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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒人工感染模型的建立及其部分生物学特性研究

摘要第1-8页
Abstract第8-17页
第一章 绪论第17-34页
   ·猪繁殖与呼吸综合征概况第17-18页
   ·PRRSV分子生物学第18-21页
     ·PRRSV的分类地位和基本结构第18-19页
     ·PRRSV的复制酶蛋白第19页
     ·PRRSV的主要结构蛋白第19-20页
     ·PRRSV的次要结构蛋白第20-21页
   ·PRRSV的遗传变异第21-22页
   ·PRRSV的复制及其细胞受体第22-23页
   ·PRRSV的毒力及其决定因子的研究第23页
   ·病毒的致病机理第23-25页
     ·抗体依赖性增强作用第23-24页
     ·PRRSV的持续性感染第24页
     ·细胞凋亡与PRRSV 致病的关系第24-25页
     ·PRRSV感染的免疫抑制第25页
   ·PRRSV感染的免疫学第25-28页
     ·天然免疫第25-26页
     ·体液免疫第26页
     ·细胞免疫第26-27页
     ·细胞因子应答第27-28页
   ·临床症状和病理学第28-29页
   ·PRRSV体内致病性实验模型的研究第29页
   ·PRRSV的分子检测技术第29-31页
     ·反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)第30页
     ·套式PCR第30页
     ·荧光定量RT-PCR第30页
     ·环介导逆转录等温扩增技术(RT- LAMP)第30-31页
   ·PRRS 防制策略第31-33页
     ·执行严格的生物安全性管理措施第31页
     ·预防混合感染和继发感染第31-32页
     ·PRRSV的疫苗及接种第32页
     ·PRRSV的净化第32-33页
   ·研究的目的和意义第33-34页
第二章 高致病性PRRSV变异株人工感染模型的建立第34-48页
   ·材料和方法第35-38页
     ·病毒和细胞第35-36页
     ·主要实验试剂第36页
     ·仪器设备第36页
     ·试验猪第36页
     ·病毒增殖及其毒价滴定第36页
     ·实验设计第36-37页
     ·检测样品的采集第37页
     ·ELISA抗体检测第37页
     ·PRRSV病毒分离和 RT-PCR检测第37页
     ·病理学观察第37-38页
     ·其他病原的检测第38页
   ·结果第38-46页
     ·临床症状第38-39页
     ·解剖病理变化第39-41页
     ·组织病理变化第41-44页
     ·ELISA抗体应答第44页
     ·血清和组织样品病毒的检测第44-46页
     ·其他病原的检测第46页
   ·讨论第46-48页
第三章 高致病性 PRRSV 变异株对仔猪的致病性和免疫应答研究第48-67页
   ·材料和方法第49-52页
     ·主要试剂第49页
     ·仪器设备第49-50页
     ·病毒和细胞培养第50页
     ·试验动物和实验设计第50页
     ·样品的采集第50页
     ·免疫学检测第50-51页
     ·病毒分离和荧光定量RT-PCR检测第51页
     ·病理学观察第51页
     ·继发感染检测第51-52页
     ·统计分析第52页
   ·结果第52-63页
     ·临床症状和解剖病理变化第52-53页
     ·免疫应答结果第53页
     ·病毒分离和病毒含量测定结果第53-58页
     ·病毒抗原分布第58页
     ·组织病理学变化第58-59页
     ·继发感染检测结果第59-63页
   ·讨论第63-67页
第四章 猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用第67-78页
   ·材料与方法第68-70页
     ·病毒和细胞第68页
     ·引物和探针第68页
     ·试剂和仪器第68页
     ·RNA的提取与cDNA合成第68-69页
     ·阳性标准品的制备第69页
     ·反应体系和条件的优化第69页
     ·标准曲线的建立第69-70页
     ·特异性试验第70页
     ·敏感性试验第70页
     ·重复性试验第70页
     ·临床样品检测和病毒分离第70页
   ·结果第70-76页
     ·阳性标准品的获得第70-71页
     ·荧光定量PCR条件的优化第71-72页
     ·标准曲线的建立第72页
     ·特异性试验结果第72-73页
     ·敏感性试验结果第73-74页
     ·重复性试验结果第74页
     ·临床样品病毒含量检测结果第74-75页
     ·病毒分离结果第75-76页
   ·讨论第76-78页
第五章 猪IFN-γm RNA TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立第78-87页
   ·材料与方法第79-81页
     ·病毒与质粒第79页
     ·引物和探针第79-80页
     ·试剂和仪器第80页
     ·组织 RNA 的提取和 cDNA 合成第80页
     ·阳性标准品的制备第80页
     ·反应条件的优化第80页
     ·标准曲线的建立第80页
     ·特异性试验第80-81页
     ·敏感性试验第81页
     ·重复性试验第81页
     ·临床样品检测第81页
   ·结果第81-85页
     ·CyPA基因PCR扩增第81-82页
     ·反应条件的优化第82页
     ·标准曲线的建立第82页
     ·特异性第82-84页
     ·敏感性第84页
     ·重复性第84-85页
     ·临床样品检测结果第85页
   ·讨论第85-87页
第六章 全文结论第87-88页
参考文献第88-107页
附录第107-108页
致谢第108-110页
作者简介第110-112页

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