| 缩略语表(ABBREVIATION) | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-27页 |
| ·猪链球菌病的危害与防治 | 第15-19页 |
| ·病原学 | 第15-16页 |
| ·流行病学 | 第16页 |
| ·临床症状 | 第16-17页 |
| ·病理变化 | 第17页 |
| ·诊断 | 第17页 |
| ·治疗与防制 | 第17-19页 |
| ·猪链球菌毒力因子及致病机理研究进展 | 第19-22页 |
| ·荚膜多糖(CPS) | 第19页 |
| ·溶菌酶释放蛋白(MRP)和细胞外因子(EF) | 第19-20页 |
| ·溶血素(Sly) | 第20-21页 |
| ·纤连蛋白结合蛋白(FBPS) | 第21页 |
| ·Sortase | 第21页 |
| ·透明质酸裂解酶(hyaluronate lyase) | 第21-22页 |
| ·血清浑浊因子(Serum Opacific Factor,OFS) | 第22页 |
| ·89K序列 | 第22页 |
| ·其它猪链球菌毒力因子 | 第22页 |
| ·双组分调控系统 | 第22-27页 |
| ·TCS的组成及信号转导模式 | 第23-24页 |
| ·TCS与细菌的致病性 | 第24-25页 |
| ·TCS与与疾病防控 | 第25-27页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 第3章 材料与方法 | 第28-51页 |
| ·实验材料 | 第28-35页 |
| ·菌株、质粒、细胞和培养条件 | 第28-30页 |
| ·主要试剂、耗材、试剂盒及仪器 | 第30-31页 |
| ·培养基及抗生素的配制 | 第31-32页 |
| ·主要溶液及配制 | 第32-35页 |
| ·引物 | 第35页 |
| ·实验动物 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-51页 |
| ·细菌的增殖及SS2基因组DNA的提取 | 第35-37页 |
| ·PCR产物或酶切产物的回收与纯化 | 第37页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·连接产物的转化 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第38页 |
| ·细菌计数 | 第38-39页 |
| ·重组转移质粒的构建 | 第39-40页 |
| ·SS2双基因缺失株Δ1910hk/rr的构建 | 第40-41页 |
| ·互补菌株CΔ1910hk/rr的构建 | 第41页 |
| ·Δ1910hk/rr与CΔ1910hk/rr的功能鉴定 | 第41-42页 |
| ·突变株的生物学特性研究 | 第42-43页 |
| ·细胞感染实验 | 第43-44页 |
| ·中性粒细胞(PMN)介导的杀菌实验 | 第44-45页 |
| ·突变株对CD-1小鼠致病力分析 | 第45-46页 |
| ·突变株对仔猪致病力分析 | 第46-47页 |
| ·动物试验统计分析 | 第47页 |
| ·基因芯片 | 第47-48页 |
| ·Real-time PCR | 第48页 |
| ·反应调节蛋白1910RR的克隆表达及纯化 | 第48-51页 |
| 第4章 结果与分析 | 第51-75页 |
| ·SS2中1910HK/RR编码基因的一般特征 | 第51-53页 |
| ·双组分调控系统1910HK/RR的生物学功能研究 | 第53-69页 |
| ·基因缺失突变株Δ1910hk/rr和互补菌株CΔ1910hk/rr的构建 | 第53-57页 |
| ·SS2 WT、Δ1910hk/rr和CΔ1910hk/rr的生物学特性研究 | 第57-61页 |
| ·基因1910hk/rr的缺失对SS2致病力的影响 | 第61-69页 |
| ·基因芯片 | 第69-72页 |
| ·基因芯片结果 | 第69页 |
| ·荧光定量PCR验证 | 第69-72页 |
| ·反应调控因子1910RR与受调控基因的结合特性研究 | 第72-75页 |
| ·反应调控因子1910RR的基因克隆与原核表达 | 第72-73页 |
| ·凝胶电泳迁移率实验 | 第73-75页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第75-81页 |
| ·讨论 | 第75-80页 |
| ·关于TCS与细菌的致病性 | 第75页 |
| ·关于双组分调控系统1910HK/RR选择 | 第75-76页 |
| ·1910HK/RR对SS2致病力的影响 | 第76-78页 |
| ·1910HK/RR调控SS2致病的可能分子机制 | 第78-80页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 附录 | 第92-94页 |
