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鸡新城疫病毒F48E9的纯化及其HN基因片段的原核表达

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 文献综述第11-26页
   ·鸡新城疫病毒的基本特征第11-12页
     ·新城疫病毒的形态第11页
     ·新城疫病毒的分类第11-12页
     ·新城疫的理化性质第12页
     ·新城疫病毒的复制第12页
   ·新城疫病毒的基因及其相应的蛋白质第12-19页
     ·新城疫病毒的基因组结构特征第12-13页
     ·HN 基因及HN 蛋白第13-15页
       ·H N 基因及其开放阅读框第13页
       ·H N 蛋白的分子结构及特征第13-15页
     ·F 基因及F 蛋白的分子结构特征第15-17页
     ·P 基因及P 蛋白第17页
     ·M 基因及M 蛋白第17-18页
     ·NP 和L 基因及其蛋白第18-19页
   ·NDV 致病性的分子生物学基础第19-20页
   ·NDV 的分子生物学检测方法第20-23页
     ·单克隆抗体技术第20-21页
     ·RNA 指纹图谱技术第21页
     ·核酸探针技术第21-22页
     ·反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)技术第22页
     ·抗多肽抗体法第22-23页
   ·ND 疫苗研究现状第23-26页
     ·活疫苗第23页
     ·灭活疫苗第23页
     ·基因工程疫苗第23-24页
     ·核酸疫苗第24-26页
第二章 新城疫病毒F48E9 几种纯化方法的比较研究第26-30页
   ·实验材料第26页
     ·病毒株第26页
     ·实验动物第26页
     ·生物试剂及有关药品第26页
     ·主要仪器和设备第26页
   ·实验方法第26-27页
     ·新城疫病毒在鸡胚中的增殖第26-27页
     ·新城疫病毒纯化前的预处理第27页
     ·新城疫病毒的浓缩沉淀第27页
       ·硫酸铵沉淀法第27页
       ·乙醇沉淀法第27页
       ·聚乙二醇沉淀法第27页
   ·实验结果第27-28页
     ·初始血凝效价测定结果第27页
     ·硫酸铵沉淀结果第27-28页
     ·乙醇沉淀结果第28页
     ·聚乙二醇沉淀结果第28页
   ·讨论第28-29页
   ·小结第29-30页
第三章 新城疫病毒F48E9 两个HN 基因片段的克隆第30-38页
   ·实验材料第30-31页
     ·毒株与菌株第30页
     ·实验动物第30页
     ·主要要酶类和生物试剂第30页
     ·主要仪器和设备第30页
     ·主要试剂配制第30-31页
     ·引物设计第31页
   ·实验方法第31-34页
     ·NDV F48E9 的增殖第31页
     ·NDV F48E9 总RNA 的提取第31-32页
     ·RT-PCR 反应第32页
     ·PCR 产物的回收与纯化第32页
     ·回收产物与 pGEM-T 载体的连接与转化第32-34页
       ·连接第32页
       ·转化第32-33页
       ·重组质粒的筛选与鉴定第33-34页
   ·实验结果第34-36页
     ·RT-PCR 结果第34页
     ·重组质粒的酶切鉴定结果第34-35页
     ·重组质粒测序结果第35-36页
   ·讨论第36-37页
   ·小结第37-38页
第四章 新城疫病毒F48E9 两个HN 基因片段的原核表达第38-47页
   ·实验材料第38-39页
     ·毒株与菌株第38页
     ·主要要酶类和生物试剂第38页
     ·主要仪器和设备第38页
     ·主要试剂配制第38-39页
   ·技术路线示意图第39-40页
   ·实验方法第40-42页
     ·表达载体 pET-28a(+)质粒的制备第40页
     ·重组表达质粒 pET-HN1,pET-HN2 的构建第40页
     ·重组表达质粒 pET-HN1,pET-HN2 的鉴定第40-41页
     ·诱导目的蛋白的表达第41页
     ·目的蛋白的SDS-PAGE 分析第41-42页
     ·目的蛋白的纯化第42页
   ·实验结果第42-45页
     ·重组表达质粒 pET-HN1 和 pET-HN2 PCR 及酶切鉴定第42-43页
     ·重组蛋白的表达第43-44页
     ·目的蛋白的纯化第44-45页
   ·讨论第45-46页
   ·结论第46-47页
参考文献第47-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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