摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 引言 | 第14-24页 |
·CIA 概况 | 第14页 |
·CAV 病原学 | 第14-18页 |
·CAV 病毒学分类与结构特性 | 第14-15页 |
·CAV 理化特性 | 第15页 |
·CAV 培养、复制及转录 | 第15-16页 |
·CAV 基因编码蛋白及功能研究 | 第16-18页 |
·蛋白与蛋白相互作用研究的相关技术 | 第18-22页 |
·噬菌体表面呈现技术 | 第18-19页 |
·串联亲和纯化技术 | 第19页 |
·免疫共沉淀技术 | 第19-20页 |
·GST 融合蛋白沉降技术 | 第20页 |
·酵母双杂交系统 | 第20-21页 |
·蛋白质芯片技术 | 第21-22页 |
·鸡贫血病毒蛋白与蛋白相互作用研究进展 | 第22页 |
·本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
第二章 鸡贫血病毒蛋白多克隆抗体的制备 | 第24-33页 |
·材料和方法 | 第24-28页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·实验动物 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
·试剂与药品 | 第25页 |
·试剂配制 | 第25-26页 |
·CAV VP1、VP2 和VP3 基因的克隆与表达 | 第26-27页 |
·融合蛋白多克隆抗体的制备 | 第27页 |
·融合蛋白多克隆抗体的鉴定 | 第27-28页 |
·结果 | 第28-31页 |
·目的基因克隆及鉴定结果 | 第28页 |
·蛋白的融合表达及鉴定 | 第28-29页 |
·兔抗VP1、VP2 和VP3 多克隆抗体的效价测定 | 第29页 |
·制备的多克隆抗体与真核表达的VP1、VP2 和VP3 蛋白反应原性检测 | 第29-30页 |
·制备的多克隆抗体Western blot 分析 | 第30-31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
·大肠杆菌表达系统 | 第31页 |
·鸡贫血病毒VP1 蛋白的原核表达 | 第31-32页 |
·鸡贫血病毒非结构蛋白的原核表达 | 第32-33页 |
第三章 鸡贫血病毒VP1、VP2 和VP3 蛋白之间的相互作用研究 | 第33-47页 |
·材料与方法 | 第33-39页 |
·病毒、菌株、质粒、抗体、细胞 | 第33页 |
·试剂与药品 | 第33-35页 |
·相关试剂配制方法 | 第35-36页 |
·鸡贫血病毒VP1、VP2 和VP3 基因酵母双杂交载体的构建 | 第36页 |
·酵母双杂交重组诱饵质粒的转化及自激活性的检测 | 第36-37页 |
·酵母双杂交载体共转化Mav203 酵母感受态细胞 | 第37页 |
·VP1、VP2 和VP3 真核表达及IFA、Western blot 分析 | 第37-38页 |
·免疫共沉淀试验(Co-IP) | 第38-39页 |
·激光共聚焦试验 | 第39页 |
·结果 | 第39-44页 |
·鸡贫血病毒VP1、VP2 和VP3 基因酵母双杂交载体的构建 | 第39-40页 |
·构建的诱饵载体自激活作用的鉴定 | 第40-41页 |
·酵母双杂交筛选结果 | 第41-42页 |
·免疫共沉淀试验结果 | 第42-43页 |
·激光共聚焦试验结果 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-47页 |
·鸡贫血病毒蛋白之间相互作用 | 第44-45页 |
·酵母双杂交系统 | 第45-46页 |
·互作蛋白的进一步验证 | 第46-47页 |
第四章 鸡贫血病毒蛋白相互作用域的定位研究 | 第47-54页 |
·材料与方法 | 第47-48页 |
·毒株、细胞、质粒 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·VP1、VP2 和VP3 缺失片段酵母双杂交载体构建 | 第47页 |
·酵母双杂交载体共转化Mav203 感受态及阳性重组子筛选 | 第47-48页 |
·结果 | 第48-51页 |
·酵母双杂交载体构建 | 第48-50页 |
·截短片段酵母双杂交试验筛选结果 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-54页 |
·VP1-VP2 蛋白相互作用域定位研究 | 第51-52页 |
·VP2-VP3 蛋白相互作用域定位研究 | 第52-53页 |
·小结 | 第53-54页 |
第五章 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简历 | 第63页 |