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棉花抗黄萎病相关基因GbSTK和GhGST的遗传转化与表达研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
本文所用英文缩略词及中文对照第7-10页
1 引言第10-15页
2 材料和方法第15-27页
   ·供试材料第15-17页
     ·Real time-PCR 试验材料第15页
     ·遗传转化棉花品种第15页
     ·菌株和载体第15页
     ·培养基和激素第15-17页
   ·试验方法第17-27页
     ·棉花幼苗培育第17页
     ·病菌培养及接菌处理第17页
     ·拟南芥种植第17-18页
     ·拟南芥接菌处理及取样第18页
     ·RNA 提取第18-19页
     ·cDNA 的合成第19页
     ·Real-time 引物的设计第19-20页
     ·Real time-PCR 步骤第20页
     ·质粒的提取第20-21页
     ·超表达载体的农杆菌转化第21页
     ·棉花茎尖再生体系的建立第21-22页
     ·农杆菌介导的棉花茎尖遗传转化第22-24页
     ·农杆菌介导的棉花下胚轴的遗传转化第24-25页
     ·花粉管通道法介导的棉花遗传转化第25-27页
3 结果与分析第27-39页
   ·棉花总RNA 的提取第27页
   ·黄萎病菌胁迫下GbSTK 在棉花不同抗性品种中的表达第27-28页
   ·黄萎病菌胁迫下GhGST 在棉花不同抗性品种中的表达第28页
   ·黄萎病菌胁迫下GbSTK 在转基因拟南芥中的表达第28-29页
   ·农杆菌中的质粒检测第29-30页
   ·陆地棉品种邯208 茎尖再生体系的建立第30-32页
     ·外源激素对茎尖生长的影响第30页
     ·外源激素对茎尖生根的影响第30-31页
     ·不同固化剂对茎尖生长的影响第31页
     ·抗生素筛选浓度对茎尖生长的影响第31-32页
   ·以邯208 茎尖为受体的农杆菌转化体系的建立第32-34页
     ·农杆菌侵染茎尖正交试验结果第32-33页
     ·农杆菌介导的茎尖转化再生苗的分子检测第33-34页
   ·以下胚轴为受体的农杆菌介导的遗传转化第34-37页
     ·无菌苗培养方式对出愈率的影响第34页
     ·无菌苗龄对出愈率的影响第34-35页
     ·不同下胚轴处理方式对出愈率的影响第35-36页
     ·不同农杆菌及其侵染时间、浓度对出愈率的影响第36-37页
     ·抗性愈伤组织中目的基因的检测第37页
   ·花粉管通道法T0 代转基因植株的PCR 检测第37-39页
4 讨论第39-42页
   ·GbSTK 在不同抗病棉花品种中的表达分析第39页
   ·GhGST 在不同抗病棉花品种中的表达分析第39-40页
   ·农杆菌介导的茎尖转化体系的探讨第40页
   ·农杆菌介导的下胚轴遗传转化的探讨第40-42页
5 结论第42-43页
参考文献第43-49页
在读期间发表的学术论文第49页
附件第49-50页
作者简历第50-51页
致谢第51-52页
附录 试验所用载体图第52-53页

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