| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 文献综述 | 第10-22页 |
| 1 猪瘟和猪瘟病毒概述 | 第10-22页 |
| ·猪瘟 | 第10页 |
| ·猪瘟病毒的生物学特性 | 第10-14页 |
| ·猪瘟病毒的形态学特征 | 第10-11页 |
| ·猪瘟病毒基因组结构 | 第11-12页 |
| ·猪瘟病毒基因组编码的蛋白及其功能 | 第12-14页 |
| ·猪瘟疫苗的研究进展 | 第14-17页 |
| ·传统疫苗 | 第14-15页 |
| ·新型疫苗 | 第15-17页 |
| ·基因缺失弱毒疫苗 | 第15页 |
| ·亚单位疫苗 | 第15-16页 |
| ·重组活载体疫苗 | 第16页 |
| ·核酸疫苗 | 第16-17页 |
| ·中国猪瘟疫苗(HCLV)现状 | 第17-18页 |
| ·荧光定量PCR 技术的研究进展 | 第18-22页 |
| ·荧光定量PCR 技术原理 | 第18-19页 |
| ·荧光定量PCR 定量形式 | 第19页 |
| ·荧光定量PCR 的种类 | 第19-22页 |
| 试验部分 | 第22-43页 |
| 1 引言 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-29页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·毒株 | 第23页 |
| ·主要仪器与设备 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·培养基与抗生素及其配制 | 第23-24页 |
| ·引物和探针 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-29页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·cDNA 的合成 | 第25页 |
| ·标准品制备 | 第25-26页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第25页 |
| ·cDNA 的合成 | 第25页 |
| ·目的片段的PCR 扩增 | 第25页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·目的片段回收纯化 | 第25-26页 |
| ·目的片段的连接与转化 | 第26页 |
| ·含目的片段的重组质粒提取 | 第26页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第26页 |
| ·PCR 退火温度的优化 | 第26页 |
| ·反应体系的优化 | 第26-27页 |
| ·特异性、敏感性、重复性试验 | 第27页 |
| ·特异性 | 第27页 |
| ·敏感性 | 第27页 |
| ·重复性 | 第27页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗和猪瘟兔化弱毒疫苗悬液病毒含量检测 | 第27-28页 |
| ·细胞制备及接毒 | 第28-29页 |
| ·细胞的制备 | 第28页 |
| ·接毒与收毒 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-40页 |
| ·荧光定量RT-PCR 方法的建立 | 第29-32页 |
| ·PCR 退火温度的确定 | 第29页 |
| ·反应参数的优化 | 第29页 |
| ·标准曲线的建立及检测的敏感性试验 | 第29-30页 |
| ·荧光定量RT-PCR 方法的特异性 | 第30-31页 |
| ·荧光定量RT-PCR? 方法的重复性 | 第31-32页 |
| ·应用荧光定量RT-PCR 对猪瘟兔化弱毒疫苗中病毒含量的检测 | 第32-39页 |
| ·应用荧光定量RT-PCR 确定猪瘟细胞苗生产中收毒时间 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| ·荧光定量RT-PCR 方法的建立 | 第40-41页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗中病毒含量的检测 | 第41-42页 |
| ·猪瘟细胞苗生产中收毒时间的确定 | 第42-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
| 在读硕士期间发表的论文 | 第50页 |
