| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-25页 |
| 1．1 人类酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）的结构特性、生物活性及临床应用前景 | 第9-18页 |
| 1．1．1 成纤维细胞生长因子结构及活性 | 第9-10页 |
| 1．1．2 aFGF的基因及其mRNA | 第10-11页 |
| 1．1．3 aFGF的结构 | 第11-12页 |
| 1．1．4 aFGF的结合分子 | 第12-13页 |
| 1．1．5 aFGF受体 | 第13-14页 |
| 1．1．6 aFGF的信号传递及生物学效应 | 第14-16页 |
| 1．1．7 临床应用前景 | 第16-18页 |
| 1．2 无抗生素—除草剂选择标记系统在植物转化中的应用 | 第18-21页 |
| 1．3 植物生物反应器的研究进展 | 第21-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-38页 |
| 2．1 主要材料 | 第25-27页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第25页 |
| 2．1．2 质粒和菌种 | 第25页 |
| 2．1．3 试剂盒、酶类及抗体 | 第25-26页 |
| 2．1．4 PCR引物 | 第26页 |
| 2．1．5 培养基 | 第26-27页 |
| 2．2 实验方法 | 第27-38页 |
| 2．2．1 植物表达载体的构建 | 第27-33页 |
| 2．2．2 农杆菌介导的瞬时表达体系 | 第33-34页 |
| 2．2．3 GFP荧光的检测 | 第34页 |
| 2．2．4 总RNA的分离 | 第34页 |
| 2．2．5 RT-PCR | 第34-35页 |
| 2．2．6 农杆菌介导的番茄转化 | 第35-36页 |
| 2．2．7 再生植株的PCR检测 | 第36页 |
| 2．2．8 植物基因组DNA的分离 | 第36-37页 |
| 2．2．9 Southern Blot | 第37页 |
| 2．2．10 转化植株中aFGF表达的RT-PCR检测 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-47页 |
| 3．1 植物表达载体的构建 | 第38-44页 |
| 3．1．1 引物设计 | 第38页 |
| 3．1．2 TA克隆 | 第38-39页 |
| 3．1．3 DNA测序及分析 | 第39-40页 |
| 3．1．4 以甘露糖为选择标记的植物表达载体pM390mgf与pM390mhaf的构建及重组子的鉴定 | 第40-44页 |
| 3．2 gfp及afgf基因在烟草植物中的瞬时表达 | 第44页 |
| 3．3 农杆菌介导的番茄转化 | 第44-45页 |
| 3．4 转基因植株的PCR检测 | 第45-46页 |
| 3．5 转化植株的PCR-Southern blot结果 | 第46页 |
| 3．6 转基因afgf在植物中表达的RT-PCR检测 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4．1 以PMI基因为选择标记基因的双元表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 4．2 农杆菌介导的瞬时表达系统及其应用 | 第48-49页 |
| 4．3 转afgf基因番茄植株的获得及鉴定 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
