数据处理 | 第66页 |
| 4 结果 | 第66-75页 |
| ·玻璃化液及解冻温度的筛选结果 | 第66-67页 |
| ·花鲈各期胚胎在VSD2平衡时间及适宜胚胎的筛选结果 | 第67-69页 |
| ·花鲈胚胎玻璃化冷冻结果 | 第69-74页 |
| ·NaCl浓度与花鲈胚胎成活率关系 | 第74页 |
| ·平衡时间与麦管玻璃化关系 | 第74-75页 |
| 5 讨论 | 第75-79页 |
| ·关于玻璃化液及玻璃化形成 | 第75-76页 |
| ·关于花鲈胚胎在VSD2中平衡时间及最适宜玻璃化胚胎的筛选 | 第76-77页 |
| ·关于花鲈胚胎超低温冷冻 | 第77-78页 |
| ·关于NaCI浓度与花鲈胚胎成活率 | 第78页 |
| ·关于胚胎平衡时间与玻璃化率 | 第78-79页 |
| 第九章 牙鲆胚胎发育时序 | 第79-89页 |
| 1 前言 | 第79页 |
| 2 材料和方法 | 第79页 |
| 3 结果 | 第79-87页 |
| 4 讨论 | 第87-89页 |
| 第十章 牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎玻璃化冷冻保存 | 第89-107页 |
| 1 前言 | 第89-90页 |
| 2 实验材料和方法 | 第90-92页 |
| ·牙鲆胚胎 | 第90页 |
| ·抗冻剂等化学试剂 | 第90页 |
| ·玻璃化液的配制 | 第90页 |
| ·牙鲆胚胎冷冻基础液的选择 | 第90-91页 |
| ·不同时期牙鲆胚胎对玻璃化液的适应性 | 第91页 |
| ·牙鲆胚胎对不同浓度玻璃化液的适应性选择 | 第91页 |
| ·不同平衡温度对胚胎成活率的影响 | 第91页 |
| ·牙鲆胚胎玻璃化冷冻、洗脱、培养。 | 第91-92页 |
| ·数据处理 | 第92页 |
| 3 结果 | 第92-103页 |
| ·基础液的选择结果 | 第92-93页 |
| ·牙鲆不同时期胚胎对玻璃化液的适应性 | 第93-94页 |
| ·牙鲆胚胎对不同浓度玻璃化液的适应性选择结果 | 第94-96页 |
| ·牙鲆不同时期胚胎在不同平衡温度下的成活率 | 第96-97页 |
| ·牙鲆不同时期胚胎玻璃化冷冻保存结果 | 第97-103页 |
| 4 讨论 | 第103-107页 |
| ·关于基础液选择 | 第103-104页 |
| ·牙鲆不同时期胚胎对同一种玻璃化液及同一时期胚胎对不同浓度玻璃化液的适应能力 | 第104-105页 |
| ·在不同平衡温度下进行冻前平衡对胚胎成活率的影响 | 第105页 |
| ·关于牙鲆胚胎冷冻成活 | 第105-107页 |
| 第十一章 大菱鲆胚胎玻璃化冷冻保存 | 第107-122页 |
| 1 前言 | 第107-108页 |
| 2 材料和方法 | 第108-110页 |
| ·鱼类和胚胎 | 第108页 |
| ·抗冻剂及化学药品 | 第108页 |
| ·DMF为主因子的玻璃化液配制 | 第108-109页 |
| ·大菱鲆胚胎对在DMF+X玻璃化液的耐受力测定 | 第109页 |
| ·渗透性抗冻剂+非渗透性抗冻剂玻璃化液筛选 | 第109页 |
| ·大菱鲆不同时期胚胎对玻璃化液PMP1的适应性 | 第109页 |
| ·大菱鲆胚胎冷冻、洗脱、培养 | 第109-110页 |
| ·数据处理 | 第110页 |
| 3 结果 | 第110-119页 |
| ·DMF+X玻璃化液的配制与筛选 | 第110-111页 |
| ·大菱鲆不同时期胚胎对DMF+X玻璃化液的耐受力 | 第111-112页 |
| ·渗透性抗冻剂+非渗透性抗冻剂组成的玻璃化液筛选结果 | 第112-113页 |
| ·大菱鲆不同时期的胚胎对玻璃化液PMP1的耐受性 | 第113-115页 |
| ·大菱鲆胚胎冷冻保存结果 | 第115-119页 |
| 4 讨论 | 第119-122页 |
| 第十二章 总结 | 第122-125页 |
| 参考文献 | 第125-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 附录一: 作者简历 | 第140-141页 |
| 附录二: 主要成果和发表相关论文 | 第141-142页 |
