| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 文献综述 | 第12-22页 |
| 1 引言 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-38页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·样品来源 | 第23页 |
| ·参考菌株 | 第23页 |
| ·主要增菌液和培养基 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·细菌微量生化反应管 | 第23页 |
| ·抗生素药敏试验纸片 | 第23-24页 |
| ·所用引物和探针序列 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-38页 |
| ·沙门氏菌的分离培养 | 第26页 |
| ·沙门氏菌分离株的生化试验 | 第26页 |
| ·沙门氏菌分离株的血清学试验 | 第26-27页 |
| ·沙门氏菌分离株的PCR 鉴定 | 第27页 |
| ·沙门氏菌总DNA 的提取 | 第27页 |
| ·沙门氏菌ⅠnvA 基因PCR 扩增 | 第27页 |
| ·PCR 产物分析 | 第27页 |
| ·沙门氏菌血清群的鉴定 | 第27-28页 |
| ·沙门氏菌药敏试验 | 第28页 |
| ·沙门氏菌基因组DNA 的提取 | 第28页 |
| ·沙门氏菌质粒的提取 | 第28-29页 |
| ·Ⅰ 类整合子和19 种耐药基因的PCR 扩增检测 | 第29-31页 |
| ·Ⅰ 类整合子5’端整合酶和3’端保守区PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·Ⅰ 类整合子基因盒PCR 扩增 | 第30页 |
| ·19 种耐药基因PCR 扩增 | 第30-31页 |
| ·PCR 产物分析 | 第31页 |
| ·耐药基因多重PCR 方法的建立 | 第31-33页 |
| ·沙门氏菌总DNA 的提取 | 第31页 |
| ·多重PCR 反应条件优化方案 | 第31页 |
| ·氨基糖苷类耐药基因三重PCR 方法的建立 | 第31-32页 |
| ·氯霉素类耐药基因三重PCR 方法的建立 | 第32页 |
| ·四环素类耐药基因二重PCR 方法的建立 | 第32-33页 |
| ·PCR 产物分析 | 第33页 |
| ·荧光定量PCR | 第33-38页 |
| ·标准品的制备 | 第33-36页 |
| ·沙门氏菌中aph(3)-Ⅱa 基因的定量 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-52页 |
| ·临床健康猪直肠沙门氏菌的分离鉴定结果 | 第38-40页 |
| ·沙门氏菌的分离鉴定 | 第38页 |
| ·沙门氏菌分离株的PCR 鉴定 | 第38-39页 |
| ·沙门氏菌分离株生化试验鉴定结果 | 第39页 |
| ·沙门氏菌分离株血清群分布情况 | 第39-40页 |
| ·规模猪场临床健康猪沙门氏菌带菌情况 | 第40页 |
| ·沙门氏菌分离株药物感受性情况 | 第40-42页 |
| ·沙门氏菌分离株Ⅰ 类整合子和耐药基因检测结果 | 第42-52页 |
| ·22 株沙门氏菌Ⅰ 类整合子检测结果 | 第42-43页 |
| ·沙门氏菌分离株基因组DNA 耐药基因检测结果 | 第43-44页 |
| ·沙门氏菌分离株质粒耐药基因检测结果 | 第44-45页 |
| ·耐药基因多重PCR 方法的建立结果 | 第45-47页 |
| ·氨基糖苷类耐药基因三重PCR 方法的建立 | 第45-46页 |
| ·氯霉素类耐药基因三重PCR 方法的建立 | 第46页 |
| ·四环素类耐药基因二重PCR 方法的建立 | 第46-47页 |
| ·aph(3)-Ⅱa 基因荧光定量PCR 方法的建立 | 第47-52页 |
| ·aph(3)-Ⅱa-1 片段的PCR 扩增 | 第47页 |
| ·pMD-APH 重组质粒的PCR 鉴定 | 第47-48页 |
| ·pMD-APH 重组质粒测序结果与原始序列的比较 | 第48页 |
| ·荧光定量PCR 标准品的建立 | 第48页 |
| ·荧光PCR 引物扩增目的片段的验证 | 第48-49页 |
| ·荧光PCR 检测方法的敏感性试验结果 | 第49页 |
| ·荧光PCR 检测方法的稳定性试验结果 | 第49-50页 |
| ·22 株沙门氏菌质粒aph(3)-Ⅱa 基因荧光定量PCR 鉴定结果 | 第50-51页 |
| ·22 株沙门氏菌基因组DNA 中aph(3)-Ⅱa 基因荧光定量PCR 鉴定结果 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| ·影响不同阶段临床健康猪沙门氏菌带菌率因素 | 第52页 |
| ·沙门氏菌分离株血清群分布 | 第52页 |
| ·沙门氏菌分离株药物感受性 | 第52-53页 |
| ·沙门氏菌分离株Ⅰ 类整合子和耐药基因分布 | 第53-54页 |
| ·复合PCR 同时检测多种耐药基因 | 第54页 |
| ·荧光定量PCR 方法对aph(3)-Ⅱa 基因的定量检测 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
| 在读期间发表论文 | 第67页 |
