PRRSV安徽株（AH0701）全基因组序列分析及灭活疫苗的研制
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-21页 |
| 1 材料与方法 | 第21-34页 |
| ·病毒 | 第21页 |
| ·细胞 | 第21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·载体、菌种及分子生物学试剂 | 第21-22页 |
| ·溶液和培养基的配制 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·细胞培养 | 第23页 |
| ·病毒增殖 | 第23页 |
| ·PRRSV 安徽株全基因组引物设计 | 第23页 |
| ·总RNA 提取 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR | 第24页 |
| ·PCR 扩增产物的纯化、克隆 | 第24-26页 |
| ·RT-PCR 产物回收与纯化 | 第24-25页 |
| ·外源DNA 片段与质粒载体的连接反应 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25页 |
| ·质粒DNA 小量制备 | 第25-26页 |
| ·重组转移质粒的PCR 鉴定 | 第26页 |
| ·末端快速扩增方法（RACE） | 第26-29页 |
| ·3’-Full RACE | 第26-27页 |
| ·5’-Full RACE | 第27-29页 |
| ·全基因组测序及序列分析 | 第29-30页 |
| ·病毒效价测定 | 第30页 |
| ·PRRSV 的灭活及灭活效果检验 | 第30页 |
| ·免疫佐剂及灭活疫苗的制备 | 第30页 |
| ·成品检验 | 第30-31页 |
| ·PRRSV 抗体的ELISA 检测 | 第31页 |
| ·PRRS 灭活疫苗安全性检验 | 第31页 |
| ·PRRS 灭活疫苗不同剂量免疫试验 | 第31-32页 |
| ·PRRS 灭活疫苗三种不同免疫程序比较试验 | 第32页 |
| ·PRRS 灭活疫苗与商品灭活疫苗比较试验 | 第32页 |
| ·PRRS 灭活疫苗免疫效力试验 | 第32-33页 |
| ·攻毒保护试验 | 第32-33页 |
| ·病毒效价测定 | 第33页 |
| ·RNA 提取 | 第33页 |
| ·RT-PCR | 第33页 |
| ·PRRSV 抗体的ELISA 监测 | 第33页 |
| ·统计学分析 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-46页 |
| ·RT-PCR 扩增及产物的纯化、克隆 | 第34页 |
| ·序列测序与分析结果 | 第34-40页 |
| ·病毒增殖 | 第40页 |
| ·病毒效价测定 | 第40页 |
| ·PRRSV 的灭活及灭活效果检验 | 第40页 |
| ·成品检验 | 第40-41页 |
| ·PRRS 灭活疫苗安全性检验 | 第41页 |
| ·PRRS 灭活疫苗不同剂量免疫试验 | 第41-42页 |
| ·PRRS 灭活疫苗的三种免疫程序比较试验 | 第42-43页 |
| ·PRRS 灭活苗与两种商品灭活苗比较试验 | 第43-44页 |
| ·PRRS 灭活疫苗免疫效力试验 | 第44-46页 |
| 3 讨论 | 第46-50页 |
| ·Nsp2 基因的缺失 | 第46-47页 |
| ·PRRSV 的变异情况 | 第47页 |
| ·PRRSV 的变异规律 | 第47页 |
| ·灭活疫苗的研制及检测 | 第47-48页 |
| ·弱毒疫苗与灭活疫苗的利弊 | 第48-49页 |
| ·PRRSV-AH0701 的攻毒试验 | 第49-50页 |
| 4 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59页 |
| 在读期间发表论文 | 第59页 |
