| 英文缩写符号及其中英文对照表 | 第1-13页 |
| 摘要 | 第13-16页 |
| Abstract | 第16-19页 |
| 第一章 引言 | 第19-34页 |
| 1 植物抗病基因工程的研究 | 第19-26页 |
| ·基因对基因假说 | 第19-20页 |
| ·过敏反应 | 第20-21页 |
| ·系统获得性抗性 | 第21-26页 |
| ·概述 | 第21-22页 |
| ·信号传导途径 | 第22-25页 |
| ·PR 蛋白 | 第25-26页 |
| ·诱导系统抗性 | 第26页 |
| 2 NPR1 基因的研究进展 | 第26-32页 |
| ·NPR1 基因的发现 | 第26-28页 |
| ·NPR1 在植物抗病性中的重要作用 | 第28-30页 |
| ·NPR1 基因在SAR 中的作用 | 第28-29页 |
| ·NPR1 基因在ISA 中的作用 | 第29-30页 |
| ·NPR1 基因在R 基因决定的抗性中的作用 | 第30页 |
| ·NPR1 的抗病机制 | 第30-32页 |
| ·NPR1 的存在形式 | 第30-31页 |
| ·NPR1 亚细胞定位研究 | 第31-32页 |
| ·NPR1 与TGA 转录因子互作功能的研究 | 第32页 |
| 3 本课题的研究意义及目的 | 第32-34页 |
| 第二章 棉花GhNPR1 的克隆与表达分析 | 第34-60页 |
| 1 材料与方法 | 第34-47页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第34页 |
| ·菌株与质粒 | 第34页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第34-35页 |
| ·PCR 引物 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-47页 |
| ·植物总RNA 的提取 | 第35-36页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第36页 |
| ·cDNA 的回收纯化 | 第36-37页 |
| ·cDNA 的5′加尾反应 | 第37页 |
| ·简并引物PCR 获得GhNPR1 中间片段 | 第37-38页 |
| ·5′RACE 获得5′端序列 | 第38页 |
| ·3′RACE 获得 3′端序列 | 第38-39页 |
| ·cDNA 全长序列的获得 | 第39页 |
| ·GhNPR1 全长基因组序列的获得 | 第39-40页 |
| ·电泳目的片段的回收 | 第40页 |
| ·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第41页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第41-44页 |
| ·对重组质粒的酶切鉴定 | 第44页 |
| ·Northern 杂交 | 第44-46页 |
| ·Southern 杂交 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-58页 |
| ·GhNPR1 基因的克隆 | 第47-51页 |
| ·棉花RNA 的提取与反转录 | 第47-48页 |
| ·GhNPR1 中间片段的克隆 | 第48-49页 |
| ·GhNPR1 5′片段的克隆 | 第49页 |
| ·GhNPR1 3′片段的克隆 | 第49-50页 |
| ·GhNPR1 全长cDNA 的克隆 | 第50-51页 |
| ·GhNPR1 的序列分析 | 第51-55页 |
| ·GhNPR1 全长 cDNA 分析 | 第51-52页 |
| ·GhNPR1 编码蛋白序列分析 | 第52-55页 |
| ·GhNPR1 基因组序列分析 | 第55页 |
| ·GhNPR1 在棉花基因组中的拷贝数分析 | 第55-56页 |
| ·GhNPR1 的表达特性分析 | 第56-58页 |
| ·GhNPR1 组织特异性和时间特异性表达 | 第56-57页 |
| ·信号分子对GhNPR1 mRNA 水平的影响 | 第57页 |
| ·生物胁迫下 GhNPR1 mRNA 水平的积累 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 第三章 心叶烟NgNPR1 的克隆与表达分析 | 第60-78页 |
| 1 材料与方法 | 第60-64页 |
| ·实验材料 | 第60-61页 |
| ·植物材料 | 第60页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第60页 |
| ·菌株与质粒 | 第60页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第60页 |
| ·PCR 引物 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-64页 |
