| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-15页 |
| 1 绪论 | 第15-37页 |
| ·研究背景 | 第15-27页 |
| ·光合细菌概况 | 第15-18页 |
| ·紫色光合细菌的光反应结构 | 第18-20页 |
| ·紫色光合细菌捕获光能的作用机理 | 第20-23页 |
| ·捕光蛋白分子及核酸研究 | 第23-25页 |
| ·捕光蛋白的蛋白晶体结构研究 | 第25-26页 |
| ·LHII 同源基因的表达研究 | 第26-27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27-28页 |
| ·研究目标和整体设计 | 第28-30页 |
| ·研究目标 | 第28页 |
| ·整体研究思路构架 | 第28-30页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第30-36页 |
| ·R. sphaeroides 的puc2B, puc2A-1, puc2A-2 基因克隆 | 第30-31页 |
| ·puc2BA 与puc1BA 基因超表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·puc2BA 与puc1BA 的相互表达关系 | 第32-33页 |
| ·突变puc2B 的表达特性 | 第33-34页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 的基因克隆及表达分析 | 第34-35页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 与R. sphaeroides pufBA 的关系 | 第35-36页 |
| ·本研究的创新性 | 第36-37页 |
| 2 材料和方法 | 第37-68页 |
| ·R. sphaeroides puc1BA 同源基因的克隆 | 第37-45页 |
| ·试验菌株与质粒 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-38页 |
| ·R. sphaeroides DD13 总DNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·R. sphaeroides puc1B 同源基因 puc2B 的 PCR 扩增、克隆及测序 | 第39-42页 |
| ·R. sphaeroides puc1A 同源片段puc2A-1 的PCR 扩增、克隆及测序 | 第42-43页 |
| ·R. sphaeroides puc1A 同源基因puc2A-2 的PCR 扩增、克隆及测序 | 第43-44页 |
| ·随机易错PCR 扩增、克隆puc2B 及测序 | 第44-45页 |
| ·同源 puc 基因超表达载体的构建 | 第45-49页 |
| ·试验菌株与质粒 | 第45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·pRK 系列超表达载体筛选引物设计 | 第46页 |
| ·pRK2B1AC 超表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·pRK1B2B1AC 超表达载体的构建 | 第47页 |
| ·pRK1B2A-1C 超表达载体的构建 | 第47-48页 |
| ·pRK1B2A-2C 超表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·pRK2B2A-1C 超表达载体的构建 | 第49页 |
| ·pRK2B2A-2C 超表达载体的构建 | 第49页 |
| ·pRK2Bt1AC 超表达载体的构建 | 第49页 |
| ·接合转移将超表达载体导入 R. sphaeroides DD13 | 第49-51页 |
| ·试验菌株和质粒 | 第49-50页 |
| ·主要仪器设备 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·S17-1 感受态细胞的制备和转化 | 第50-51页 |
| ·接合转移 | 第51页 |
| ·稳定转化子的筛选 | 第51页 |
| ·R. sphaeroides DD13 转化结合子的表达分析 | 第51-61页 |
| ·试验菌株 | 第51页 |
| ·主要仪器设备 | 第51-52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·R. sphaeroides DD13 转化结合子的培养 | 第52页 |
| ·R. sphaeroides DD13 转化结合子的诱导表达 | 第52-53页 |
| ·R. sphaeroides DD13 转化结合子的光谱分析 | 第53页 |
| ·R. sphaeroides DD13 转化结合子膜蛋白的提取及含量测定 | 第53-54页 |
| ·R. sphaeroides DD13 转化结合子膜蛋白的光谱分析 | 第54页 |
| ·三种转化结合子的吸收光谱比较及LHII 含量测定 | 第54-55页 |
| ·半定量RT-PCR 引物设计及RNA 提取 | 第55页 |
| ·半定量RT-PCR 分析 | 第55-57页 |
| ·三种转化结合子的细菌叶绿素含量测定 | 第57页 |
| ·DD13-pRK1B2A-1C 和DD13-pRK1B2A-2C 的LHII 的提取纯化 | 第57-61页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 基因在 R. sphaeroides 中的表达特性 | 第61-67页 |
| ·试验菌株和质粒 | 第61页 |
| ·主要仪器设备 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61-62页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 基因的PCR 扩增、克隆及测序 | 第62-63页 |
| ·R. sphaeroides pufBA 基因的PCR 扩增、克隆及测序 | 第63-64页 |
| ·pucsBA 基因超表达载体的构建 | 第64-66页 |
| ·接合转移将超表达载体导入 R. sphaeroides DD13 | 第66页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 基因的表达分析 | 第66页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 与R. sphaeroides pufBA 的关系 | 第66页 |
