摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
第1章 绪论 | 第9-24页 |
·固氮蓝藻PCC 7120 研究现状 | 第9-17页 |
·质粒与载体 | 第9-10页 |
·蓝藻外源基因的转化 | 第10-15页 |
·基因克隆和基因图谱 | 第15-16页 |
·蓝藻的诱变方法和突变株的分离 | 第16页 |
·基因的表达调控 | 第16-17页 |
·蓝细菌异型胞发育机制 | 第17-19页 |
·异形胞简介 | 第17页 |
·异形胞的形态特征 | 第17-18页 |
·异形胞的功能 | 第18-19页 |
·蓝藻报告基因 | 第19-22页 |
·绿色荧光蛋白(GFP)在蓝藻中的研究现状 | 第19-20页 |
·GFP 简介 | 第20-21页 |
·基因表达与产物定位 | 第21页 |
·GFP 荧光的检测 | 第21-22页 |
·受铜离子诱导表达的启动子PpetE | 第22页 |
·本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
第2章 材料与方法 | 第24-33页 |
·本研究所用菌株与质粒 | 第24页 |
·本研究所用质粒 | 第24页 |
·培养基配方与试剂 | 第24-27页 |
·培养基配制 | 第24-25页 |
·抗生素在大肠杆菌和蓝细菌中的使用浓度 | 第25-26页 |
·主要的分子生物学试剂 | 第26页 |
·本研究所用引物 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-33页 |
·Anabaena PCC 7120 总DNA 的抽提 | 第27页 |
·质粒DNA 的制备及其基因操作 | 第27-29页 |
·体内定点诱变 | 第29-30页 |
·转化 | 第30-31页 |
·PCR 法鉴定 | 第31-32页 |
·显微镜观察 | 第32-33页 |
第3章 alr0647 突变体的构建 | 第33-42页 |
·引物设计 | 第33页 |
·突变体的体外克隆及分析 | 第33-35页 |
·鱼腥藻PCC 7120 对Sp 基础抗性的检测 | 第35-36页 |
·体内突变体的筛选 | 第36-37页 |
·突变体的表型分析 | 第37-40页 |
·缺氮培养表型观察 | 第37-38页 |
·异型胞变化 | 第38-39页 |
·生理指标的测定 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第4章 alr0647启动子分析及定位 | 第42-53页 |
·alr0647 的启动子分析 | 第42-47页 |
·引物设计 | 第42页 |
·穿梭质粒pHB912 的改造 | 第42-43页 |
·启动子与报告基因gfp 融合载体的构建 | 第43-45页 |
·启动子与报告基因gfp 融合载体的体内转化 | 第45-46页 |
·alr0647的启动子分析 | 第46-47页 |
·alr0647 定位的体外重组质粒的构建 | 第47-51页 |
·引物设计 | 第47页 |
·PpetE 与报告基因gfp 融合载体的构建 | 第47-49页 |
·PpetE 连接alr0647 与报告基因gfp 融合载体的构建 | 第49-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
第5章 集胞藻PCC 6803 中基因slr1212 的定向敲除 | 第53-57页 |
·集胞藻pcc 6803 概述 | 第53页 |
·引物设计 | 第53页 |
·slr1212 的定向敲除 | 第53-55页 |
·讨论 | 第55页 |
·小结 | 第55-57页 |
结论 | 第57-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
附录 攻读学位期间发表的论文 | 第66页 |