摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-18页 |
1 绪论 | 第18-25页 |
·研究背景 | 第18-20页 |
·植物的次生代谢物质贮藏器官(组织)的研究 | 第18-19页 |
·棉族植物的腺体的研究及意义 | 第19-20页 |
·研究现状及应用价值 | 第20-21页 |
·本研究的目的和研究内容 | 第21-25页 |
·研究目的 | 第21页 |
·主要研究内容 | 第21-25页 |
2 棉花腺体形成过程及相关生理指标研究 | 第25-37页 |
·材料与方法 | 第25-28页 |
·实验材料 | 第25页 |
·色素腺体的观测 | 第25页 |
·棉花中棉酚含量的测定 | 第25-26页 |
·棉花种子萌发过程中可溶性糖检测 | 第26页 |
·可溶性蛋白质含量的测定[71] | 第26页 |
·过氧化物酶(POD)酶液的制备及活性测定[72] | 第26-27页 |
·过氧化氢(CAT)酶液的制备及活性测定[73] | 第27-28页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)酶液制备及活性测定 | 第28页 |
·结果 | 第28-35页 |
·色素腺体的观察 | 第28-30页 |
·色素腺体的数目与大小检测 | 第30页 |
·棉酚含量分析 | 第30-32页 |
·可溶性糖含量的动态变化 | 第32页 |
·可溶性蛋白含量的动态变化 | 第32-33页 |
·POD 活性的动态变化 | 第33页 |
·CAT 活性的动态变化 | 第33-34页 |
·SOD 活性的动态变化 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
3 基因芯片筛选棉花腺体形成时期表达变化的基因 | 第37-68页 |
·材料与方法 | 第37-46页 |
·材料 | 第37-38页 |
·方法 | 第38-46页 |
·结果 | 第46-62页 |
·RNA 电泳结果 | 第46页 |
·芯片质量及杂交结果可靠性分析 | 第46-47页 |
·Affymetrix 基因芯片的杂交和数据处理 | 第47-62页 |
·讨论 | 第62-68页 |
·本实验选用材料的独特性 | 第63页 |
·基因芯片筛选腺体相关基因的优势 | 第63-64页 |
·棉花腺体发育过程的相关代谢网络途径基因变化的分析 | 第64-68页 |
4 棉花突变体(湘棉-18)均一化全长CDNA 文库的构建 | 第68-88页 |
·材料与方法 | 第69-80页 |
·材料 | 第69-71页 |
·方法 | 第71-80页 |
·结果 | 第80-84页 |
·观察与取材 | 第80-81页 |
·mRNA 的提取及质量检测 | 第81页 |
·全长cDNA 的合成 | 第81-83页 |
·均一化效果检测 | 第83页 |
·全长cDNA 均一化 | 第83-84页 |
·cDNA 文库质量评价 | 第84页 |
·讨论 | 第84-88页 |
5 腺体形成相关的候选基因GAP1 的克隆 | 第88-109页 |
·材料与方法 | 第88-93页 |
·材料 | 第88页 |
·方法 | 第88-93页 |
·结果 | 第93-105页 |
·文库筛选 | 第93页 |
·GAP1 的生物信息学分析 | 第93-104页 |
·GAP1 的RT-PCR 结果 | 第104页 |
·GAP1 基因的mRNA 表达结果 | 第104-105页 |
·讨论 | 第105-109页 |
·PCR 筛选均一化全长cDNA 文库的优点 | 第105-106页 |
·生物信息学功能分析特点 | 第106页 |
·GAP1 基因可能的功能和作用机制 | 第106-109页 |
6 腺体形成相关的候选基因 GhZIF 的克隆 | 第109-125页 |
·材料与方法 | 第109-110页 |
·材料 | 第109页 |
·方法 | 第109-110页 |
·结果 | 第110-123页 |
·文库筛选 | 第110页 |
·GhZIF 基因的生物信息学分析 | 第110-122页 |
·RT-PCR 结果 | 第122页 |
·GhZIF 基因的mRNA 表达结果 | 第122-123页 |
·讨论 | 第123-125页 |
7 结论与展望 | 第125-129页 |
·结论 | 第125-126页 |
·观察棉花腺体形成时期的腺体特点及进行相关生理指标的检测 | 第125页 |
·利用高通量的方法分析了棉花腺体形成过程中的基因表达变化 | 第125-126页 |
·构建了湘棉18 腺体形成时期的均一化全长cDNA 文库 | 第126页 |
·克隆和分析两个腺体形成相关的基因GAP1 和GhZIF 基因 | 第126页 |
·本文的创新之处 | 第126-127页 |
·展望 | 第127-129页 |
致谢 | 第129-130页 |
参考文献 | 第130-140页 |
附录 | 第140-142页 |