| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-16页 |
| 2 引言 | 第16-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-33页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·质粒、酶及主要化学试剂 | 第18-19页 |
| ·常用的缓冲液和贮存液 | 第19页 |
| ·主要的仪器设备 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-33页 |
| ·siRNA 表达载体PRNAi 的构建 | 第20-23页 |
| ·dsRNA 干扰载体pbarGPE1-RNAi 的构建 | 第23-25页 |
| ·球孢白僵菌对潮霉素B 的敏感性测定 | 第25页 |
| ·原生质体法转化 Bb202 | 第25-26页 |
| ·芽生孢子法转化 Bb202、Bb13 | 第26页 |
| ·球孢白僵菌基因组DNA 的提取 | 第26页 |
| ·PCR 初步筛选与验证 | 第26-28页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第28-30页 |
| ·转化子的产孢量、生长速度和分生孢子萌发中时的测定 | 第30-31页 |
| ·抗逆性测试 | 第31页 |
| ·生物测定 | 第31-33页 |
| 4 结果与分析 | 第33-51页 |
| ·siRNA 表达载体PRNAi 的构建 | 第33-36页 |
| ·寡核苷酸链的设计与合成 | 第33-34页 |
| ·质粒双酶切 | 第34-35页 |
| ·菌落PCR 验证 | 第35-36页 |
| ·dsRNA 干扰载体pbarGPE1-RNAi 的构建 | 第36-38页 |
| ·正向、反向目的片段的扩增 | 第36页 |
| ·重组中间载体的鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组干扰载体的鉴定 | 第37-38页 |
| ·球孢白僵菌对潮霉素B 的敏感性测定 | 第38页 |
| ·原生质体转化与芽生孢子转化 | 第38-39页 |
| ·导入PRNAi 载体菌株的筛选与鉴定 | 第39-42页 |
| ·转化子DNA 的提取 | 第39页 |
| ·转化子PCR 鉴定结果 | 第39-41页 |
| ·RNA 提取 | 第41页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第41-42页 |
| ·导入载体pbarGPE1-RNAi 菌株的筛选与鉴定 | 第42-45页 |
| ·转化子DNA 的提取 | 第42页 |
| ·转化子PCR 鉴定结果 | 第42-44页 |
| ·RNA 提取 | 第44页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第44-45页 |
| ·转化子的产孢量、生长速度和孢子萌发中时的测定 | 第45-46页 |
| ·生长速度的测定 | 第45页 |
| ·产孢量测定 | 第45-46页 |
| ·孢子萌发中时的测定 | 第46页 |
| ·抗逆性测试 | 第46-47页 |
| ·耐热力测试 | 第46页 |
| ·抗紫外能力测试 | 第46-47页 |
| ·毒力的生物测定 | 第47-51页 |
| ·不同菌株的累计死亡率 | 第47-48页 |
| ·致死中时的生物测定 | 第48页 |
| ·致死中浓度和致死中量的生物测定 | 第48-51页 |
| 讨论 | 第51-54页 |
| 1 关于研究基因功能的方法 | 第51页 |
| 2 RNA 干扰的几种方法 | 第51页 |
| 3 关于构建干扰载体 | 第51-52页 |
| 4 遗传转化方法的研究 | 第52页 |
| 5 关于 BbJEN1 基因 | 第52-53页 |
| 6 毒力的生物测定 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
| 发表的学术论文目录 | 第63页 |
