| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-26页 |
| ·新城疫的概述 | 第15页 |
| ·新城疫病毒的分子生物学研究进展 | 第15-21页 |
| ·NDV 生物学特性 | 第15-17页 |
| ·NDV 的基因组及编码的蛋白的生物学特性 | 第17-20页 |
| ·新城疫病毒的复制 | 第20页 |
| ·病毒在宿主中的传代 | 第20-21页 |
| ·新城疫的诊断 | 第21-22页 |
| ·新城疫病毒的免疫和防治 | 第22-23页 |
| ·新城疫的流行 | 第23-24页 |
| ·国外新城疫的流行情况 | 第23页 |
| ·国内新城疫的流行情况 | 第23-24页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术 | 第24-25页 |
| ·研究目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 材料和方法 | 第26-38页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·病料来源 | 第26页 |
| ·SPF 鸡胚、SPF 鸡和鸡外周血红细胞 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| ·引物 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-38页 |
| ·病毒的分离鉴定 | 第28-29页 |
| ·血凝试验(HA)血凝抑制试验(HI) | 第29-30页 |
| ·病毒 RNA 的提取和反转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR) | 第30页 |
| ·3′RACE 和5′RACE | 第30-32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第32页 |
| ·全基因组的拼接比较分析 | 第32-33页 |
| ·病毒半数感染量(EID50)的测定 | 第33页 |
| ·病毒在SPF 鸡胚中的传代培养 | 第33页 |
| ·动物实验 | 第33页 |
| ·原代鸡胚成纤维细胞(CEF)的制作 | 第33-34页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的传代 | 第34页 |
| ·第一代尿囊液病毒在鸡胚成纤维细胞的噬斑纯化 | 第34页 |
| ·挑取噬斑扩增病毒 | 第34页 |
| ·5 个病毒克隆株的全基因组序列测定及比对分析 | 第34-35页 |
| ·病毒在鸡成纤维细胞中的传代培养 | 第35页 |
| ·第一代在鸡胚成纤维细胞中传代病毒的部分基因序列的测定 | 第35页 |
| ·荧光定量PCR 检测两株不同病毒在CEF 传代中的病毒载量变化 | 第35-37页 |
| ·鉴别在SPF 鸡胚和CEF 传代的两株优势毒株的病毒含量变化 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果 | 第38-54页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第38页 |
| ·半数感染量的测定(EID50) | 第38-39页 |
| ·动物实验 | 第39-40页 |
| ·基因片段的克隆 | 第40页 |
| ·PCR 产物的序列测定和全基因序列的拼接 | 第40-42页 |
| ·ck/CH/LSD/08-29 F 基因的序列分析及基因进化树的构建 | 第42-43页 |
| ·ck/CH/LSD/08-29 HN 基因的序列分析 | 第43-44页 |
| ·尿囊液病毒的噬斑纯化 | 第44页 |
| ·病毒克隆株的扩大培养 | 第44页 |
| ·病毒在CEF 噬斑纯化的5 个克隆株的全基因组序列的测定比对分析 | 第44页 |
| ·噬斑纯化的病毒株ck/CH/LSD/08-29(CEF)和尿囊腔接种的病毒株ck/CH/LSD/08-29 全基因组序列比较分析 | 第44-46页 |
| ·经过 CEF 噬斑纯化的病毒克隆株 ck/CH/LSD/08-29(CEF)的开放读码框的预测 | 第46-47页 |
| ·尿囊液优势病毒株ck/CH/LSD/08-29和CEF优势病毒株ck/CH/LSD/08-29(CEF)与新城疫病毒各代表毒株的全基因序列和各个基因构建的遗传进化树及同源性分析 | 第47-49页 |
| ·病毒在单层CEF 传代 | 第49页 |
| ·病毒在SPF 鸡胚的传代培养 | 第49页 |
| ·在CEF 中传代的第一代次的病毒的部分序列测序结果 | 第49页 |
| ·克隆株病毒 ck/CH/LSD/08-29(CEF)HN 蛋白氨基酸(1-80 位点)与其他 NDV代表毒株氨基酸序列比对 | 第49-50页 |
| ·利用6 对鉴定引物扩增在SPF 鸡胚和CEF 中传代的各个代次病毒的PCR 结果 | 第50-52页 |
| ·利用荧光定量检测两株病毒株在CEF 传代中的含量变化 | 第52-54页 |
| 第四章 讨论 | 第54-57页 |
| ·病毒的分离和鉴定 | 第54页 |
| ·尿囊液病毒株ck/CH/LSD/08-29 的全基因组的序列分析 | 第54页 |
| ·经过CEF 噬斑纯化的病毒克隆株ck/CH/LSD/08-29(CEF)序列分析 | 第54-55页 |
| ·混合病毒接种SPF 鸡胚和CEF 传代的变化 | 第55-57页 |
| 第五章 全文结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
