| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| 1 猪细小病毒研究进展 | 第13-15页 |
| ·简介 | 第13页 |
| ·分子生物学特性 | 第13页 |
| ·VP2 基因及编码的蛋白 | 第13-14页 |
| ·诊断技术 | 第14页 |
| ·猪细小病毒疫苗研究进展 | 第14-15页 |
| 2 猪圆环病毒研究进展 | 第15-16页 |
| ·简介 | 第15页 |
| ·分子生物学特性 | 第15页 |
| ·ORF2 基因及编码的蛋白 | 第15-16页 |
| ·诊断技术 | 第16页 |
| ·猪圆环病毒疫苗研究进展 | 第16页 |
| 3 核酸疫苗研究进展 | 第16-17页 |
| ·核酸疫苗的特点 | 第16-17页 |
| ·影响DNA 疫苗免疫效果的因素 | 第17页 |
| ·DNA 疫苗存在的问题 | 第17页 |
| 4 真核共表达载体 | 第17-18页 |
| ·载体质粒的特点 | 第17-18页 |
| ·双顺反子表达质粒PIRES | 第18页 |
| ·双顺反子表达载体在DNA 疫苗中的应用 | 第18页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 PPV-VP2、PCV2-ORF2 共表达质粒的构建及体外表达 | 第19-30页 |
| 1 材料 | 第19页 |
| ·病毒与细胞 | 第19页 |
| ·酶及主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| 2 方法 | 第19-23页 |
| ·PPV-VP2 和PCV2-ORF2 基因扩增引物的设计 | 第19-20页 |
| ·病毒DNA 的提取 | 第20页 |
| ·PPV-VP2 和PCV2-ORF2 基因的扩增 | 第20页 |
| ·共表达PPV-VP2 和PCV2-ORF2 基因真核质粒的构建 | 第20-22页 |
| ·重组质粒在CHO 细胞中的表达 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23-28页 |
| ·基因扩增结果 | 第23-24页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第24-27页 |
| ·Western-blot 检验蛋白表达结果 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 重组质粒在小鼠体内诱导的免疫反应 | 第30-45页 |
| 1 材料 | 第30页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·病毒、细胞和质粒 | 第30页 |
| ·酶及主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-34页 |
| ·DNA 真核重组表达质粒的大量制备 | 第30-31页 |
| ·重组质粒免疫小鼠方案 | 第31页 |
| ·诱导小鼠体液免疫效果检测 | 第31-33页 |
| ·诱导小鼠细胞免疫效果检测 | 第33页 |
| ·重组质粒安全性检测 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-42页 |
| ·小鼠抗体ELISA 检测结果 | 第34-35页 |
| ·中和试验检测小鼠血清抗体结果 | 第35-36页 |
| ·免疫小鼠淋巴细胞增殖反应 | 第36页 |
| ·免疫小鼠CD4+、CD8+细胞检测结果 | 第36-39页 |
| ·安全性结果 | 第39-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 第四章 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