| ·DD13-pRKsBA 与DD13-pRKpucP*1B1AC 的细菌叶绿素含量比较 | 第66-67页 |
| ·R. sphaeroides puc2BA 及 Rdv. sulfidophilum pucsBA 的结构预测 | 第67-68页 |
| ·R. sphaeroides puc1BA 和puc2BA 的结构预测 | 第67页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 的结构预测 | 第67页 |
| ·R. sphaeroides puc2A 和 Rdv. sulfidophilum pucsA 的跨膜结构预测 | 第67-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-104页 |
| ·R. sphaeroides puc1BA 同源基因的克隆和分析 | 第68-75页 |
| ·R. sphaeroides puc2B 基因的克隆及序列分析 | 第68-69页 |
| ·R. sphaeroides puc2A-1 基因的克隆及序列分析 | 第69-72页 |
| ·R. sphaeroides puc2A-2 基因的克隆及序列分析 | 第72-73页 |
| ·R. sphaeroides 突变puc2B 基因的克隆及序列分析 | 第73-75页 |
| ·R. sphaeroides puc 基因超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第75-79页 |
| ·pRK2B1AC 超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第75页 |
| ·pRK1B2B1AC 超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第75-76页 |
| ·pRK1B2A-1C 超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第76页 |
| ·pRK1B2A-2C 超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第76页 |
| ·pRK2B2A-1C 超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第76-77页 |
| ·pRK2B2A-2C 超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第77-78页 |
| ·pRK2Bt1AC 超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第78-79页 |
| ·DD13 超表达稳定转化结合子的筛选和鉴定 | 第79页 |
| ·超表达载体转化S17-1 的阳性克隆筛选 | 第79页 |
| ·超表达稳定转化结合子的筛选 | 第79页 |
| ·转化结合子的表达特性分析 | 第79-90页 |
| ·转化结合子的培养及诱导表达 | 第79-80页 |
| ·R. sphaeroides DD13 转化结合子的光谱特性 | 第80-81页 |
| ·R. sphaeroides DD13 转化结合子LHII 的光谱特性 | 第81-87页 |
| ·puc2BA 与puc1BA 的表达特性比较 | 第87-88页 |
| ·三种转化结合子细菌叶绿素含量比较 | 第88页 |
| ·半定量RT-PCR 分析puc2BA 与puc1BA 的表达特性 | 第88-89页 |
| ·DD13-pRK1B2A-1C 和DD13-pRK1B2A-2C 的LHII 纯化及SDS-PAGE电泳 | 第89-90页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 基因在 R. sphaeroides 中的表达和分析 | 第90-98页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 基因的扩增、测序及序列分析 | 第90-92页 |
| ·R. sphaeroides pufBA 基因的PCR 扩增、测序及序列分析 | 第92-94页 |
| ·pRKsBAC 超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第94页 |
| ·pRKpufBAsBAC 超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第94-95页 |
| ·pRKpufBA1B1AC 超表达载体的构建、筛选和鉴定 | 第95-96页 |
| ·转化结合子的筛选及鉴定 | 第96页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 基因的表达 | 第96页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 与R. sphaeroides pufBA 的表达关系 | 第96-98页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 与R. sphaeroides puc1BA 的表达特性比较 | 第98页 |
| ·R. sphaeroides puc2BA 及 Rdv. sulfidophilum pucsBA 的结构预测分析 | 第98-104页 |
| ·R. sphaeroides puc2BA 的结构预测分析 | 第98-102页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 的结构预测分析 | 第102页 |
| ·R. sphaeroides puc2A 和 Rdv. sulfidophilum pucsA 的跨膜结构预测分析 | 第102-104页 |
| 4 讨论 | 第104-116页 |
| ·R. sphaeroides 同源基因 puc2BA 的功能分析 | 第104-106页 |
| ·R. sphaeroides 中 puc1BA 与同源基因 puc2BA 的表达关系 | 第106-108页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 基因在 R. sphaeroides 中的功能 | 第108-112页 |
| ·Rdv. sulfidophilum pucsBA 基因与 R. sphaeroides pufBA 基因的表达关系 | 第112-113页 |
| ·异源膜蛋白在 R. sphaeroides 中的表达 | 第113-116页 |
| 5 结论 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-135页 |
| 附录 | 第135-141页 |
