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结核分枝杆菌DNA拓扑异构酶Ⅰ与DNA的相互作用研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略语索引第9-10页
1 DNA拓扑异构酶Ⅰ的研究进展第10-18页
   ·DNA拓扑异构酶的分类与功能第10-11页
     ·DNA拓扑异构酶的分类第10-11页
     ·DNA拓扑异构酶的功能第11页
   ·DNA拓扑异构酶的结构及其作用机制第11-13页
   ·DNA拓扑异构酶Ⅰ的分类与功能第13-15页
     ·Topo ⅠA第14页
     ·Topo ⅠB第14页
     ·Topo ⅠC第14-15页
   ·DNA Topo Ⅰ的活性第15-16页
     ·DNA Topo Ⅰ主要催化瞬时单链的断裂和连接第15页
     ·DNA Topo Ⅰ作用不需要能量供应第15页
     ·DNA Topo Ⅰ作用的碱基特异性情况第15-16页
     ·DNA Topo Ⅰ的其他活性第16页
   ·DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂第16页
   ·研究目的与意义第16-18页
2 材料与方法第18-28页
   ·试验材料第18-21页
     ·培养基第18页
     ·质粒与菌株第18-19页
     ·各种分子生物学酶、试剂盒及常用试剂第19页
     ·SDS-PAGE电泳用溶液及缓冲液第19-20页
     ·实验仪器第20-21页
   ·实验方法第21-28页
     ·蛋白质的诱导表达与纯化第21页
     ·蛋白质的亲和层析纯化第21-23页
     ·用SDS-PAGE分析蛋白纯度及分子量第23-24页
     ·蛋白质的浓度测定第24页
     ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ的蛋白表达与纯化第24页
     ·大肠杆菌Topo Ⅰ的蛋白表达与纯化第24-25页
     ·大肠杆菌Topo Ⅲ的蛋白表达与纯化第25页
     ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ松弛活性的测定第25页
     ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ的双链DNA(STS)结合活性的测定第25-26页
     ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ的双链DNA(无STS)结合活性的测定第26-27页
     ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ的单链DNA结合活性的测定第27页
     ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ的RNA结合活性的测定第27页
     ·大肠杆菌Topo Ⅰ的双链DNA结合活性的测定第27页
     ·大肠杆菌Topo Ⅲ的双链DNA结合活性的测定第27-28页
3 结果与分析第28-44页
   ·不同环境因素对结核分枝杆菌Topo Ⅰ的松弛活性的影响第28-33页
     ·几种反应条件对结核分枝杆菌Topo Ⅰ松弛活性的影响第28-30页
     ·离子条件对结核分枝杆菌Topo Ⅰ松弛活性的影响第30-32页
     ·抑制剂EDTA对结核分枝杆菌Topo Ⅰ松弛超螺旋DNA的影响第32-33页
   ·不同条件对结核分枝杆菌Topo Ⅰ与双链DNA相互作用的影响第33-39页
     ·几种结合条件对结核分枝杆菌Topo Ⅰ结合双链DNA的影响第33-36页
     ·离子条件对结核分枝杆菌Topo Ⅰ结合双链DNA的影响第36-38页
     ·抑制剂EDTA对结核分枝杆菌Topo Ⅰ结合双链DNA的影响第38-39页
   ·不同条件对结核分枝杆菌Topo Ⅰ与单链DNA相互作用的影响第39-40页
   ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ与RNA的相互作用第40-41页
   ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ、大肠杆菌Topo Ⅰ、大肠杆菌Topo Ⅲ三种蛋白的DNA结合活性比较第41-44页
     ·三种蛋白与双链DNA的结合活性比较第41-42页
     ·三种蛋白与单链DNA的结合活性比较第42-43页
     ·三种蛋白与RNA的结合活性比较第43-44页
4 讨论第44-48页
   ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ蛋白具有较强的松弛活性第44-45页
   ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ与DNA的相互作用的特点第45-46页
   ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ具有很强的RNA结合活性第46-47页
   ·结核分枝杆菌Topo Ⅰ与大肠杆菌Topo Ⅰ、Topo Ⅲ具有不同的核酸结合性质第47-48页
参考文献第48-52页
致谢第52页

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