| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语 (Abbriviations) | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-17页 |
| ·链霉菌研究及其简介 | 第11-14页 |
| ·天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor A3(2))简介 | 第11页 |
| ·阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)及阿维菌素简介 | 第11-12页 |
| ·放线紫红素合成基因簇简介 | 第12-13页 |
| ·阿维菌素合成基因簇简介 | 第13-14页 |
| ·链霉菌抗生素合成的多重调节系统简介 | 第14页 |
| ·链霉菌次级代谢调控研究现状分析 | 第14-15页 |
| ·链霉菌接合转移简介 | 第15-16页 |
| ·本课题研究的理论依据,目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-32页 |
| ·菌株 | 第17-19页 |
| ·质粒 | 第19-20页 |
| ·培养基和生化试剂 | 第20-23页 |
| ·实验方法 | 第23-32页 |
| ·链霉菌培养及菌种保藏 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的小量提取方法 | 第24页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的少量快速提取及检测 | 第24-25页 |
| ·链霉菌总DNA的提取方法 | 第25页 |
| ·苯酚:氯仿纯化DNA方法 | 第25-26页 |
| ·去磷酸化反应 | 第26页 |
| ·补平反应 | 第26-27页 |
| ·酶连反应 | 第27页 |
| ·大肠杆菌和链霉菌的两亲本属间接合转移方法 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法)及转化 | 第28页 |
| ·DNA片段凝胶回收(试剂盒回收) | 第28-29页 |
| ·AT克隆 | 第29-30页 |
| ·PCR及相关技术 | 第30-31页 |
| ·放线紫红素的分光光度计检测 | 第31页 |
| ·阿维菌素的HPLC测定 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-52页 |
| ·关于天蓝色链霉菌中放线紫红素生物合成上调基因对阿维链霉菌中阿维菌素产量影响的研究 | 第32-45页 |
| ·Streptomyces coelicolor M600 cosmid文库的构建 | 第32-33页 |
| ·利用大肠杆菌-链霉菌接合转移系统初步筛选S.coelicolor M600cosmid文库中目标cosmid | 第33-34页 |
| ·初筛得到cosmids在变铅青链霉菌Streptomyces livians1326中异源表达 | 第34页 |
| ·观察含待研究cosmids的天蓝色链霉菌中放线紫红素表达量 | 第34-35页 |
| ·待研究cosmids的亚克隆,测序 | 第35-37页 |
| ·待研究cosmids在阿维链霉菌NRRL8165中异源表达,观察阿维菌素产量的变化 | 第37-40页 |
| ·待研究cosmids亚克隆及功能区域的初定位 | 第40-45页 |
| ·无机盐对阿维链霉菌接合转移及异源表达放线紫红素的影响 | 第45-52页 |
| ·F3上添加不同无机盐对大肠杆菌-链霉菌接合转移频率的影响 | 第45-46页 |
| ·2CM上添加不同无机盐对大肠杆菌-链霉菌接合转移频率的影响 | 第46-48页 |
| ·完全随机实验寻找优势组合 | 第48-50页 |
| ·完全随机实验结果分析及再验证 | 第50-51页 |
| ·接合转移子的验证 | 第51页 |
| ·放线紫红素合成基因簇在阿维链霉菌中异源表达 | 第51-52页 |
| 4 总结与讨论 | 第52-59页 |
| ·总结 | 第52-54页 |
| ·关于天蓝色链霉菌中放线紫红素生物合成上调基因对阿维链霉菌中阿维菌素产量影响的研究 | 第52-53页 |
| ·无机盐对阿维链霉菌接合转移及异源表达放线紫红素的影响 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| ·关于天蓝色链霉菌中放线紫红素生物合成上调基因对阿维链霉菌中阿维菌素产量影响的研究 | 第54-55页 |
| ·无机盐对阿维链霉菌接合转移及异源表达放线紫红素的影响 | 第55-57页 |
| ·展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
