| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-30页 |
| ·EIAV 的归属与分类 | 第14-16页 |
| ·EIAV 的核酸组成及编码蛋白 | 第16-20页 |
| ·EIAV 的结构蛋白 | 第17-18页 |
| ·EIAV 的LTR 功能 | 第18页 |
| ·EIAV 的附加蛋白 | 第18-20页 |
| ·EIAV 引起疾病的临床特征 | 第20-24页 |
| ·EIAV 感染的控制 | 第20页 |
| ·EIA 的发病进程 | 第20-22页 |
| ·EIA 的生理病理学变化 | 第22页 |
| ·EIAV 的细胞嗜性与病毒毒株 | 第22-24页 |
| ·EIAV 在感染动物体内的演化 | 第24-26页 |
| ·EIAV 感染和复制的免疫控制 | 第26-28页 |
| ·EIAV 的疫苗研制 | 第28-29页 |
| ·本试验的目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 EIAV 疫苗株 S2 基因不同差异位点回复突变全基因组感染性克隆的构建 | 第30-51页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·毒株、菌株与质粒 | 第30-31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·细胞 | 第31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| ·引物 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-37页 |
| ·细胞培养 | 第32-33页 |
| ·序列分析 | 第33页 |
| ·S2 氨基酸序列分析与系统进化树构建 | 第33页 |
| ·国内强弱毒EIAV S2 基因的序列分析 | 第33页 |
| ·EIAV_(FDDV) S2 基因不同差异位点突变质粒的构建 | 第33-34页 |
| ·EIAV_(FDDV) S2 基因不同差异位点回复突变全基因组克隆质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·质粒转染与病毒传代 | 第35页 |
| ·转染后FDD 细胞内盲传 | 第35页 |
| ·衍生病毒在 EMDM 细胞内盲传 | 第35页 |
| ·验证拯救病毒试验 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第35-36页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第36页 |
| ·逆转录酶活性检测 | 第36页 |
| ·衍生病毒电镜观察 | 第36页 |
| ·衍生病毒复制动力学分析 | 第36-37页 |
| ·FDD 细胞内衍生病毒复制活性检测 | 第36-37页 |
| ·EMDM 内衍生病毒复制活性检测 | 第37页 |
| ·Western blot 检测衍生病毒体外S2 蛋白表达 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-48页 |
| ·序列分析结果 | 第37-39页 |
| ·S2 氨基酸序列分析与系统进化树构建 | 第37-38页 |
| ·国内强弱毒EIAV S2 基因的序列分析 | 第38-39页 |
| ·EIAV_(FDDV) S2 基因不同差异位点突变质粒的构建 | 第39-40页 |
| ·EIAV_(FDDV) S2 基因不同差异位点回复突变全基因组克隆质粒的构建 | 第40-42页 |
| ·转染和FDD 细胞病变 | 第42-43页 |
| ·转染和FDD 细胞病变 | 第43-44页 |
| ·重组质粒测序和RT-PCR 鉴定 | 第44页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第44-45页 |
| ·逆转录酶活性检测 | 第45-46页 |
| ·衍生病毒电镜观察 | 第46-47页 |
| ·病毒的复制动力学分析 | 第47-48页 |
| ·衍生病毒在FDD 细胞中的复制特性 | 第47页 |
| ·衍生病毒在EMDM 中的复制特性 | 第47-48页 |
| ·Western blot 检测衍生病毒S2 蛋白表达 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| 第三章 EIAV 疫苗株 S2 基因回复突变全基因组感染性克隆衍生病毒的马体内试验 | 第51-66页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·毒种 | 第51页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·试剂 | 第51页 |
| ·仪器设备 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·Realtime RT-PCR 标准曲线的建立 | 第52页 |
| ·EIAV gag 部分基因的扩增与克隆 | 第52页 |
| ·EIAV gag 部分基因的体外转录 | 第52页 |
| ·体外转录产物的纯化 | 第52页 |
| ·标准曲线建立 | 第52页 |
| ·EIAV S2 基因回复突变型衍生病毒的定量 | 第52-53页 |
| ·试验分组与接种病毒情况 | 第53页 |
| ·样品采集 | 第53页 |
| ·马血液分析 | 第53页 |
| ·血浆中病毒RNA 提取 | 第53页 |
| ·马体内S2 及部分gp90 的序列分析 | 第53-54页 |
| ·试验马体温及血常规检测 | 第54页 |
| ·马体内EIAV 载量的测定 | 第54页 |
| ·马体内衍生病毒S2 蛋白表达检测 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-64页 |
| ·Realtime RT-PCR 标准曲线的建立 | 第54-55页 |
| ·EIAV S2 基因回复突变型衍生病毒的定量 | 第55-56页 |
| ·马体内S2 及部分gp90 的序列分析 | 第56-57页 |
| ·试验马临床体征及病毒毒力指标分析 | 第57-63页 |
| ·亲本疫苗株克隆衍生病毒对照组的体温、血小板与病毒载量动态分析 | 第57-58页 |
| ·S2 基因回复突变克隆衍生病毒组的体温、血小板与病毒载量动态分析 | 第58-60页 |
| ·健康对照组的体温、血小板与病毒载量动态分析 | 第60-62页 |
| ·体内试验数据统计学分析 | 第62-63页 |
| ·马体内衍生病毒 S2 蛋白表达检测 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 第四章 全文结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简历 | 第81页 |
