| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-15页 |
| 文献综述 | 第15-43页 |
| 第一章 防御素的研究进展 | 第15-43页 |
| ·防御素分子家族的发现简况 | 第15页 |
| ·防御素的分类 | 第15页 |
| ·防御素的生物合成 | 第15-16页 |
| ·防御素的分子特征 | 第16-22页 |
| ·α-防御素和β-防御素 | 第16-19页 |
| ·α-防御素 | 第16-17页 |
| ·β-防御素 | 第17页 |
| ·α-防御素与β-防御素差别 | 第17-19页 |
| ·θ-防御素 | 第19页 |
| ·昆虫防御素 | 第19页 |
| ·植物防御素 | 第19-22页 |
| ·防御素的分布 | 第22-27页 |
| ·α-防御素 | 第22-23页 |
| ·β防御素 | 第23-24页 |
| ·θ-防御素 | 第24-26页 |
| ·昆虫防御素 | 第26页 |
| ·植物防御素 | 第26-27页 |
| ·防御素的基因结构及表达调节 | 第27-31页 |
| ·α-防御素 | 第27-28页 |
| ·β-防御素 | 第28-30页 |
| ·θ-防御素 | 第30页 |
| ·昆虫防御素 | 第30-31页 |
| ·植物防御素 | 第31页 |
| ·防御素的生物学活性 | 第31-38页 |
| ·抗细菌作用 | 第31-34页 |
| ·抗菌谱 | 第31页 |
| ·抗菌机制 | 第31-32页 |
| ·影响因素 | 第32-34页 |
| ·抗真菌作用 | 第34-35页 |
| ·抗病毒作用 | 第35页 |
| ·细胞毒作用 | 第35-37页 |
| ·其他生物活性 | 第37-38页 |
| ·防御素的应用前景 | 第38-41页 |
| ·替代抗生素解决细菌耐药性问题 | 第38-39页 |
| ·结合转基因技术赋予细胞自身抗感染能力 | 第39-40页 |
| ·用于调动机体获得性免疫 | 第40-41页 |
| ·指导抗微生物短肽类药物的设计和开发 | 第41页 |
| ·其他方面的应用 | 第41页 |
| ·结束语 | 第41-43页 |
| ·本研究的目的、意义及研究方法 | 第41-42页 |
| ·今后防御素的研究方向 | 第42-43页 |
| 试验研究 | 第43-93页 |
| 第二章 骆驼β-防御素caBD-1 cDNA的克隆及序列分析 | 第43-55页 |
| ·材料与方法 | 第43-48页 |
| ·试验动物及其组织 | 第43页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第43-44页 |
| ·PCR引物的设计及合成 | 第44页 |
| ·骆驼舌黏膜上皮组织总RNA的提取及检测 | 第44-45页 |
| ·骆驼舌黏膜上皮组织总RNA的提取 | 第44-45页 |
| ·骆驼舌黏膜上皮组织总RNA的检测 | 第45页 |
| ·RT-PCR反应 | 第45页 |
| ·caBD-1基因cDNA的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第45-48页 |
| ·RT-PCR产物的纯化 | 第46页 |
| ·载体 | 第46页 |
| ·连接反应 | 第46页 |
| ·连接产物转化JM109大肠杆菌 | 第46-47页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第47页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第47页 |
| ·质粒DNA的酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·RT-PCR 产物cDNA 的序列测定 | 第48页 |
| ·序列分析 | 第48页 |
| ·引用序列号 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-51页 |
| ·总RNA的检测结果 | 第48-49页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第49页 |
| ·caBD-1基因cDNA的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第49-50页 |
| ·RT-PCR产物的测序及序列分析结果 | 第50-51页 |
| ·caBD-1与牛、羊、猪β-防御素氨基酸序列的比较 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| ·关于模板RNA和RNA酶(RNase) | 第51-52页 |
| ·内源性抗微生物肽与β-防御素 | 第52-53页 |
| ·骆驼β-防御素的克隆 | 第53页 |
| ·小结 | 第53-55页 |
