| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-25页 |
| ·鱼腥藻PCC7120 的研究背景 | 第9-10页 |
| ·鱼腥藻PCC7120 的遗传操作 | 第10-13页 |
| ·蓝藻基因工程载体 | 第10-11页 |
| ·蓝藻外源基因转化的方法 | 第11-12页 |
| ·影响蓝藻转化效率的因素 | 第12-13页 |
| ·鱼腥藻PCC7120 突变株的分离 | 第13页 |
| ·藻胆蛋白裂合酶 | 第13-16页 |
| ·光合作用 | 第13-14页 |
| ·藻胆蛋白 | 第14-15页 |
| ·藻胆蛋白的生物合成 | 第15-16页 |
| ·基因的转录调控 | 第16-23页 |
| ·启动子 | 第16-18页 |
| ·鱼腥藻PCC7120 中启动子的研究 | 第18-19页 |
| ·启动子的研究方法 | 第19-21页 |
| ·报告基因的研究进展 | 第21-23页 |
| ·启动子表达特征的研究方法 | 第23页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第23-25页 |
| 第2章 鱼腥藻PCC 7120 cpcS2 缺失体的构建与筛选 | 第25-39页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·材料与方法 | 第25-36页 |
| ·菌株、质粒及培养条件 | 第25-26页 |
| ·主要的分子生物学试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·实验设计 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-33页 |
| ·PCC7120 藻总DNA 的提取 | 第28页 |
| ·碱裂解法大量制备质粒DNA | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备和转化 | 第29页 |
| ·引物设计与测序 | 第29-30页 |
| ·目的片段的PCR 扩增 | 第30-31页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第31页 |
| ·DNA 的限制性内切酶消化 | 第31页 |
| ·PCR 技术引导的定点突变 | 第31-32页 |
| ·三亲本接合转移鱼腥藻 | 第32-33页 |
| ·cpcS2 突变体的构建与筛选 | 第33-36页 |
| ·实验结果 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第3章 鱼腥藻PCC 7120 CpcS1 和CPCT1 抗血清的制备 | 第39-48页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·材料与方法 | 第39-44页 |
| ·菌株与质粒 | 第39页 |
| ·主要材料与试剂 | 第39-40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-44页 |
| ·蛋白质的大量表达和细胞的超声破碎 | 第40-41页 |
| ·透析袋的预处理 | 第41页 |
| ·亲和柱层析和透析纯化蛋白 | 第41页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41-42页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第42-43页 |
| ·动物免疫和抗血清的获得 | 第43页 |
| ·Western Blotting 检测 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-46页 |
| ·同源性分析 | 第44-45页 |
| ·CpcS1 和CpcT1 蛋白提纯 | 第45-46页 |
| ·提纯蛋白的浓度测定 | 第46页 |
| ·抗血清的效价和特异性 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第4章 鱼腥藻PCC 7120 cpcS2 启动子初步分析 | 第48-54页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·材料与方法 | 第48-53页 |
| ·菌株与质粒 | 第48页 |
| ·主要材料与试剂 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48-49页 |
| ·实验设计 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-50页 |
| ·质粒DNA 的操作 | 第49页 |
| ·5’末端的去磷酸化反应 | 第49页 |
| ·5’端的补平反应 | 第49-50页 |
| ·引物合成与测序 | 第50页 |
| ·电击转化鱼腥蓝藻 | 第50页 |
| ·cpcS2 基因启动子分析 | 第50-53页 |
| ·克隆可能的启动子片段 | 第50-51页 |
| ·绿色荧光蛋白的原核表达 | 第51页 |
| ·穿梭质粒pHB912 的改造 | 第51-52页 |
| ·cpcS2P 与穿梭质粒的整合与鉴定 | 第52页 |
| ·三亲本杂交转化鱼腥蓝藻与筛选 | 第52-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-54页 |
| 实验的总结与展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文 | 第62-63页 |
| 附录B 缩略词(Abbreviation)一览表 | 第63页 |
