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鸡贫血病毒蛋白相互作用域定位研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 引言第14-24页
   ·CIA 概况第14页
   ·CAV 病原学第14-18页
     ·CAV 病毒学分类与结构特性第14-15页
     ·CAV 理化特性第15页
     ·CAV 培养、复制及转录第15-16页
     ·CAV 基因编码蛋白及功能研究第16-18页
   ·蛋白与蛋白相互作用研究的相关技术第18-22页
     ·噬菌体表面呈现技术第18-19页
     ·串联亲和纯化技术第19页
     ·免疫共沉淀技术第19-20页
     ·GST 融合蛋白沉降技术第20页
     ·酵母双杂交系统第20-21页
     ·蛋白质芯片技术第21-22页
   ·鸡贫血病毒蛋白与蛋白相互作用研究进展第22页
   ·本研究的目的及意义第22-24页
第二章 鸡贫血病毒蛋白多克隆抗体的制备第24-33页
   ·材料和方法第24-28页
     ·菌株与质粒第24页
     ·实验动物第24页
     ·主要仪器第24-25页
     ·试剂与药品第25页
     ·试剂配制第25-26页
     ·CAV VP1、VP2 和VP3 基因的克隆与表达第26-27页
     ·融合蛋白多克隆抗体的制备第27页
     ·融合蛋白多克隆抗体的鉴定第27-28页
   ·结果第28-31页
     ·目的基因克隆及鉴定结果第28页
     ·蛋白的融合表达及鉴定第28-29页
     ·兔抗VP1、VP2 和VP3 多克隆抗体的效价测定第29页
     ·制备的多克隆抗体与真核表达的VP1、VP2 和VP3 蛋白反应原性检测第29-30页
     ·制备的多克隆抗体Western blot 分析第30-31页
   ·讨论第31-33页
     ·大肠杆菌表达系统第31页
     ·鸡贫血病毒VP1 蛋白的原核表达第31-32页
     ·鸡贫血病毒非结构蛋白的原核表达第32-33页
第三章 鸡贫血病毒VP1、VP2 和VP3 蛋白之间的相互作用研究第33-47页
   ·材料与方法第33-39页
     ·病毒、菌株、质粒、抗体、细胞第33页
     ·试剂与药品第33-35页
     ·相关试剂配制方法第35-36页
     ·鸡贫血病毒VP1、VP2 和VP3 基因酵母双杂交载体的构建第36页
     ·酵母双杂交重组诱饵质粒的转化及自激活性的检测第36-37页
     ·酵母双杂交载体共转化Mav203 酵母感受态细胞第37页
     ·VP1、VP2 和VP3 真核表达及IFA、Western blot 分析第37-38页
     ·免疫共沉淀试验(Co-IP)第38-39页
     ·激光共聚焦试验第39页
   ·结果第39-44页
     ·鸡贫血病毒VP1、VP2 和VP3 基因酵母双杂交载体的构建第39-40页
     ·构建的诱饵载体自激活作用的鉴定第40-41页
     ·酵母双杂交筛选结果第41-42页
     ·免疫共沉淀试验结果第42-43页
     ·激光共聚焦试验结果第43-44页
   ·讨论第44-47页
     ·鸡贫血病毒蛋白之间相互作用第44-45页
     ·酵母双杂交系统第45-46页
     ·互作蛋白的进一步验证第46-47页
第四章 鸡贫血病毒蛋白相互作用域的定位研究第47-54页
   ·材料与方法第47-48页
     ·毒株、细胞、质粒第47页
     ·主要试剂第47页
     ·VP1、VP2 和VP3 缺失片段酵母双杂交载体构建第47页
     ·酵母双杂交载体共转化Mav203 感受态及阳性重组子筛选第47-48页
   ·结果第48-51页
     ·酵母双杂交载体构建第48-50页
     ·截短片段酵母双杂交试验筛选结果第50-51页
   ·讨论第51-54页
     ·VP1-VP2 蛋白相互作用域定位研究第51-52页
     ·VP2-VP3 蛋白相互作用域定位研究第52-53页
     ·小结第53-54页
第五章 结论第54-55页
参考文献第55-62页
致谢第62-63页
作者简历第63页

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