| 第三章 骆驼β-防御素caBD-1 全长cDNA的扩增 | 第55-79页 |
| ·材料与方法 | 第55-62页 |
| ·试验动物及其组织 | 第55页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第55-56页 |
| ·引物的设计及合成 | 第56页 |
| ·骆驼舌黏膜上皮组织总RNA的提取及检测 | 第56页 |
| ·5ˊRACE | 第56-59页 |
| ·5ˊRACE原理(图 | 第58页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第58页 |
| ·Ｈybrid RNA的分解 | 第58页 |
| ·1st Strand cDNA的纯化 | 第58页 |
| ·单链cDNA环化 | 第58-59页 |
| ·巢式PCR反应 | 第59页 |
| ·3ˊRACE | 第59-61页 |
| ·3ˊRACE原理(图 | 第59页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第59-61页 |
| ·PCR反应 | 第61页 |
| ·RACE产物的克隆、筛选及鉴定 | 第61页 |
| ·DNA序列测定 | 第61页 |
| ·序列分析 | 第61页 |
| ·引用序列号 | 第61-62页 |
| ·结果 | 第62-75页 |
| ·5ˊRACE | 第62-63页 |
| ·5ˊRACE扩增结果 | 第62-63页 |
| ·5ˊRACE扩增产物的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第63页 |
| ·5ˊRACE产物的序列分析结果 | 第63页 |
| ·3ˊRACE | 第63-65页 |
| ·3ˊRACE扩增结果 | 第63-64页 |
| ·3ˊRACE产物的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第64页 |
| ·3ˊRACE 产物的测序及序列分析结果 | 第64-65页 |
| ·caBD-1 cDNA 的全序列及同源性比较 | 第65-70页 |
| ·caBD-1肽序列分析及同源性比较 | 第70-75页 |
| ·讨论 | 第75-78页 |
| ·关于3ˊRACE和5ˊRACE | 第75-76页 |
| ·关于caBD-1前原肽和成熟肽的特性 | 第76页 |
| ·关于caBD-1与其他动物β防御素的同源性 | 第76-77页 |
| ·关于β防御素与某些毒素的关系 | 第77-78页 |
| 3 4 小结 | 第78-79页 |
| 第四章 骆驼β-防御素caBD-1的组织表达 | 第79-87页 |
| ·材料与方法 | 第79-81页 |
| ·试验动物及其组织 | 第79-80页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第80页 |
| ·PCR引物的设计及合成 | 第80页 |
| ·骆驼组织总RNA的提取及检测 | 第80页 |
| ·RT-PCR反应 | 第80-81页 |
| ·RT-PCR产物的纯化 | 第81页 |
| ·DNA序列测定 | 第81页 |
| ·结果 | 第81-84页 |
| ·总RNA的检测结果 | 第81-83页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第83页 |
| ·RT-PCR产物的测序结果 | 第83-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| ·β-防御素的分布范围 | 第84-85页 |
| ·骆驼β-防御素的分布特点 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第五章 骆驼β-防御素caBD-1的RNA原位杂交 | 第87-93页 |
| ·材料与方法 | 第87-90页 |
| ·试验动物 | 第87页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第87-88页 |
| ·caBD-1核酸探针的合成 | 第88页 |
| ·原位杂交 | 第88-90页 |
| ·取材、固定和切片 | 第88页 |
| ·组织切片的杂交前预处理 | 第88页 |
| ·杂交 | 第88页 |
| ·杂交后检测 | 第88-90页 |
| ·结果 | 第90页 |
| ·讨论 | 第90-92页 |
| ·上皮性β防御素 | 第90-91页 |
| ·原位杂交 | 第91-92页 |
| ·小结 | 第92-93页 |
| 结 论 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-106页 |
| 附 图 | 第106-107页 |
| 致 谢 | 第107-108页 |
| 作者简介 | 第108页 |
