| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-30页 |
| ·植物的雄性不育 | 第12-22页 |
| ·植物雄性不育类型 | 第12-13页 |
| ·植物花药发育的研究进展 | 第13-16页 |
| ·植物雄性育性基因的研究进展 | 第16-17页 |
| ·植物雄性不育基因的分离方法 | 第17-22页 |
| ·图位克隆法 | 第18-19页 |
| ·同源序列候选基因法 | 第19-20页 |
| ·转座子标签技术 | 第20-21页 |
| ·mRNA差异显示技术 | 第21-22页 |
| ·远缘杂交与表观遗传变异 | 第22-26页 |
| ·植物的远缘杂交 | 第22页 |
| ·植物的远缘的意义 | 第22页 |
| ·远缘杂交中的表观遗传变异 | 第22-26页 |
| ·基因沉默 | 第23页 |
| ·核仁显性 | 第23-24页 |
| ·DNA甲基化 | 第24-26页 |
| ·DNA甲基化的研究方法 | 第26-29页 |
| ·基于重亚硫酸处理的甲基化的研究技术 | 第26-28页 |
| ·基因组重亚硫酸盐测序法 | 第27页 |
| ·结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法 | 第27-28页 |
| ·不依赖重亚硫酸盐处理的DNA甲基化的分析技术 | 第28-29页 |
| ·Southern blotting法 | 第28页 |
| ·MSAP技术 | 第28-29页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第29-30页 |
| 2. 材料和方法 | 第30-41页 |
| ·材料与试剂 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·常用试剂及其配制 | 第30-31页 |
| ·常用生物信息学网站和分析软件 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-41页 |
| ·半薄切片的制作 | 第31-32页 |
| ·石蜡切片的制作 | 第32-33页 |
| ·半定量RT-PCR | 第33-35页 |
| ·RNA的提取 | 第33页 |
| ·RNA的检测 | 第33-34页 |
| ·总RNA中基因组DNA的消除 | 第34页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第34-35页 |
| ·半定量RT-PCR | 第35页 |
| ·ms2Bnap同源基因的克隆 | 第35-37页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·ms2Bnap同源基因的PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·DNA片段回收 | 第37页 |
| ·感受态细胞制备及TA克隆 | 第37-39页 |
| ·受体菌的培养 | 第37-38页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第38页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第38页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第38-39页 |
| ·测序 | 第39页 |
| ·序列比较分析 | 第39页 |
| ·DNA甲基化变异 | 第39-41页 |
| ·基因组DNA亚硫酸氢盐修饰 | 第39-40页 |
| ·亚硫酸盐修饰DNA PCR | 第40-41页 |
| ·目的基因的克隆、测序 | 第41页 |
| ·测序结果的分析 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-53页 |
| ·可育株与不育株的花器官形态学差异 | 第41-42页 |
| ·可育株与不育株花粉发育的细胞学差异 | 第42-45页 |
| ·ms2Bnap同源序列在减数分裂时期、单核花粉粒时期的表达 | 第45-46页 |
| ·半定量RT-PCR | 第46页 |
| ·ms2Bnap同源基因DNA的克隆 | 第46-48页 |
| ·PCR扩增结果 | 第46-47页 |
| ·PCR产物的克隆及序列分析 | 第47-48页 |
| ·DNA甲基化变异 | 第48-53页 |
| ·高质量的DNA提取及亚硫酸氢钠修饰 | 第48-49页 |
| ·目的片段的甲基化变异检测 | 第49-53页 |
| 4 讨论 | 第53-58页 |
| ·萝卜-芥蓝异源四倍体F_(10)的败育特点 | 第53-54页 |
| ·ms2Bnap基因突变对F_(10)代育性的影响 | 第54-55页 |
| ·DNA甲基化对F_(10)代育性的影响 | 第55-58页 |
| ·BSP过程中应该注意的问题 | 第55-56页 |
| ·DNA甲基化对F_(10)代育性的影响 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 致谢 | 第68页 |