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抗人天冬酰胺合成酶单克隆抗体的制备与鉴定

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章天冬酰胺合成酶以及L-天冬酰胺酶的研究进展第10-19页
   ·天冬酰胺合成酶的基因结构及其表达调控第10-13页
     ·人ASNS 基因的结构第10页
     ·ASNS 基因的表达调控第10-11页
     ·ASNS 基因表达的调控机制第11页
     ·启动子区甲基化对ASNS 基因表达的影响第11-12页
     ·天冬酰胺合成酶在临床患者的表达研究第12-13页
   ·L-ASPARAGINASE 的结构及应用第13-15页
     ·L-asparaginase 的结构第13-14页
     ·L-asparaginase 的修饰第14页
     ·L-asparaginase 与ALL 的治疗第14-15页
   ·L-ASPARAGINASE 治疗中线鼻型NK/T 细胞淋巴瘤的研究进展第15-19页
     ·中线鼻/鼻型NK/T 细胞淋巴瘤特征第15页
     ·病理组织学表现第15页
     ·免疫表型第15页
     ·临床表现特征第15-16页
     ·中线鼻/鼻型NK/T 细胞淋巴瘤的治疗进展第16页
     ·L-asparaginase 用于治疗中线鼻型NK/T 细胞淋巴瘤第16-19页
第二章天冬酰胺合成酶的诱导表达、纯化及鉴定第19-26页
   ·材料与方法第19-23页
     ·重组质粒pMS-ASNS 及菌株第19-20页
     ·主要试剂第20页
     ·实验仪器第20页
     ·实验方法第20-23页
   ·结果与分析第23-25页
     ·MS2-ASNS 融合蛋白的表达和纯化第23-24页
     ·BCA 蛋白浓度测定试剂盒的标准曲线制备第24页
     ·融合蛋白MS2-ASNS 浓度测定第24-25页
   ·讨论第25页
     ·碱变性法提取融合蛋白M52-ASNS第25页
     ·10%5DS-PAGE 制备胶电洗脱回收融合蛋白第25页
   ·小结第25-26页
第三章 抗ASNS 单克隆抗体的制备和纯化第26-37页
   ·材料和方法第26-32页
     ·抗原第26页
     ·动物及动物免疫第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·实验仪器第27页
     ·小鼠免疫方法第27-28页
     ·细胞融合第28-29页
     ·亚克隆筛选第29-30页
     ·单克隆细胞株的冻存第30页
     ·抗ASNS McAb 亚类测定第30页
     ·单克隆抗体的纯化第30-32页
   ·结果与分析第32-35页
     ·鼠抗人ASNS 单克隆抗体的制备第32页
     ·抗ASNS-McAb 亚类鉴定结果第32-33页
     ·抗ASNS-McAb 的纯化第33-34页
     ·10% SDS-PAGE 鉴定纯化抗ASNS McAb第34-35页
   ·讨论第35页
     ·抗ASNS 单克隆抗体的制备第35页
     ·抗ASNS-McAb 亚类鉴定第35页
     ·抗ASNS McAb 的纯化第35页
   ·小结第35-37页
第四章 抗ASNS 单克隆抗体的鉴定第37-50页
   ·材料与方法第37-41页
     ·实验材料第37页
     ·主要试剂第37页
     ·实验仪器第37-38页
     ·纯化抗ASNS McAb 特异性检测第38页
     ·纯化抗ASNS McAb 效价的测定第38页
     ·Western blot 检测ASNS 在肿瘤组织中的表达第38-39页
     ·免疫细胞和组织化学方法检测ASNS 在肿瘤中的表达第39-40页
     ·检测ASNS 在肿瘤组织中的表达第40-41页
   ·结果与分析第41-48页
     ·纯化抗ASNS-McAb 特异性测定结果第41-42页
     ·抗ASNS McAb 效价的测定结果第42-44页
     ·Western-blot 检测ASNS 在肿瘤细胞中的表达第44页
     ·抗ASNS McAb 在肿瘤细胞中的免疫化学反应第44-46页
     ·抗ASNS McAb 在肿瘤组织中的免疫化学反应第46-48页
   ·讨论第48-49页
     ·纯化ASNS McAb 效价的测定第48页
     ·Western blot 检测ASNS 在肿瘤细胞中的表达第48页
     ·免疫化学方法检测 ASNS 在肿瘤细胞及组织中的表达第48-49页
   ·小结第49-50页
结论第50-51页
参考文献第51-55页
缩略语表第55-56页
附录第56-60页
致谢第60-61页
个人简历第61页

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