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脱卵丘操作对家兔卵母细胞损伤的研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-22页
   ·哺乳动物卵母细胞的发育及成熟第11-12页
   ·卵丘细胞在卵母细胞成熟过程中的作用第12-13页
   ·有关缝隙连接第13-15页
     ·缝隙连接的结构第13-14页
     ·缝隙连接在卵泡发育中的作用第14-15页
   ·研究卵丘细胞对卵母细胞作用的方法第15-18页
     ·通过脱去卵丘研究卵丘细胞对卵母细胞的作用第16页
     ·通过缝隙连接阻断剂阻断卵丘对卵母细胞的作用第16-18页
   ·检测质膜完整性的方法第18-20页
     ·FAD 荧光染色第18-19页
     ·使用hoechst33258 检测质膜的完整性第19-20页
     ·台盼蓝染色第20页
   ·实验目的和主要研究内容第20-22页
2 材料与方法第22-29页
   ·主要试剂的配制第22-23页
   ·实验动物及超排处理第23页
   ·卵母细胞的获取及体外成熟第23-24页
   ·体细胞和卵母细胞共培养第24-25页
     ·卵丘细胞单层的制备第24页
     ·卵丘细胞单层和卵母细胞(DO)共培养第24-25页
   ·分散的颗粒细胞和卵母细胞(DO)共培养第25页
   ·COC 和卵母细胞(DO)共培养第25页
   ·DOC 的制备和与卵丘细胞单层共培养第25页
   ·缝隙连接通透性的检测第25-26页
     ·显微操作针的制备第25-26页
     ·缝隙连接的阻断及LY 的注射第26页
   ·卵母细胞的孤雌激活及胚胎培养第26-27页
   ·质膜完整性的检测第27页
   ·Bcl-2 抗体染色第27-28页
   ·实验设计第28页
   ·数据统计分析第28-29页
3 结果与分析第29-39页
   ·卵丘细胞对兔卵母细胞体外成熟和退化的影响第29-30页
   ·荧光黄检测不同浓度庚醇对兔COC 中缝隙连接通透性的影响第30-31页
   ·庚醇作用对兔卵母细胞体外成熟的影响第31-32页
   ·庚醇作用对兔卵母细胞发育的影响第32页
   ·卵丘细胞对小鼠卵母细胞成熟的影响第32-33页
   ·卵丘细胞对小鼠卵母细胞发育的影响及其发挥作用的 方式第33-34页
   ·荧光黄检测不同浓度庚醇对小鼠COC 中缝隙连接通透性的影响第34-35页
   ·庚醇作用对小鼠COC 和DO 成熟与发育的影响第35-36页
   ·小鼠DO 和兔DO 的Hoechst 33258 染色和培养后的退化情况第36-37页
   ·用Bcl-2 检测兔卵母细胞的凋亡情况第37-38页
   ·用Bcl-2 检测小鼠卵母细胞的凋亡情况第38-39页
4 讨论第39-47页
   ·卵丘细胞对卵母细胞的作用第39-43页
     ·卵丘细胞和卵母细胞之间缝隙连接的作用第39-42页
     ·两种方法研究卵丘细胞对卵母细胞的作用第42-43页
   ·脱卵丘操作对卵母细胞的影响第43-47页
     ·脱卵丘操作对卵母细胞质膜的影响第43-44页
     ·脱卵丘操作对卵母细胞凋亡的影响第44-47页
5 结论第47-48页
参考文献第48-62页
图版及图版说明第62-65页
致谢第65页

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