| ·-1.2.15 同第二章 1.2.1-1.2.15 | 第61页 |
| ·NgNPR1-GFP 表达载体的构建 | 第61-62页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第62页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第62页 |
| ·融合蛋白在植物细胞内的瞬时表达 | 第62-64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-75页 |
| ·NgNPR1 基因的克隆 | 第64-67页 |
| ·心叶烟RNA 的提取与反转录 | 第64页 |
| ·NgNPR1 中间片段的克隆 | 第64-65页 |
| ·NgNPR1 5′片段的克隆 | 第65页 |
| ·NgNPR1 3′片段的克隆 | 第65-66页 |
| ·NgNPR1 全长cDNA 的克隆 | 第66-67页 |
| ·NgNPR1 的序列分析 | 第67-71页 |
| ·NgNPR1 全长cDNA 分析 | 第67-68页 |
| ·NgNPR1 编码蛋白序列分析 | 第68-71页 |
| ·NgNPR1 基因组序列分析 | 第71页 |
| ·NgNPR1 亚细胞定位分析 | 第71-73页 |
| ·NgNPR1 的表达特性分析 | 第73-75页 |
| ·信号分子对NgNPR1 mRNA 水平的影响 | 第73-74页 |
| ·生物胁迫下NgNPR1 mRNA 水平的变化 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-78页 |
| 第四章 心叶烟NgNPR3 的克隆、表达与功能分析 | 第78-105页 |
| 1 材料与方法 | 第78-86页 |
| ·实验材料 | 第78-79页 |
| ·植物材料 | 第78页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第78页 |
| ·菌株与质粒 | 第78页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第78页 |
| ·PCR 引物 | 第78-79页 |
| ·实验方法 | 第79-86页 |
| ·-1.2.17 同第二章 1.2.1-1.2.17 | 第79-80页 |
| ·NgNPR3-GFP 表达载体的构建 | 第80页 |
| ·-1.2.21 同第三章 1.2.17-1.2.19 | 第80页 |
| ·植物正义表达载体的构建 | 第80-81页 |
| ·农杆菌介导转化烟草 | 第81-82页 |
| ·原核表达及抗体制备 | 第82-84页 |
| ·Western 杂交 | 第84-86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-102页 |
| ·NgNPR3 基因的克隆 | 第86-88页 |
| ·心叶烟RNA 的提取与反转录 | 第86页 |
| ·NgNPR3 中间片段的克隆 | 第86-87页 |
| ·NgNPR3 5′片段的克隆 | 第87页 |
| ·NgNPR3 3′片段的克隆 | 第87-88页 |
| ·NgNPR3 全长cDNA 的克隆 | 第88页 |
| ·NgNPR3 的序列分析 | 第88-93页 |
| ·NgNPR3 全长cDNA 分析 | 第88-90页 |
| ·NgNPR3 编码蛋白序列分析 | 第90-93页 |
| ·NgNPR3 基因组序列分 | 第93页 |
| ·NgNPR3 在棉花基因组中的拷贝数分析 | 第93-94页 |
| ·NgNPR3 瞬时核定位的研究 | 第94-95页 |
| ·NgNPR3 的表达特性分析 | 第95-97页 |
| ·信号分子对NgNPR3 mRNA 水平的影响 | 第95-96页 |
| ·生物胁迫下NgNPR3 mRNA 水平的变化 | 第96-97页 |
| ·NgNPR3 基因的原核诱导表达及抗体制备 | 第97-98页 |
| ·NgNPR3 在烟草中的超表达及其转基因烟草的抗性鉴定 | 第98-102页 |
| ·转基因烟草表达载体的构建 | 第98页 |
| ·T_0代转基因植株的 PCR 鉴定 | 第98-99页 |
| ·T_0代转基因植株的 Northern 杂交 | 第99页 |
| ·T_0代转基因植株的 Westhern 杂交 | 第99-100页 |
| ·T_1代转基因植株的 PCR 鉴定 | 第100页 |
| ·T_1代转基因植株抗真菌分析 | 第100-101页 |
| ·抗病植株中PR 蛋白的变化 | 第101-102页 |
| 3 讨论 | 第102-105页 |
| 小结 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-117页 |
| 附录 | 第117-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第120页 |
