摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-26页 |
·鸡新城疫病毒的基本特征 | 第11-12页 |
·新城疫病毒的形态 | 第11页 |
·新城疫病毒的分类 | 第11-12页 |
·新城疫的理化性质 | 第12页 |
·新城疫病毒的复制 | 第12页 |
·新城疫病毒的基因及其相应的蛋白质 | 第12-19页 |
·新城疫病毒的基因组结构特征 | 第12-13页 |
·HN 基因及HN 蛋白 | 第13-15页 |
·H N 基因及其开放阅读框 | 第13页 |
·H N 蛋白的分子结构及特征 | 第13-15页 |
·F 基因及F 蛋白的分子结构特征 | 第15-17页 |
·P 基因及P 蛋白 | 第17页 |
·M 基因及M 蛋白 | 第17-18页 |
·NP 和L 基因及其蛋白 | 第18-19页 |
·NDV 致病性的分子生物学基础 | 第19-20页 |
·NDV 的分子生物学检测方法 | 第20-23页 |
·单克隆抗体技术 | 第20-21页 |
·RNA 指纹图谱技术 | 第21页 |
·核酸探针技术 | 第21-22页 |
·反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)技术 | 第22页 |
·抗多肽抗体法 | 第22-23页 |
·ND 疫苗研究现状 | 第23-26页 |
·活疫苗 | 第23页 |
·灭活疫苗 | 第23页 |
·基因工程疫苗 | 第23-24页 |
·核酸疫苗 | 第24-26页 |
第二章 新城疫病毒F48E9 几种纯化方法的比较研究 | 第26-30页 |
·实验材料 | 第26页 |
·病毒株 | 第26页 |
·实验动物 | 第26页 |
·生物试剂及有关药品 | 第26页 |
·主要仪器和设备 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-27页 |
·新城疫病毒在鸡胚中的增殖 | 第26-27页 |
·新城疫病毒纯化前的预处理 | 第27页 |
·新城疫病毒的浓缩沉淀 | 第27页 |
·硫酸铵沉淀法 | 第27页 |
·乙醇沉淀法 | 第27页 |
·聚乙二醇沉淀法 | 第27页 |
·实验结果 | 第27-28页 |
·初始血凝效价测定结果 | 第27页 |
·硫酸铵沉淀结果 | 第27-28页 |
·乙醇沉淀结果 | 第28页 |
·聚乙二醇沉淀结果 | 第28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
·小结 | 第29-30页 |
第三章 新城疫病毒F48E9 两个HN 基因片段的克隆 | 第30-38页 |
·实验材料 | 第30-31页 |
·毒株与菌株 | 第30页 |
·实验动物 | 第30页 |
·主要要酶类和生物试剂 | 第30页 |
·主要仪器和设备 | 第30页 |
·主要试剂配制 | 第30-31页 |
·引物设计 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-34页 |
·NDV F48E9 的增殖 | 第31页 |
·NDV F48E9 总RNA 的提取 | 第31-32页 |
·RT-PCR 反应 | 第32页 |
·PCR 产物的回收与纯化 | 第32页 |
·回收产物与 pGEM-T 载体的连接与转化 | 第32-34页 |
·连接 | 第32页 |
·转化 | 第32-33页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第33-34页 |
·实验结果 | 第34-36页 |
·RT-PCR 结果 | 第34页 |
·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第34-35页 |
·重组质粒测序结果 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
·小结 | 第37-38页 |
第四章 新城疫病毒F48E9 两个HN 基因片段的原核表达 | 第38-47页 |
·实验材料 | 第38-39页 |
·毒株与菌株 | 第38页 |
·主要要酶类和生物试剂 | 第38页 |
·主要仪器和设备 | 第38页 |
·主要试剂配制 | 第38-39页 |
·技术路线示意图 | 第39-40页 |
·实验方法 | 第40-42页 |
·表达载体 pET-28a(+)质粒的制备 | 第40页 |
·重组表达质粒 pET-HN1,pET-HN2 的构建 | 第40页 |
·重组表达质粒 pET-HN1,pET-HN2 的鉴定 | 第40-41页 |
·诱导目的蛋白的表达 | 第41页 |
·目的蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第41-42页 |
·目的蛋白的纯化 | 第42页 |
·实验结果 | 第42-45页 |
·重组表达质粒 pET-HN1 和 pET-HN2 PCR 及酶切鉴定 | 第42-43页 |
·重组蛋白的表达 | 第43-44页 |
·目的蛋白的纯化 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
·结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55页 |